調(diào)控Smad7基因?qū)︸:鄹泶窠琴|(zhì)形成細胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響
發(fā)布時間:2021-01-16 05:15
目的闡述Smad7對瘢痕疙瘩角質(zhì)形成細胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影響。方法培養(yǎng)瘢痕疙瘩角質(zhì)形成細胞(KK細胞)和正常皮膚角質(zhì)形成細胞(NK細胞),構(gòu)建Smad7過表達慢病毒載體及Smad7干擾慢病毒載體,篩選最佳過表達和干擾慢病毒以及對照載體分別感染NK和KK細胞,嘌呤霉素篩選穩(wěn)定表達細胞株,將培養(yǎng)細胞分為8組:NK-Control(正常培養(yǎng)的NK細胞);NK-NC(對照慢病毒篩選的NK細胞);NK-shSmad7(干擾慢病毒篩選的NK細胞);NK-mSmad7(過表達慢病毒篩選的NK細胞);KK-Control(正常培養(yǎng)的KK細胞);KK-NC(對照慢病毒篩選的KK細胞);KK-shSmad7(干擾慢病毒篩選的KK細胞);KK-mSmad7(過表達慢病毒篩選的KK細胞)。CCK-8法觀察細胞的增殖情況,流式細胞儀檢測細胞的凋亡,Transwell小室檢測細胞的遷移能力,Western blot檢測上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵蛋白(N-cadherin和Occludin)表達情況。結(jié)果成功構(gòu)建Smad7干擾慢病毒載體和Sm...
【文章來源】:四川大學學報(醫(yī)學版). 2020,51(06)北大核心
【文章頁數(shù)】:7 頁
本文編號:2980218
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