大豆抱囊線蟲(Heterodera glycines)溶菌酶基因克隆及功能初步分析
發(fā)布時間:2021-01-05 20:19
大豆孢囊線蟲(Heterodera glycines)是大豆上最重要的土傳病原物之一。線蟲在發(fā)育過程中經(jīng)常會受到病原菌的威脅。為了抵御病原菌的危害,線蟲往往會表達抗菌蛋白質(zhì),如溶菌酶,但是線蟲對病原菌的具體防衛(wèi)機制至今還不明確。溶菌酶是線蟲中重要的防御酶,對植物線蟲溶菌酶基因的功能研究,有助于解釋線蟲的具體防御機制,為植物線蟲的防控提供理論基礎。本研究通過篩選轉(zhuǎn)錄組文庫,從大豆孢囊線蟲中分離了3個溶菌酶基因;采用原位雜交技術(shù)確定溶菌酶基因在大豆孢囊線蟲中的表達部位;采用qPCR方法檢測溶菌酶基因在參與線蟲防御作用中的轉(zhuǎn)錄特性,分析細菌感染線蟲后線蟲三個溶菌酶基因的表達模式;通過對溶菌酶基因RNA干擾后的大豆孢囊線蟲放置三種細菌中1-7天存活率的測定來對溶菌酶的防御功能進行初步研究;采用計算菌落數(shù)、濁度測定法兩種方法測定體外表達的溶菌酶蛋白對細菌的抑制作用。原位雜交結(jié)果表明Hg23324、Hg21698和Hg17337這3個溶菌酶基因均在腸細胞中表達;虮磉_量變化分析結(jié)果表明,在枯草芽孢桿菌和蘇云金芽孢桿菌誘導下,Hg23324基因表達顯著上調(diào)。在金黃色葡萄球菌誘導下Hg21698和H...
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學院北京市
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
大豆孢囊線蟲(Heteroderaglycines)病在中國的分布
常在根尖附近)而感染,在根內(nèi)又一次蛻皮成三齡幼蟲,蟲體膨一次蛻皮后成四齡幼蟲,此時雌雄形狀差異變得明顯,雄蟲恢復體型呈現(xiàn)燒瓶狀。雌成蟲為黃白色體型呈現(xiàn)檸檬形,當發(fā)育完全楚的看見,這些微小的檸檬形的雌蟲是比較依賴于溫度的,通常弱它們也會減少,因為根已經(jīng)不滿足它們對營養(yǎng)的需求,而且不節(jié)不容易區(qū)分,因為細菌形成的結(jié)節(jié)要大得多。雌蟲是通過頭部此時要檢驗雌蟲的存在,要輕輕挖掘而不是使勁拔出根。線蟲后期形,通體透明,尾部彎曲。受到雌成蟲釋放的信息素后,雄成蟲進行交配(劉維志,2004)。雌雄交配后雄蟲死亡雌蟲退出根部并育形成卵粒,后形成深褐色的孢囊包住可存活的卵,孢囊在土壤時間,來年開始下一輪生活史,這使得蟲害管理策略復雜化。陳 天為一輪完整的生活史(陳貴省等,2000)。蟲的抗逆性非常強,并且非!奥斆鳌薄H绻麠l件合適,卵孵化后的侵染源,如果條件不適宜沒有孵化,孢囊內(nèi)的卵可以存活很長下可以存活 10 年(段玉璽,2011)。大豆孢囊線蟲行動速度慢,要通過風力、農(nóng)事操作、病株的轉(zhuǎn)移等。
學院碩士學位論文 第侵染,根系無法充分吸收營養(yǎng)導致地上部也會發(fā)生變化。癥狀為整個植株并且容易脫落(Davisetal.,2000),這種癥狀并不是 SCN 侵染所特有的,別、農(nóng)藥的使用和普通的營養(yǎng)少也會導致此癥狀。如果危害嚴重的話,植株一些土壤肥沃、水分供應充足的地方會降低這種癥狀,所以就算有時會發(fā)生可能也不能立馬發(fā)現(xiàn),直到情況非常嚴重,導致嚴重減產(chǎn)時才會意識到這K 肥和 SCN 感染土地后癥狀類似,所以生產(chǎn)者一發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)此類癥狀就以為鉀肥的施用量,這影響了 SCN 的防治。