【摘要】：果實中葫蘆素B的累積導致甜瓜產(chǎn)生苦味,嚴重影響甜瓜果實品質(zhì)。甜瓜種質(zhì)資源豐富,不同甜瓜果實苦味差異較大。關(guān)于苦味物質(zhì)在甜瓜不同發(fā)育時期變化規(guī)律研究很少,影響苦味變化的生物學過程仍不甚清楚。本研究通過鑒定不同甜瓜材料的苦味,發(fā)現(xiàn)Nb46和Nb320果實的苦味差異明顯,通過生化和轉(zhuǎn)錄水平的分析,初步闡明影響甜瓜果肉苦味變化的因素。主要研究結(jié)果如下:1.口感鑒定19個甜瓜品系果實的苦味,發(fā)現(xiàn)10個品系的不同發(fā)育時期果實的苦味變化顯著,隨著果實的發(fā)育成熟,苦味逐漸降低或消失。Nb46中,苦味隨著果實的成熟逐漸降低,第I時期表現(xiàn)為極苦,第II、III時期分別表現(xiàn)為較苦和完全不苦。Nb320在果實的整個發(fā)育時期均表現(xiàn)為不苦。利用HPLC測定Nb46和Nb320不同時期果實中葫蘆素B的含量,表明Nb46中葫蘆素B的含量隨果實的成熟逐漸降低,而在Nb320三個不同發(fā)育時期的果實中均未檢測到葫蘆素B,該結(jié)果與口感鑒定結(jié)果一致,同時說明引起甜瓜產(chǎn)生苦味的原因是葫蘆素B。此外,測定19個甜瓜材料成熟時期的含糖量并將與第I時期苦味進行相關(guān)性分析,結(jié)果表明果實糖度與苦味成極顯著正相關(guān)(0.890**),表明果實糖度與苦味之間可能存在一定的聯(lián)系,為果實發(fā)育過程中苦味消失的轉(zhuǎn)化機制提供思路。2.克隆甜瓜苦味基因CmBi并測序。對CmBi進行系統(tǒng)發(fā)育及保守結(jié)構(gòu)域分析,發(fā)現(xiàn)CmBi與黃瓜、西瓜及西葫蘆中OSC歸為一類,稱為葫蘆素二烯醇合酶;包含兩個保守結(jié)構(gòu)域DCTAE和Q-X_(2-5)-G-X-W。對CmBi三級結(jié)構(gòu)預(yù)測為包含一個疏水跨膜區(qū)(呈螺旋狀)和兩個高度保守的(α/α)桶狀結(jié)構(gòu)域,通過loop環(huán)和β-折疊進行連接。3.通過qRT-PCR檢測參與苦味合成的相關(guān)基因(CmBi、CmBt、Cm160、Cm170、Cm180、Cm710、Cm890、Cm490和CmACT)在Nb46和Nb320三個不同發(fā)育時期的轉(zhuǎn)錄水平。發(fā)現(xiàn)Nb46中基因表達水平隨著果實的不斷發(fā)育成熟逐漸降低,而在Nb320中其表達水平較低且比較穩(wěn)定,表明這幾個基因與不同發(fā)育時期果實中葫蘆素B的含量變化有關(guān)系。4.對CmBt基因在果肉苦味差異顯著材料Nb46和Nb320中進行擴增并比對分析,找到一個SNP位點。設(shè)計相關(guān)的AS-PCR引物進行驗證,發(fā)現(xiàn)該引物僅可有效區(qū)分8個甜瓜品系,該引物的適用性不高。完成對39個與果實苦味相關(guān)SSR分子標記在34個甜瓜品系中的篩選工作,發(fā)現(xiàn)CMCTN7標記可有效區(qū)分果肉(I時期)苦與不苦表現(xiàn)型,該SSR標記可應(yīng)用于甜瓜育種工作中。
【圖文】：

天津大學碩士學位論文素 B 成分，而在不苦的果實中無葫蘆素 B 成分的存在。其他葫蘆科植物均有苦與不苦植株，西瓜 (Citrullus lanatus var. lanatus) 和黃瓜(Cucumis sativus L.) 植株中苦味的發(fā)生也與葫蘆素密切相關(guān)，苦味西瓜和苦味黃瓜中分別包含葫蘆素 E和 C[8, 10, 11]。此外，，瓠瓜 (Lagenaria siceraria Standl.)[12]、絲瓜（Luffa cylindrical(L.) Roem.）[13]，冬瓜(Benincasa hispida Cogn.)[14]也檢測到葫蘆素類苦味物質(zhì)。

