以牦牛GDF9和BMP15基因?yàn)檠芯繉ο?采用PCR方法分別克隆出GDF9和BMP15的兩個(gè)外顯子片段,RT-PCR方法分析了GDF9和BMP15及靶定mi RNA在各組織中的表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,克隆擴(kuò)增獲得外顯子區(qū)進(jìn)行生物信息學(xué)分析。牦牛GDF9基因外顯子片段長分別411 bp和1 082 bp,編碼453個(gè)氨基酸;BMP15基因外顯子片段長分別為323 bp和802 bp,編碼372個(gè)氨基酸。GDF9編碼蛋白是親水蛋白,含有一個(gè)信號肽和15個(gè)潛在磷酸化位點(diǎn);BMP15編碼蛋白是親水蛋白,不含信號肽,有6個(gè)潛在磷酸化位點(diǎn)。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法分析牦牛GDF9和BMP15基因在不同組織中的表達(dá)量,結(jié)果表明GDF9在卵巢和子宮中表達(dá)相對較高,且卵巢表達(dá)顯著高于其他組織,心、腎、胰和脾中無表達(dá)。BMP15僅在卵巢中表達(dá)。Target Scan預(yù)測靶定牦牛GDF9和BMP15基因的靶定mi RNA,分析GDF9靶基因bta-mi R-193a-3p和bta-mi R-193b在心、脾、肺、腎和子宮中的表達(dá)量,結(jié)果顯示bta-mi R-193a-3p脾中表達(dá)量顯著高于其他組織,但在心... 

【文章來源】：生物技術(shù)通報(bào). 2016年02期 北大核心

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1組織樣、細(xì)菌菌株和載體
        1.1.2分子生物學(xué)試劑
        1.1.3引物設(shè)計(jì)與合成
    1.2 方法
        1.2.1牦�？侱NA提取
        1.2.2 RNA的提取
        1.2.3反轉(zhuǎn)錄
        1.2.4 GDF9和BMP15基因的克隆
        1.2.5 GDF9和BMP15基因序列的生物信息學(xué)分析
            1.2.5.1理化性質(zhì)分析
            1.2.5.2進(jìn)化分析
        1.2.6 GDF9和BMP15基因靶標(biāo)mi RNA預(yù)測
2 結(jié)果
    2.1 牦牛GDF9和BMP15基因的序列分析
    2.2 牦牛GDF9和BMP15蛋白的生物信息學(xué)分析
        2.2.1牦牛GDF9和BMP15基因編碼蛋白一級結(jié)構(gòu)序列分析
        2.2.2牦牛GDF9和BMP15基因編碼蛋白二級和三級結(jié)構(gòu)序列分析
        2.2.3 牦牛GDF9 和BMP15 基因編碼蛋白的系統(tǒng)發(fā)育樹分析
    2.3 牦牛GDF9和BMP15組織表達(dá)分析
    2.4 牦牛GDF9和BMP15靶定mi RNA的預(yù)測篩選與表達(dá)分析
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Hsa-miR-193b抑制人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞株HEC-1B侵襲能力[J]. 李榮,陳雪梅,何俊琳,丁裕斌,楊德輝,許皓,鄭安舜,劉學(xué)慶.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(15)



本文編號：2939123