【摘要】：Mfe2為過氧化物酶體多功能酶類型 2(peroxisomal multifunctional enzyme type 2)基因,在脂肪酸的β氧化中起到了極其重要的作用。本研究旨在獲得和鑒定松墨天牛Monochamus alternatus的Mfe2基因,并原核表達(dá)其目的蛋白,分析其在不同蟲態(tài)和成蟲不同組織中的表達(dá)模式。1.在載體與目的片段之間,采用具有重疊區(qū)引物的快速克隆方法克隆到松墨天牛Mfe2基因,并命名為MaMfe2(GenBank登錄號(hào):MF944109),其ORF序列全長(zhǎng)為2 148 bp,編碼716個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)分子量大小為77.56 kD。2.對(duì)克隆所得序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析,結(jié)果顯示它與光肩星天牛Anoplophora glabripennis過氧化物酶體多功能酶2氨基酸序列一致性最高(為91%),存在AICARFT IMPCHas保守結(jié)構(gòu)域序列。IPTG誘導(dǎo)大腸桿菌原核表達(dá),并以Western blot結(jié)果驗(yàn)證Mfe2蛋白的成功表達(dá),Western blot檢測(cè)顯示大腸桿菌Escherichia coli BL21(DE3)中MaMfe2表達(dá)的蛋白與松墨天牛組織內(nèi)的Mfe2蛋白均與抗體有特異性結(jié)合。3.使用RT-qPCR技術(shù)分析這一基因在天牛不同蟲態(tài)和成蟲不同組織中的表達(dá)譜。發(fā)育表達(dá)譜結(jié)果表明,MaMfe2在松墨天牛蛹期表達(dá)量最高,在卵和幼蟲期表達(dá)量較低;組織表達(dá)譜結(jié)果表明,在成蟲不同組織中,MaMfe2在脂肪體中表達(dá)量最高,在前胸中表達(dá)量最低。綜上所述,MaMfe2(松墨天牛Mfe2基因)編碼過氧化物酶體多功能酶,在不同蟲態(tài)和成蟲組織中存在差異表達(dá)。本研究為進(jìn)一步探究該基因在松墨天牛中的功能奠定了基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S763.38
【圖文】：

圖１不同物種的比較（Ｔａｔｕｅｔａｌ．，２０１丨）邐Ｆｉｇ．邋１邋Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ邋ｏｆ邋ｐｅｒｏｘｉｓｏｍａｌ邋ＭＦＥ－２ｓ邋ｆｒｏｍ邋ｖａｒｉｏｕｓ邋ｓｐｅｃｉｅｓ．邋（Ｔａｔｕ邋ｅｔ邋ａｌ．，邋２０１黑色代表３Ｒ－羥烷基輔酶Ａ脫氫酶結(jié)構(gòu)域，垂直黑線條代表２Ｅ－烯酰輔酶Ａ水合構(gòu)域，白色代表ＳＣＰ－２Ｌ結(jié)構(gòu)域。逡逑

圖４．１邋Ｍｆｅ２蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)逡逑Ｆｉｇ．４．１邋Ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ邋ｓｅｃｏｎｄａｒｙ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ邋ｏｆ邋Ｍｆｅ２逡逑圖４．２邋Ｍｆｅ２蛋白的三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)逡逑Ｆｉｇ．４．２邋Ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ邋３Ｄ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ邋ｍｏｄｅｌ邋ｏｆ邋Ｍｆｅ２逡逑２２逡逑

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 馬向陽;李志強(qiáng);余華洋;馮志敏;;松墨天牛綠色防控試驗(yàn)防效評(píng)價(jià)[J];湖北林業(yè)科技;2018年02期

2 劉琪司;陳敬祥;林同;;松墨天牛分子生物學(xué)研究綜述[J];湖北農(nóng)業(yè)科學(xué);2017年07期

3 張霞;;松墨天牛的發(fā)生與防治探索[J];園林科技;2010年03期

4 趙錦年;應(yīng)杰;;松墨天牛取食為害與松樹枯死關(guān)系的研究[J];林業(yè)科學(xué);1989年05期

5 張濤;陳茂韜;;松墨天牛生物學(xué)特性初探[J];農(nóng)民致富之友;2017年22期

6 史先慧;馬濤;陸雪雷;沈婧;孫朝輝;溫秀軍;鄧培雄;;松墨天牛成蟲行為與化學(xué)生態(tài)學(xué)研究進(jìn)展[J];林業(yè)科學(xué)研究;2017年05期

7 楊希;;利用松墨天牛早期監(jiān)測(cè)松材線蟲病的研究[J];武夷科學(xué);2009年00期

8 沈英杰;贛北松墨天牛生活習(xí)性和為害情況的調(diào)查[J];昆蟲知識(shí);1994年01期

9 李廣武,邵桂英,俞伯能;松墨天牛的初步觀察[J];昆蟲知識(shí);1986年04期

10 湘泓;;花絨寄甲與松墨天牛[J];百科知識(shí);2013年17期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 沈婧;馬濤;孫朝輝;溫秀軍;謝偉龍;;飛機(jī)噴灑噻蟲啉防治松墨天牛質(zhì)量檢測(cè)與效果評(píng)價(jià)[A];植保科技創(chuàng)新與農(nóng)業(yè)精準(zhǔn)扶貧——中國(guó)植物保護(hù)學(xué)會(huì)2016年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2016年

