大豆孢囊線蟲（Heterodera glycines）是大豆上最重要的土傳病原物之一。線蟲在發(fā)育過程中經(jīng)常會(huì)受到病原菌的威脅。為了抵御病原菌的危害,線蟲往往會(huì)表達(dá)抗菌蛋白質(zhì),如溶菌酶,但是線蟲對(duì)病原菌的具體防衛(wèi)機(jī)制至今還不明確。溶菌酶是線蟲中重要的防御酶,對(duì)植物線蟲溶菌酶基因的功能研究,有助于解釋線蟲的具體防御機(jī)制,為植物線蟲的防控提供理論基礎(chǔ)。本研究通過篩選轉(zhuǎn)錄組文庫,從大豆孢囊線蟲中分離了3個(gè)溶菌酶基因;采用原位雜交技術(shù)確定溶菌酶基因在大豆孢囊線蟲中的表達(dá)部位;采用qPCR方法檢測(cè)溶菌酶基因在參與線蟲防御作用中的轉(zhuǎn)錄特性,分析細(xì)菌感染線蟲后線蟲三個(gè)溶菌酶基因的表達(dá)模式;通過對(duì)溶菌酶基因RNA干擾后的大豆孢囊線蟲放置三種細(xì)菌中1-7天存活率的測(cè)定來對(duì)溶菌酶的防御功能進(jìn)行初步研究;采用計(jì)算菌落數(shù)、濁度測(cè)定法兩種方法測(cè)定體外表達(dá)的溶菌酶蛋白對(duì)細(xì)菌的抑制作用。原位雜交結(jié)果表明Hg23324、Hg21698和Hg17337這3個(gè)溶菌酶基因均在腸細(xì)胞中表達(dá)�；虮磉_(dá)量變化分析結(jié)果表明,在枯草芽孢桿菌和蘇云金芽孢桿菌誘導(dǎo)下,Hg23324基因表達(dá)顯著上調(diào)。在金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)下Hg21698和H... 

【文章來源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

大豆孢囊線蟲(Heteroderaglycines)病在中國(guó)的分布

常在根尖附近）而感染，在根內(nèi)又一次蛻皮成三齡幼蟲，蟲體膨一次蛻皮后成四齡幼蟲，此時(shí)雌雄形狀差異變得明顯，雄蟲恢復(fù)體型呈現(xiàn)燒瓶狀。雌成蟲為黃白色體型呈現(xiàn)檸檬形，當(dāng)發(fā)育完全楚的看見，這些微小的檸檬形的雌蟲是比較依賴于溫度的，通常弱它們也會(huì)減少，因?yàn)楦呀?jīng)不滿足它們對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求，而且不節(jié)不容易區(qū)分，因?yàn)榧?xì)菌形成的結(jié)節(jié)要大得多。雌蟲是通過頭部此時(shí)要檢驗(yàn)雌蟲的存在，要輕輕挖掘而不是使勁拔出根。線蟲后期形，通體透明，尾部彎曲。受到雌成蟲釋放的信息素后，雄成蟲進(jìn)行交配（劉維志，2004）。雌雄交配后雄蟲死亡雌蟲退出根部并育形成卵粒，后形成深褐色的孢囊包住可存活的卵，孢囊在土壤時(shí)間，來年開始下一輪生活史，這使得蟲害管理策略復(fù)雜化。陳 天為一輪完整的生活史（陳貴省等，2000）。蟲的抗逆性非常強(qiáng)，并且非�！奥斆鳌�。如果條件合適，卵孵化后的侵染源，如果條件不適宜沒有孵化，孢囊內(nèi)的卵可以存活很長(zhǎng)下可以存活 10 年（段玉璽，2011）。大豆孢囊線蟲行動(dòng)速度慢，要通過風(fēng)力、農(nóng)事操作、病株的轉(zhuǎn)移等。

學(xué)院碩士學(xué)位論文 第侵染，根系無法充分吸收營(yíng)養(yǎng)導(dǎo)致地上部也會(huì)發(fā)生變化。癥狀為整個(gè)植株并且容易脫落(Davisetal.,2000)，這種癥狀并不是 SCN 侵染所特有的，別、農(nóng)藥的使用和普通的營(yíng)養(yǎng)少也會(huì)導(dǎo)致此癥狀。如果危害嚴(yán)重的話，植株一些土壤肥沃、水分供應(yīng)充足的地方會(huì)降低這種癥狀，所以就算有時(shí)會(huì)發(fā)生可能也不能立馬發(fā)現(xiàn)，直到情況非常嚴(yán)重，導(dǎo)致嚴(yán)重減產(chǎn)時(shí)才會(huì)意識(shí)到這K 肥和 SCN 感染土地后癥狀類似，所以生產(chǎn)者一發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)此類癥狀就以為鉀肥的施用量，這影響了 SCN 的防治。Chen 等發(fā)現(xiàn)在大豆上的幾種真菌后的傷口進(jìn)入的，它們發(fā)現(xiàn)在大豆孢囊線蟲穿透過的幼根更容易感染和定大豆猝死征是一種由鐮刀菌引起的病害，研究者發(fā)現(xiàn)這種病害發(fā)生位置集緊實(shí)的地區(qū)，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)如果有 SCN 與之共同侵染，可以使得大豆猝死病產(chǎn)量損失更為嚴(yán)重(XingandWestphal.,2006;McleanandLawrence.,1993)。一塊侵染植株時(shí)，一般會(huì)想到要首先防治 SCN。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：2959240