硒作為生命體中的必需微量元素有著增強(qiáng)人體免疫能力,降低病毒感染,防治癌癥等功能。而在生物體內(nèi),硒蛋白是硒元素（Se）發(fā)揮生物學(xué)作用的主要載體,迄今為止,人體中共發(fā)現(xiàn)有25種硒蛋白。在體內(nèi)環(huán)境下,由于硒蛋白中的硒代半胱氨酸（Sec）比半胱氨酸（Cys）的活性更強(qiáng)且更易親合,使它在氧化還原反應(yīng)中發(fā)揮了重要作用,硒蛋白的氧化還原功能研究也因此更為完整全面,其中硫氧還蛋白氧化還原酶家族（TrxRs）、谷胱甘肽過氧化物酶家族（GPXs）和脫碘酶家族（DIOs）是目前為止了解最為清楚的硒蛋白家族。與之相比,人們對其他硒蛋白的具體結(jié)構(gòu)和功能知之甚少,本文所研究的硒蛋白F（SELENOF）也是如此。文獻(xiàn)報道SELENOF是Trx樣折疊超家族中的一員;能通過其N端富含Cys的區(qū)域與UDP-葡萄糖:糖蛋白葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶（UGGT）緊密結(jié)合,增強(qiáng)UGGT的酶活性,推測SELENOF可與UGGT共同參與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）上糖蛋白折疊的加工過程;且結(jié)構(gòu)上與ER上的一種二硫鍵異構(gòu)酶（PDI）高度相似,并在表面有含Sec的氧化還原活性基序（-CxU-）。雖然對SELENOF結(jié)構(gòu)的探究越來越完善,但其潛在功能尚未被驗(yàn)證,... 

【文章來源】：深圳大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

SELENOF的三級結(jié)構(gòu)圖

應(yīng)用重組表達(dá)的 SELENOF 和基因敲除鼠研究 SELENOF 的生物學(xué)功能第 3 章 結(jié)果與分析實(shí)驗(yàn)純化驗(yàn)所構(gòu)建的質(zhì)粒，表達(dá)出的蛋白為 SELENOF(Sec→Cys)-GB1-His-ta 蛋白，需要在第一次鎳柱親和層析后進(jìn)行酶切，使得 SELENOF(S溶蛋白 GB1 和標(biāo)簽蛋白 His 分開，再進(jìn)行二次鎳柱親和層析，得到純ENOF(Sec→Cys)。

圖 3 膠內(nèi)酶切后質(zhì)譜圖挖取圖 2 酶切后組的 15kDa 左右的蛋白條帶，進(jìn)行膠內(nèi)酶切，所得溶液進(jìn)行質(zhì)譜分析。質(zhì)譜結(jié)果顯示（如圖 3），有較高純度的肽段來至于人源 15kDa 硒蛋白(SELENOF)可用于后續(xù)的體外實(shí)驗(yàn)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]CRISPR-Cas9的原理及其應(yīng)用進(jìn)展[J]. 楊佳儒,郭美華,柳愛華,寶福凱.  昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2016(05)
[2]硒與人體健康[J]. 張倩,傅青峰,夏弈明,段玉成.  中老年保健. 2016(01)
[3]iTRAQ技術(shù)及其在蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用[J]. 謝秀枝,王欣,劉麗華,董世雷,皮雄娥,劉偉.  中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2011(07)
[4]脂滴——細(xì)胞脂類代謝的細(xì)胞器[J]. 張淑妍,杜雅蘭,汪洋,劉平生.  生物物理學(xué)報. 2010(02)
[5]轉(zhuǎn)酮醇酶的研究進(jìn)展(英文)[J]. 趙靜,鐘春玖.  Neuroscience Bulletin. 2009(02)
[6]硒的生態(tài)環(huán)境與人體健康[J]. 齊玉薇,史長義.  微量元素與健康研究. 2005(02)



本文編號：2990587