尼氏真綏螨Euseius nicholsi（Ehara et Lee）隸屬于植綏螨科Phytoseidae,是一種重要的捕食性螨類,主要捕食二斑葉螨（Tetranyus urticae）、柑橘全爪螨（Panonychus citri）、蘋果全爪螨（Panonychus ulmi）等農(nóng)業(yè)害螨。該螨具有繁殖速度快、發(fā)育歷期短、捕食量高等優(yōu)點(diǎn),在生物防治中具有很好的應(yīng)用潛力,但至今未實(shí)現(xiàn)低成本擴(kuò)繁。卵黃原蛋白（Vitellogenin）是卵生動(dòng)物卵黃蛋白的前體,在卵黃發(fā)生和胚胎形成中起決定性作用,可以作為衡量生物繁殖能力的標(biāo)志物。了解尼氏真綏螨卵黃原蛋白的分子信息可以迅速地評(píng)估人工飼料的適宜性。目前未見關(guān)于尼氏真綏螨卵黃原蛋白的分子信息的報(bào)道。本研究分析了飼喂不同食物后對(duì)尼氏真綏螨產(chǎn)卵量和孵化率的影響;克隆獲得尼氏真綏螨的兩個(gè)卵黃原蛋白基因,并探討了兩個(gè)基因在不同發(fā)育階段和不同食物飼喂后mRNA的表達(dá)模式。主要結(jié)果如下:一、不同食物飼喂后對(duì)尼氏真綏螨產(chǎn)卵量和孵化率的影響尼氏真綏螨在交配之后即可產(chǎn)卵,其產(chǎn)卵量開始急劇增加,在第4天達(dá)到峰值,隨后產(chǎn)卵量逐漸下降。本研究發(fā)現(xiàn),不同食物飼喂會(huì)顯著地影... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖２－２不同食物詞喂后尼氏真綏螨總產(chǎn)卵量??Ｆｉｇｕｒｅ?２－２?Ｆｅｃｕｎｄｉｔｙ?ｏｆ?Ｅ．?ｎｉｃｈｏｌｓｉ?ａｆｔｅｒ?ｆｅｄ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｆｏｏｄ?ｓｏｕｒｃｅｓ??

?第２章不同食物飼喂對(duì)尼氏真綏螨產(chǎn)卵量和孵化率的影響???１２０．０％?■??ｌｏｏ．ｏ％?■?＾?ａ?ａ?ａ??！?—?（?１?Ｂ?Ｊ??６〇－〇％＇?１１１?；ｉ??１?；］§?ｉ?１１??Ｐ．ｃｉｔｒｉ?Ｃ．ｊａｐｏｎｉｃａ?ｐｏｌｌｅｎ?Ｔ．?Ｃｉｎ?ｎａｂ?ａｒｉｎ?ｕｓ?Ｃ．?ｏ?ｌｅｉｆｅｒａ?Ａ?ｂｅｔ?ｐｏｌｌｅｎ??Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｆｏｏｄ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ??圖２－３不同食物飼喂后尼氏真綏螨卵的孵化率??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３?Ｅｇｇ?ｈａｔｃｈ?ｒａｔｅ?ｏｆ?Ｅ．?ｎｉｃｈｏｌｓｉ?ａｆｔｅｒ?ｆｅｄ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｆｏｏｄ?ｓｏｕｒｃｅｓ??２．３小結(jié)與討論??本研宂比較了尼氏真綏螨捕食自然獵物與取食植物花粉之后的產(chǎn)卵規(guī)律，為??尋找廉價(jià)的人工飼料提供依據(jù)。研宄發(fā)現(xiàn)，食物類型會(huì)顯著地影響螨蟲種群的動(dòng)??態(tài)變化。柑橘全爪螨飼喂的尼氏真綏螨總產(chǎn)卵量最高，每雌產(chǎn)卵量達(dá)到２２．４７粒，??分別是飼喂朱砂葉螨組和詞喂茶花花粉組的產(chǎn)卵量的１．１１和１．２３倍，飼喂油茶??花粉的總產(chǎn)卵量最低，僅為１５．４７粒。王吉和趙云龍等人分別研究了不同食物飼??喂對(duì)江原鈍綏螨和胡瓜鈍綏螨繁殖力的影響，研宄發(fā)現(xiàn)飼喂食物不同會(huì)導(dǎo)致江原??鈍綏螨和胡瓜鈍綏螨在產(chǎn)卵量上出現(xiàn)差異［２１＿＇己有研宄表明，性腺的營(yíng)養(yǎng)攝入??和最佳分配可以增強(qiáng)個(gè)體的繁殖力，而不同食物中含有的可溶性蛋白和糖分含量??不同，因此不同的食物飼喂可以顯著影響螨蟲種群的動(dòng)態(tài)變化［１２］。不同飼喂組中，??尼氏真綏蠘卵的孵化率均在９０％以上，各組之間差異不顯著（Ｐ＞０．０５）。己有研宄??表明，食物類型對(duì)尼氏真綏螨卵的孵化率影響不顯著

