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去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠BMSCs Runx2、PPAR-γ基因表達的研究

發(fā)布時間:2017-03-27 17:14

  本文關(guān)鍵詞:去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠BMSCs Runx2、PPAR-γ基因表達的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:觀察經(jīng)雌激素、葛根素、白藜蘆醇對去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠在體干預(yù)后,分離培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)Runx2、PPAR-γ基因的表達。方法:1.選用65只3月齡SPF級健康雌性Sprague-Dawky(SD)大鼠隨機分為五組,分別為:假手術(shù)組(SHAM)、雌激素替代治療組(ERT)、葛根素組(PUE)、白藜蘆醇組(RES)、去卵巢組(OVX),每組13只。除假手術(shù)組外其余四組大鼠采用雙側(cè)卵巢切除法復(fù)制大鼠絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥模型,術(shù)后1周后給予藥物干預(yù)10周。2.ELISA法檢測大鼠血清骨堿性磷酸酶(BALP)、血清骨保護素(OPG)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRAP-5b)、I型膠原羧基末端肽(CTX-I);外周定量計算機斷層掃描(pQCT)測量大鼠右側(cè)股骨骨微結(jié)構(gòu)的相關(guān)參數(shù)。3.分離培養(yǎng)去卵巢大鼠BMSCs,采用流式細胞儀檢測細胞表型進行細胞鑒定;RT-PCR法檢測BMSCs成骨調(diào)控基因Runx2、成骨標志基因骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)、成脂調(diào)控基因過氧化物酶體增殖物激活受體-γ(PPAR-γ)和成脂標志基因脂蛋白脂酶(LPL)的表達。結(jié)果:1.實驗前各組大鼠體重?zé)o明顯差異,至實驗結(jié)束時有不同程度增加。OVX組大鼠藥物干預(yù)后4周、10周體重與同齡SHAM組比較分別增加3.9%、8.4%(P0.05);PUE、RES組大鼠體重與OVX組相比差異不大(P0.05)。2.OVX組松質(zhì)骨骨礦含量及骨密度較SHAM下降(P0.05);PUE、RES、ERT組松質(zhì)骨骨礦含量及骨密度與OVX組比較有不同程度的升高(P0.01);ERT、PUE、RES、OVX四組皮質(zhì)骨骨礦含量以及骨密度差異無明顯統(tǒng)計學(xué)意義。3.OVX組大鼠血清BALP、CTX-I、TRAP-5b較SHAM組有不同程度的提高(P0.05),ERT、PUE、RES組以上指標較OVX組有不同程度的改善;OVX組血清OPG較SHAM組明顯下降,下降比例為36.8%(P0.01)。4.分離BMSCs后,倒置相差顯微鏡下發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)過程中未經(jīng)干預(yù)的去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠來源的BMSCs生長較慢,至第19天左右細胞鋪滿瓶底;隨后進行流式細胞儀鑒定發(fā)現(xiàn)BMSCs高表達CD90、低表達CD45。5.取P1代BMSCs行RT-PCR檢測,各組間Runx2、BMP-2、PPAR-γ、LPL mRNA表達水平之間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義;各組BMSCs PPAR-γ基因的表達,除了ERT低于另外四組外,其余各組之間差異均不明顯。結(jié)論:分離經(jīng)葛根素、白藜蘆醇干預(yù)的去卵巢大鼠來源的BMSCs,檢測BMSCs Runx2、BMP-2、PPAR-r、LPL mRNA后發(fā)現(xiàn)各基因表達無明顯差異;提示大鼠BMSCs在去除前期干預(yù)因素的影響后,生長雖緩慢,但向成骨以及成脂分化的能力仍保持平衡,可能為自體干細胞治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松提供理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】:去卵巢大鼠 骨髓間充質(zhì)干細胞 Runx2 過氧化物酶體增殖物激活受體-γ
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R580
【目錄】:
  • 中文摘要3-5
  • Abstract5-9
  • 前言9-14
  • 1 骨髓間充質(zhì)干細胞分化及相關(guān)分化基因9-11
  • 2 骨轉(zhuǎn)換指標與絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥11-12
  • 3 植物雌激素與絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥與骨髓間充質(zhì)干細胞12-14
  • 材料與方法14-22
  • 1 實驗材料14-16
  • 2 實驗方法16-21
  • 3 統(tǒng)計學(xué)分析21-22
  • 實驗結(jié)果22-31
  • 1 各組大鼠體重的變化的比較22-23
  • 2 各組大鼠股骨骨密度以及骨礦含量的比較(pQCT)23-26
  • 3 各組大鼠骨轉(zhuǎn)換指標的比較26-28
  • 4 各組大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞鑒定28-29
  • 5 各組大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞Runx2、BMP-2、PPAR-γ及LPL基因表達比較29-31
  • 討論31-35
  • 1 不同藥物對去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠影響31-32
  • 2 骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)以及鑒定32-33
  • 3 去卵巢大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞相關(guān)基因表達的比較33-35
  • 結(jié)論35-36
  • 參考文獻36-39
  • 在校期間研究成果39-40
  • 致謝40-41
  • 附錄41-43
  • 略縮詞表43

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  本文關(guān)鍵詞:去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠BMSCs Runx2、PPAR-γ基因表達的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:270746

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