蕓薹生鏈格孢（Alternaria brassicicola）能夠引起十字花科蔬菜產(chǎn)生黑斑病,造成產(chǎn)量和質(zhì)量下降,食用安全性降低,為該類(lèi)蔬菜生產(chǎn)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。轉(zhuǎn)錄因子對(duì)真菌的生長(zhǎng)發(fā)育及致病性等都具有重要的調(diào)控作用,C₆型鋅指轉(zhuǎn)錄因子參與多種真菌的產(chǎn)孢及致病性等的調(diào)控,但在蕓薹生鏈格孢中尚未報(bào)道。通過(guò)對(duì)該類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子基因功能的研究,有助于我們更加深入的認(rèn)識(shí)蕓薹生鏈格孢的生長(zhǎng)發(fā)育及致病機(jī)理,對(duì)有效防治黑斑病具有重要意義。本研究主要以蕓薹生鏈格孢（A.brassicicola）為研究對(duì)象,克隆了蕓薹生鏈格孢一個(gè)C₆型轉(zhuǎn)錄因子AB04837基因,根據(jù)同源重組的原理,利用Split-marker PCR重組技術(shù)以及PEG介導(dǎo)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化的方法,成功獲得了AB04837基因缺失突變體（ΔAB04837）,并構(gòu)建了互補(bǔ)體C1。通過(guò)基因缺失突變體與野生菌的對(duì)比研究發(fā)現(xiàn):（1）AB04837基因全長(zhǎng)為2104 bp,cDNA全長(zhǎng)為2055 bp,共編碼684個(gè)氨基酸,含有一個(gè)保守的Zn²⁺結(jié)構(gòu)域,有一個(gè)49 bp的內(nèi)含子,與小麥長(zhǎng)蠕... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

AB04837基因的DNA和cDNA進(jìn)行PCR驗(yàn)證的瓊脂糖凝膠電泳圖

圖 1 AB04837 基因的 DNA 和 cDNA 進(jìn)行 PCR 驗(yàn)證的瓊脂糖凝膠電泳圖Fig.1 Agarose gel electrophoresis of the PCR product from the AB04837 DNA and cDNAM：DL 2000 Plus DNA Marker 1：DNA 全長(zhǎng) 2：cDNA 全長(zhǎng)用SMART工具對(duì)蕓薹生鏈格孢鋅指轉(zhuǎn)錄因子AB04837基因的氨基酸序列析，發(fā)現(xiàn)在該序列的 58 bp~103 bp之間存在著 Zn2+的保守結(jié)構(gòu)域，圖 2為A氨基酸序列分析結(jié)果。

圖3為蕓薹生鏈格孢轉(zhuǎn)錄因子AB04837基因的部分氨基酸序列與其他物種的氨基酸序列的比對(duì)分析結(jié)果。從圖中可以看出，不同物種的氨基酸序列同源性含有一個(gè)同源的 Zn2+結(jié)合域和一個(gè)保守的結(jié)構(gòu)域 2，推測(cè)該結(jié)構(gòu)域在功能中。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[8]兩個(gè)Zn2Cys6鋅指蛋白對(duì)球孢白僵菌生長(zhǎng)及抗逆性的影響[D]. 李永霞.西南大學(xué) 2018
[9]蕓薹生鏈格孢（Alternaria brassicicola）AbSte12基因的鑒定及功能研究[D]. 張倩倩.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[10]主要葉類(lèi)蔬菜新病害發(fā)現(xiàn)及常見(jiàn)真菌病害調(diào)查研究[D]. 宋加偉.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017



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