Chen 等發(fā)現(xiàn)在大豆上的幾種真菌后的傷口進入的,它們發(fā)現(xiàn)在大豆孢囊線蟲穿透過的幼根更容易感染和定大豆猝死征是一種由鐮刀菌引起的病害,研究者發(fā)現(xiàn)這種病害發(fā)生位置集緊實的地區(qū),同時也發(fā)現(xiàn)如果有 SCN 與之共同侵染,可以使得大豆猝死病產(chǎn)量損失更為嚴重(XingandWestphal.,2006;McleanandLawrence.,1993)。一塊侵染植株時,一般會想到要首先防治 SCN。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]豬溶菌酶在大腸桿菌中的表達及其復性[J]. 朱德偉,蔡國林,陸健. 食品與發(fā)酵工業(yè). 2016(10)
[2]大豆種質(zhì)資源對胞囊線蟲病1號、3號和4號生理小種的抗性鑒定[J]. 曹廣祿,趙雪,王強,孟憲新,魏淑紅,韓英鵬,武小霞,李文濱. 大豆科學. 2014(04)
[3]大豆孢囊線蟲生物防治研究進展[J]. 尉文彬,武玉環(huán),黃建明,鄭志興. 河北農(nóng)業(yè)科學. 2013(05)
[4]利用抗感品種混種防治大豆胞囊線蟲效果的研究[J]. 胡新,許艷麗,高世杰. 大豆科學. 2012(03)
[5]酸類化合物對大豆胞囊線蟲防效及寄主生長的影響[J]. 劉丹丹,段玉璽,陳立杰. 大豆科學. 2012(02)
[6]大豆胞囊線蟲病生物防治研究進展[J]. 陳立杰,王媛媛,朱曉峰,段玉璽. 沈陽農(nóng)業(yè)大學學報. 2011(04)
[7]HND1生物種衣劑防治大豆胞囊線蟲藥效研究[J]. 杜春梅,李海燕,李曉明,王彥杰,劉惕若,平文祥. 大豆科學. 2009(06)
[8]大豆根際促生菌Sneb207對不同種類線蟲毒性的研究[J]. 孫華,段玉璽,陳立杰,王媛媛. 大豆科學. 2009(04)
[9]秀麗隱桿線蟲抗性基因研究進展[J]. 陳星桃,王桂堂. 華中農(nóng)業(yè)大學學報. 2008(06)
[10]防治大豆胞囊線蟲芽孢桿菌初步篩選[J]. 段玉璽,于海峰,陳立杰,王勝君. 大豆科學. 2008(05)
碩士論文
[1]大豆胞囊線蟲(SCN)抗性QTL定位及相關SNP標記研究[D]. 劉杰.南昌大學 2012
[2]抗SCN3生化機制的初步研究[D]. 張軍.東北農(nóng)業(yè)大學 2001
本文編號:2959240
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學院北京市
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
大豆孢囊線蟲(Heteroderaglycines)病在中國的分布
常在根尖附近)而感染,在根內(nèi)又一次蛻皮成三齡幼蟲,蟲體膨一次蛻皮后成四齡幼蟲,此時雌雄形狀差異變得明顯,雄蟲恢復體型呈現(xiàn)燒瓶狀。雌成蟲為黃白色體型呈現(xiàn)檸檬形,當發(fā)育完全楚的看見,這些微小的檸檬形的雌蟲是比較依賴于溫度的,通常弱它們也會減少,因為根已經(jīng)不滿足它們對營養(yǎng)的需求,而且不節(jié)不容易區(qū)分,因為細菌形成的結(jié)節(jié)要大得多。雌蟲是通過頭部此時要檢驗雌蟲的存在,要輕輕挖掘而不是使勁拔出根。線蟲后期形,通體透明,尾部彎曲。受到雌成蟲釋放的信息素后,雄成蟲進行交配(劉維志,2004)。雌雄交配后雄蟲死亡雌蟲退出根部并育形成卵粒,后形成深褐色的孢囊包住可存活的卵,孢囊在土壤時間,來年開始下一輪生活史,這使得蟲害管理策略復雜化。陳 天為一輪完整的生活史(陳貴省等,2000)。蟲的抗逆性非常強,并且非!奥斆鳌薄H绻麠l件合適,卵孵化后的侵染源,如果條件不適宜沒有孵化,孢囊內(nèi)的卵可以存活很長下可以存活 10 年(段玉璽,2011)。大豆孢囊線蟲行動速度慢,要通過風力、農(nóng)事操作、病株的轉(zhuǎn)移等。