圖 1-2 葫蘆烷型三萜化合物的生物合成途徑Fig. 1-2 The biosynthetic route to cucurbitane-type triterpenes 中，2，3-氧化角鯊烯的船式構(gòu)象被OSC催化形成葫蘆烷dienol），其被認為是葫蘆素B化合物的基本骨架。迄今，Zh甜瓜體內(nèi)的代謝合成過程進行了概述，并克隆驗證了甜瓜OS制葫蘆素B骨架生物合成的關(guān)鍵基因。近年來，在其它葫蘆
【學位授予單位】：天津大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S652

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張巖巖;王冬;;響應(yīng)面優(yōu)化瓜蔞中葫蘆素提取工藝及其抑菌作用[J];食品工業(yè);2019年06期

2 樸賢美;陳慶文;張永春;班濤;張妍;;葫蘆素D對血管新生的抑制作用[J];哈爾濱醫(yī)科大學學報;2019年01期

3 崔興義;;治療肝癌新藥——葫蘆素技術(shù)鑒定會在長沙召開[J];中草藥;1985年04期

4 徐聲林;石琳;吳嬋群;李尹民;;葫蘆素抗肝炎作用機理初步探討[J];中草藥;1987年04期

5 劉穎菊;劉文清;;葫蘆素的藥理與臨床應(yīng)用[J];中草藥;1992年11期

6 譚忠謀;;5種葫蘆科植物中葫蘆素類成分的含量測定及灰色關(guān)聯(lián)度分析[J];中國藥師;2017年07期

7 崔譯文;全晶晶;宋艷志;鄧意輝;徐暉;;葫蘆素D抗腫瘤作用研究進展[J];中國現(xiàn)代中藥;2017年09期

8 李洪陽;李玫;沈志綱;;葫蘆素E抗腫瘤作用的研究進展[J];中國執(zhí)業(yè)藥師;2015年11期

9 王莉梅;姚銘;;葫蘆素類化合物含量測定方法的研究進展[J];中國生化藥物雜志;2015年01期

10 陳華昌;許樹軍;唐春玲;李彥冰;吳錚;孫紅偉;關(guān)曉峰;陶永紅;;戒酒靈中葫蘆素B的含量測定[J];中醫(yī)藥學報;2015年05期

相關(guān)會議論文 前8條

1 徐優(yōu)曉;楊雷;蘇孝共;;葫蘆素B對肝炎細胞2.2.15生長和病毒表達的影響[A];浙江省2005年中藥學術(shù)年會論文集[C];2005年

2 萬露;程玲;肖云芝;徐平華;閔紅燕;李曉榮;韓晉;袁海龍;;葫蘆素B磷脂復合物理化性質(zhì)及體外抗腫瘤活性研究[A];2014年中國藥學大會暨第十四屆中國藥師周論文集[C];2014年

3 孫玉琦;張潔;胡海洋;陳大為;林瀟;;葫蘆素B-姜黃素復合脂質(zhì)體制備及質(zhì)量評價[A];2015年全國醫(yī)院藥學（藥學監(jiān)護）學術(shù)會議論文集[C];2015年

4 藍天;徐謙;劉衛(wèi)國;金洪傳;毛偉敏;王曉稼;;葫蘆素E對人乳腺癌細胞的抑制作用及其機制研究[A];2012·中國醫(yī)師協(xié)會中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)師大會第三次會議論文集[C];2012年

5 鮑嬌琳;郭佳杰;陳修平;王一濤;;葫蘆素B對PC12細胞增殖的影響:MTT假陽性陷阱[A];中國藥理學會第十一次全國學術(shù)會議�？痆C];2011年

6 楊凱;王昌美;溫玉明;;葫蘆素EB聚乳酸納米微粒在口腔癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶靶向化療中的應(yīng)用[A];第一屆全國口腔頜面部腫瘤學術(shù)會議論文匯編[C];2001年

7 楊凱;王昌美;溫玉明;李龍江;王曉毅;陳紹維;;葫蘆素BE聚乳酸納米微粒對口腔癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶的靶向化療[A];第一屆全國口腔頜面部腫瘤學術(shù)會議論文匯編[C];2001年