2 楊希;黃金水;;利用松墨天牛早期監(jiān)測(cè)松材線蟲病的研究[A];第二屆中國(guó)林業(yè)學(xué)術(shù)大會(huì)——S5 森林病害及其防治論文集[C];2009年

3 嵇保中;;松墨天�；瘜W(xué)防治述評(píng)[A];江蘇省植病、昆蟲學(xué)會(huì)通訊2——江蘇省松材線蟲病研討會(huì)論文集[C];2003年

4 徐福元;葛明宏;徐克勤;;松墨天牛的生物防治技術(shù)研究[A];江蘇省植病、昆蟲學(xué)會(huì)通訊2——江蘇省松材線蟲病研討會(huì)論文集[C];2003年

5 王曦茁;馬建偉;汪來發(fā);樸春根;李永;郭民偉;;松材線蟲對(duì)松墨天牛取食的影響[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2012年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2012年

6 李遠(yuǎn)翔;羅正均;楊德敏;張宏;代軍;陳松;鄭學(xué)良;游林;;馬尾松腮扁葉蜂的天敵調(diào)查[A];全國(guó)生物防治暨第八屆殺蟲微生物學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2000年

7 李恂;戴立霞;何慎;;郴州市松墨天牛生物學(xué)特性研究[A];第二屆中國(guó)林業(yè)學(xué)術(shù)大會(huì)——S6 森林昆蟲與自然調(diào)控論文集[C];2009年

8 羅洪;涂勝根;;雪災(zāi)后的松材線蟲病監(jiān)測(cè)與防控[A];全國(guó)生物多樣性保護(hù)及外來有害物種防治交流研討會(huì)論文集[C];2008年

9 喬飛;陳京元;桂連友;;松墨天牛引誘劑的研究與應(yīng)用[A];華中昆蟲研究（第五卷）[C];2008年

10 郝德君;馬鳳林;王焱;戴華國(guó);;松墨天牛對(duì)不同生理狀態(tài)黑松揮發(fā)物的觸角電生理反應(yīng)[A];昆蟲學(xué)研究進(jìn)展[C];2005年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 記者 劉建波;為松墨天牛高效誘劑研發(fā)提供技術(shù)支撐[N];中國(guó)綠色時(shí)報(bào);2013年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條

1 何學(xué)友;金龜子綠僵菌松墨天牛優(yōu)良菌株篩選及其林間宿存研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2007年

2 劉娟;云南松受蛀干害蟲脅迫后生理生化響應(yīng)及其機(jī)理研究[D];中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院;2010年

3 顏學(xué)武;花絨寄甲人工飼料及林間應(yīng)用技術(shù)研究[D];南京林業(yè)大學(xué);2014年

4 潘紅偉;松材線蟲（Bursaphelenchus xylophilus）在我國(guó)的潛在分布區(qū)研究[D];中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院;2009年

5 任利利;松墨天牛和天敵花絨寄甲對(duì)幾種樹木揮發(fā)物的電生理及行為反應(yīng)[D];北京林業(yè)大學(xué);2014年

6 王健敏;松墨天牛對(duì)云南松選擇特性及蛀干昆蟲在森林健康評(píng)價(jià)中的應(yīng)用[D];中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院;2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 柳小龍;松墨天牛Mfe2基因的克隆、原核表達(dá)和表達(dá)特性分析[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

2 田浩楷;溫度調(diào)控松墨天牛Ascarosides的產(chǎn)生及其相關(guān)基因的表達(dá)[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

3 蔡榕玲;松墨天牛轉(zhuǎn)錄組研究及其生物防治相關(guān)基因鑒定與分析[D];福建農(nóng)林大學(xué);2018年

4 吳夢(mèng)林;貴州黔南松墨天牛成蟲動(dòng)態(tài)、世代調(diào)查與產(chǎn)卵策略研究[D];貴州師范大學(xué);2018年

5 莊文欣;松墨天牛昆蟲病原真菌與天敵昆蟲花絨寄甲的相容性研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

6 林祥騰;泰寧縣松墨天牛種群動(dòng)態(tài)及松材線蟲病綜合防控[D];福建農(nóng)林大學(xué);2018年

7 傅慧靜;松墨天牛腸道細(xì)菌多樣性和粘質(zhì)沙雷氏菌木質(zhì)素降解特性的研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2017年

8 林倩男;松墨天牛潛在病原細(xì)菌的分離鑒定及其與關(guān)聯(lián)生境的細(xì)菌多樣性[D];福建農(nóng)林大學(xué);2017年

9 張思行;石泉縣松材線蟲病特點(diǎn)及防治技術(shù)研究[D];北京林業(yè)大學(xué);2016年

10 歐文勝;松墨天牛種群動(dòng)態(tài)和馬尾松林分健康關(guān)系的研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2014年

本文編號(hào)：2720172