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調(diào)控Smad7基因?qū)︸:鄹泶窠琴|(zhì)形成細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-01-16 05:15
  目的闡述Smad7對(duì)瘢痕疙瘩角質(zhì)形成細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影響。方法培養(yǎng)瘢痕疙瘩角質(zhì)形成細(xì)胞(KK細(xì)胞)和正常皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞(NK細(xì)胞),構(gòu)建Smad7過表達(dá)慢病毒載體及Smad7干擾慢病毒載體,篩選最佳過表達(dá)和干擾慢病毒以及對(duì)照載體分別感染NK和KK細(xì)胞,嘌呤霉素篩選穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株,將培養(yǎng)細(xì)胞分為8組:NK-Control(正常培養(yǎng)的NK細(xì)胞);NK-NC(對(duì)照慢病毒篩選的NK細(xì)胞);NK-shSmad7(干擾慢病毒篩選的NK細(xì)胞);NK-mSmad7(過表達(dá)慢病毒篩選的NK細(xì)胞);KK-Control(正常培養(yǎng)的KK細(xì)胞);KK-NC(對(duì)照慢病毒篩選的KK細(xì)胞);KK-shSmad7(干擾慢病毒篩選的KK細(xì)胞);KK-mSmad7(過表達(dá)慢病毒篩選的KK細(xì)胞)。CCK-8法觀察細(xì)胞的增殖情況,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的凋亡,Transwell小室檢測細(xì)胞的遷移能力,Western blot檢測上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵蛋白(N-cadherin和Occludin)表達(dá)情況。結(jié)果成功構(gòu)建Smad7干擾慢病毒載體和Sm... 

【文章來源】:四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2020,51(06)北大核心

【文章頁數(shù)】:7 頁


本文編號(hào):2980218

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