?第３章尼氏真綏螨卵黃原蛋白基因全長(zhǎng)的克隆???３．２結(jié)果與分析??３．２．１尼氏真綏蝸卵黃原蛋白ｃＤＮＡ全長(zhǎng)克隆結(jié)果??３．２．１．１尼氏真綏螨總ＲＮＡ提取質(zhì)？??使用１％的瓊脂糖凝膠檢測(cè)總ＲＮＡ樣品的質(zhì)量，電泳檢測(cè)到２８?Ｓ和１８?Ｓ兩??條明顯的亮帶，結(jié)果如圖３－１所示。使用微量分光光度計(jì)（ＮａｎｏＤｒｏｐ?２０００）檢測(cè)??到總ＲＮＡ樣品的Ａ２６０／Ａ２８０比值為２．０３，由此可知總ＲＮＡ完整性良好，可以??進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。??Ｍａｋｅｒ?ＲＮＡ??｜曬３碧??２０００?ｂｐ｜?＿?２８Ｓ??１０００?ｂｐ?■?＇??７５０?ｂｐ?Ｈ｜?１?邏?１８Ｓ??ｉ〇〇?ｂＰ?＾??圖３－１尼氏真綏螨總ＲＮＡ電泳圖??Ｆｉｇｕｒｅ?３－１?Ｔｈｅ?ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｆｒｏｍ?Ｅ．?ｎｉｃｈｏｌｓｉ??３．２．１．２尼氏真綏螨卵黃原蛋白保守序列的擴(kuò)增??以反轉(zhuǎn)得到的ｃＤＮＡ為模板，使用引物對(duì)作７－５Ｒ、??３Ｆ／￡ｎＦｇ八３Ｒ、￡＂Ｋｇ２－３Ｆ／￡＂ｂ２－３Ｒ進(jìn)行ＰＣＲ。將ＰＣＲ產(chǎn)物??進(jìn)行電泳檢測(cè)，結(jié)果如圖３－２所示。片段１為引物對(duì)￡？吃７況／心１令；－５１１擴(kuò)增產(chǎn)物，??片段２為引物對(duì)仏Ｆｇ２－５Ｆ／￡？?Ｆｇ２－５?Ｒ擴(kuò)增產(chǎn)物，片段３為引物對(duì)及７?－３?Ｆ／￡ｎ?－??３Ｒ擴(kuò)增產(chǎn)物，片段４為引物對(duì)沿７作２－３Ｆ／Ｂ７Ｆｇ２－３Ｒ擴(kuò)增產(chǎn)物。將ＰＣＲ產(chǎn)物送往上海??生物有限責(zé)任公司測(cè)序，然后在ＮＣＢＩ網(wǎng)站比對(duì)確認(rèn)測(cè)序結(jié)果。??２１??


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