本研究克隆了水牛BCL2-like 10（BCL2L10）基因序列,并用生物信息學(xué)技術(shù)分析了該序列的同源性、系統(tǒng)進(jìn)化樹、蛋白的理化性質(zhì)以及高級結(jié)構(gòu)。同時(shí)利用免疫熒光染色的方法檢測了BCL2L10蛋白在水牛卵母細(xì)胞成熟前后的表達(dá)情況。結(jié)果表明,應(yīng)用RT-PCR技術(shù)克隆得到的水牛BCL2L10基因序列全長600 bp,其中編碼區(qū)長度為558 bp,共編碼185個(gè)氨基酸。對該序列進(jìn)行對比分析發(fā)現(xiàn),水牛BCL2L10基因的核苷酸序列與野牛、牛、綿羊、小鼠、大鼠、野豬的同源性分別為99%、98%、96%、84%、81%、75%。生物進(jìn)化樹分析顯示,水牛BCL2L10基因與牦牛、野牛的親緣關(guān)系最近。生物信息學(xué)分析得到BCL2L10蛋白的分子量為21.6 k D,理論等電點(diǎn)為9.54。功能結(jié)構(gòu)域預(yù)測顯示BCL2L10蛋白屬于BCL-2家族成員,參與細(xì)胞凋亡調(diào)控過程。免疫熒光染色結(jié)果發(fā)現(xiàn),BCL2L10蛋白在水牛卵母細(xì)胞成熟過程中均有表達(dá)。 

【文章來源】：基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2017,36(02)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 結(jié)果與分析
    1.1 水牛BCL2L10基因的克隆、鑒定與測序
    1.2 同源性分析和生物進(jìn)化樹的構(gòu)建
    1.3 生物信息學(xué)分析
        1.3.1 水牛BCL2L10蛋白基本理化性質(zhì)分析
        1.3.2 BCL2L10蛋白信號肽、跨膜區(qū)、定位預(yù)測及親疏水性分析
        1.3.3 BCL2L10蛋白的二級結(jié)構(gòu)及功能結(jié)構(gòu)域分析
    1.4 BCL2L10蛋白在水牛卵母細(xì)胞成熟前后的表達(dá)
2 討論
3 材料與方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
    3.2 試驗(yàn)試劑
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 卵母細(xì)胞的收集和培養(yǎng)
        3.3.2 引物的設(shè)計(jì)和合成
        3.3.3 總RNA的提取
        3.3.4 RT-PCR
        3.3.5 PCR產(chǎn)物的連接和測序
        3.3.6 生物信息學(xué)分析
        3.3.7 早期胚胎免疫熒光染色
作者貢獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]利用TMT標(biāo)記結(jié)合2DLC-MS/MS技術(shù)對水牛卵母細(xì)胞體外成熟前后差異蛋白質(zhì)組的分析[J]. 陳富美,付強(qiáng),王煥景,趙秀靈,黃德倫,黃愉淋,潘宏,黃鳳玲,張明.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2015(09)



本文編號：2972560