高鹽、干旱和營養(yǎng)元素缺乏等非生物脅迫對植物生長發(fā)育有著重要影響。其中,高鹽和干旱是誘發(fā)高滲脅迫的重要因素,同時也是影響作物產(chǎn)量和品質(zhì)的常見逆境。缺磷狀態(tài)下植株的生長和發(fā)育受到明顯抑制。本研究以小麥小分子RNA TaMIR5062、TaMIR1139和促分裂原活化蛋白激酶TaMAPKK1、TaMAPKKK;A為對象,對上述成員應(yīng)答高鹽、干旱和低磷特征及耐逆功能進(jìn)行了較系統(tǒng)研究。主要結(jié)果如下:TaMIR5062前體序列長158 nt,成熟序列長23 nt。該小分子RNA對高鹽和干旱脅迫明顯應(yīng)答。采用DNA重組技術(shù),建立了正、反義表達(dá)該小分子RNA的煙草轉(zhuǎn)基因株系,對高鹽和干旱處理下轉(zhuǎn)基因株系的植株形態(tài)、保護(hù)酶活性、失水率、電導(dǎo)率和相關(guān)基因表達(dá)進(jìn)行了分析。結(jié)果表明,與野生型相比,超表達(dá)TaMIR5062的轉(zhuǎn)化株系植株表型和保水率均明顯改善,抗氧化酶活性增強(qiáng)。部分CAT、SOD和POD等細(xì)胞保護(hù)酶相關(guān)基因在轉(zhuǎn)化株系中呈上調(diào)表達(dá)模式。表明TaMIR5062可以通過調(diào)節(jié)特定保護(hù)酶相關(guān)基因表達(dá),改善植株抵御高滲脅迫的能力。TaMIR1139前體序列長216 nt,成熟序列長22 nt。該miRNA成... 

【文章來源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

TaMIR5062應(yīng)答逆境脅迫的表達(dá)模式

河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位（畢業(yè)）論文以 TaMIR5062 序列質(zhì)粒為模板，利用 TaMIR5062 的正、反義特異性引物擴(kuò)增該RNA 成員的正、反義序列。利用 DNA 重組技術(shù)，將 TaMIR5062 的正、反義序列分別融除報告基因的 pCAMBIA3301 中，獲得雙元表達(dá)載體 pCAMBIA3301- TaMIR5062AMBIA3301- TaMIR5062an。構(gòu)建過程如圖 3-3 所示。M 1 2 M 3 4 M 5 6 M 7 M 8 9 M 10 1100

圖 3-4 轉(zhuǎn)基因煙草株系的建立過程Figure 3-4 Establishment of transgenic tobacco lines T1培養(yǎng)基上培養(yǎng) 2 天的侵染外植體；B-C 為外植體在 T2培養(yǎng)基上生長出的愈傷組織及抗性芽；D-F 為轉(zhuǎn)移至 T3培養(yǎng)基的抗性芽和生F 為移栽的轉(zhuǎn)基因煙草植株。 高鹽和干旱處理下轉(zhuǎn)化株系的植株生長和形態(tài)特征野生型（WT）、正義系（Sen-1、Sen-2）和反義系（Ant）轉(zhuǎn)化株系為材料，對供培（營養(yǎng)液培養(yǎng)）和土培（蛭石培養(yǎng)培養(yǎng)），研究 NaCl、PEG 水培處理和高鹽、下的供試材料植株生長特性和形態(tài)特征。培培養(yǎng)試驗(yàn)表明，在正常生產(chǎn)條件（MS）下，供試 TaMIR5062 正、反義系和 W有明顯差異。在高鹽處理下，與 WT 相比，供試 TaMIR5062 正義系植株生長狀況現(xiàn)為植株形態(tài)大于野生型，根系發(fā)達(dá)，葉片顏色加深、葉肉增厚；相反，反義系WT 變差，表現(xiàn)為植株變小、根系長勢變?nèi)酢Ｔ?PEG 模擬干旱處理下，正義系植株強(qiáng)，表現(xiàn)為植株株形增大，相同葉位葉片的萎蔫程度低；而反義系在植株長勢減程度大于 WT（圖 3-5）。結(jié)果表明，TaMIR5062 對植株抵御高鹽和干旱逆境過程

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3006159