8 尚軼;馬永碩;周淵;張慧敏;黃三文;;黃瓜苦味形成的機理[A];中國園藝學會2014年學術(shù)年會論文摘要集[C];2014年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 石家莊市無極縣農(nóng)牧局 秦艷;黃瓜味苦——葫蘆素c作怪(上)[N];河北農(nóng)民報;2018年

2 石家莊市無極縣農(nóng)牧局 秦艷;黃瓜味苦——葫蘆素C作怪(下)[N];河北農(nóng)民報;2018年

3 本報記者 吳佩;發(fā)現(xiàn)蔬果的“苦味”秘密[N];農(nóng)民日報;2016年

4 李文鋒;中煤31處黨委全力促進項目建設(shè)[N];邯鄲日報;2009年

5 中農(nóng)網(wǎng);葫蘆素可防治玉米根蠕甲蟲[N];山西科技報;2003年

6 本報記者 于孟林 通訊員 李亞軍;葫蘆素選煤廠末煤倉完成吹膜施工[N];中國能源報;2014年

7 張濱;早春黃瓜苦味是啥原因[N];農(nóng)民日報;2005年

8 董克偉　本社記者 陳立庚;誰污染了烏審旗村民的魚塘？[N];民主與法制時報;2013年

9 董克偉　本社記者 陳立庚;地方“停工令”停不了央企的排污行為？[N];民主與法制時報;2013年

10 崔軍;早春黃瓜苦味是啥原因[N];山西科技報;2005年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 周敬凱;葫蘆素B對胰腺癌細胞殺傷作用及相關(guān)機制研究[D];中國醫(yī)科大學;2018年

2 郭建博;葫蘆素瘤內(nèi)注射和經(jīng)皮給藥的研究[D];沈陽藥科大學;2013年

3 張延禎;葫蘆素D抑制胃癌細胞存活的作用及其機制研究[D];鄭州大學;2018年

4 周淵;葫蘆科蔬菜苦味物質(zhì)的代謝研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2016年

5 昌友權(quán);葫蘆素B的保肝作用及其機制的研究[D];吉林大學;2006年

6 劉亭彥;葫蘆素B治療喉鱗狀細胞癌的實驗研究[D];中國醫(yī)科大學;2008年

7 李艷春;葫蘆素E抑制人白血病和肝癌細胞增殖作用及機制研究[D];沈陽藥科大學;2010年

8 王文宇;N-十六烷基乳糖酰胺介導葫蘆素B肝靶向SLN的研究[D];沈陽藥科大學;2009年

9 查慶兵;葫蘆素E誘導HeLa和MCF7細胞自噬及其分子機制研究[D];暨南大學;2015年

10 鄭倩;葫蘆素B對神經(jīng)母細胞瘤SH-SY5Y細胞的抑制作用機制研究[D];華中科技大學;2014年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 付金玉;甜瓜苦味相關(guān)基因的克隆、功能分析及相關(guān)分子標記篩選[D];天津大學;2018年

2 曾超朋;葫蘆素B抑制吉非替尼耐藥非小細胞肺癌的作用[D];南方醫(yī)科大學;2018年

3 楊可;葫蘆素礦煤巷頂板穩(wěn)定性分析及控制[D];中國礦業(yè)大學;2018年

4 鄧超;低濃度葫蘆素-I打破氧化還原平衡誘導胃癌細胞周期阻滯和細胞凋亡[D];南京大學;2016年

5 肖婭;葫蘆素B固體分散體的制備及大鼠體內(nèi)藥代動力學研究[D];承德醫(yī)學院;2018年

6 劉兵;葫蘆素B微囊的制備及藥效學動物實驗評價[D];華中科技大學;2018年

7 劉鈺瑩;藥西瓜蔓中葫蘆素B提取及其固體脂質(zhì)納米粒制備與功能特性研究[D];沈陽農(nóng)業(yè)大學;2017年

8 黃擎擎;葫蘆素抑制乳腺癌增殖并誘導凋亡、自噬[D];蘇州大學;2016年

9 何翠穎;葫蘆素D與葫蘆素I對T細胞淋巴瘤細胞作用的比較研究[D];河北醫(yī)科大學;2015年

10 盛秋雙;葫蘆素B凝膠劑的研究[D];沈陽藥科大學;2009年

本文編號：2700071