學院碩士學位論文 第侵染,根系無法充分吸收營養(yǎng)導致地上部也會發(fā)生變化。癥狀為整個植株并且容易脫落(Davisetal.,2000),這種癥狀并不是 SCN 侵染所特有的,別、農(nóng)藥的使用和普通的營養(yǎng)少也會導致此癥狀。如果危害嚴重的話,植株一些土壤肥沃、水分供應充足的地方會降低這種癥狀,所以就算有時會發(fā)生可能也不能立馬發(fā)現(xiàn),直到情況非常嚴重,導致嚴重減產(chǎn)時才會意識到這K 肥和 SCN 感染土地后癥狀類似,所以生產(chǎn)者一發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)此類癥狀就以為鉀肥的施用量,這影響了 SCN 的防治。Chen 等發(fā)現(xiàn)在大豆上的幾種真菌后的傷口進入的,它們發(fā)現(xiàn)在大豆孢囊線蟲穿透過的幼根更容易感染和定大豆猝死征是一種由鐮刀菌引起的病害,研究者發(fā)現(xiàn)這種病害發(fā)生位置集緊實的地區(qū),同時也發(fā)現(xiàn)如果有 SCN 與之共同侵染,可以使得大豆猝死病產(chǎn)量損失更為嚴重(XingandWestphal.,2006;McleanandLawrence.,1993)。一塊侵染植株時,一般會想到要首先防治 SCN。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]豬溶菌酶在大腸桿菌中的表達及其復性[J]. 朱德偉,蔡國林,陸健. 食品與發(fā)酵工業(yè). 2016(10)
[2]大豆種質(zhì)資源對胞囊線蟲病1號、3號和4號生理小種的抗性鑒定[J]. 曹廣祿,趙雪,王強,孟憲新,魏淑紅,韓英鵬,武小霞,李文濱. 大豆科學. 2014(04)
[3]大豆孢囊線蟲生物防治研究進展[J]. 尉文彬,武玉環(huán),黃建明,鄭志興. 河北農(nóng)業(yè)科學. 2013(05)
[4]利用抗感品種混種防治大豆胞囊線蟲效果的研究[J]. 胡新,許艷麗,高世杰. 大豆科學. 2012(03)
[5]酸類化合物對大豆胞囊線蟲防效及寄主生長的影響[J]. 劉丹丹,段玉璽,陳立杰. 大豆科學. 2012(02)
[6]大豆胞囊線蟲病生物防治研究進展[J]. 陳立杰,王媛媛,朱曉峰,段玉璽. 沈陽農(nóng)業(yè)大學學報. 2011(04)
[7]HND1生物種衣劑防治大豆胞囊線蟲藥效研究[J]. 杜春梅,李海燕,李曉明,王彥杰,劉惕若,平文祥. 大豆科學. 2009(06)
[8]大豆根際促生菌Sneb207對不同種類線蟲毒性的研究[J]. 孫華,段玉璽,陳立杰,王媛媛. 大豆科學. 2009(04)
[9]秀麗隱桿線蟲抗性基因研究進展[J]. 陳星桃,王桂堂. 華中農(nóng)業(yè)大學學報. 2008(06)
[10]防治大豆胞囊線蟲芽孢桿菌初步篩選[J]. 段玉璽,于海峰,陳立杰,王勝君. 大豆科學. 2008(05)
碩士論文
[1]大豆胞囊線蟲(SCN)抗性QTL定位及相關SNP標記研究[D]. 劉杰.南昌大學 2012
[2]抗SCN3生化機制的初步研究[D]. 張軍.東北農(nóng)業(yè)大學 2001
本文編號:2959240
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