【摘要】：IGF家族基因主要有調(diào)控細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和抑制細(xì)胞凋亡的功能,對(duì)魚類的生長(zhǎng)調(diào)控發(fā)揮著十分重要的作用。本實(shí)驗(yàn)獲得了黃姑魚IGF-1、IGF-1R和IGF-BP2基因的全長(zhǎng)序列和IGF-2R的核心片段,同時(shí)采用Real time PCR技術(shù)分析了黃姑魚IGF-1、IGF-1R、IGF-2R和IGF-BP2基因在黃姑魚肌肉、心臟、大腦、脾臟、胃、腸、肝臟、鰓和腎臟這九種組織內(nèi)的表達(dá)情況以及飼料中添加不同賴氨酸水平對(duì)黃姑魚肝臟和肌肉中IGF-1、IGF-1R、IGF-2R和IGF-BP2基因的表達(dá)影響。主要研究結(jié)果如下:1.IGF家族相關(guān)基因克隆表達(dá)。研究克隆了黃姑魚IGF-1基因的全長(zhǎng)序列(GenBank登錄號(hào)為MG004542),基因全長(zhǎng)為939bp,包含561bp的開放閱讀框,共編碼186個(gè)氨基酸,相對(duì)分子量為20.561 Daltons,等電點(diǎn)為9.63。Real time PCR分析顯示黃姑魚IGF-1在黃姑魚九種組織內(nèi)均有表達(dá),其中在肝臟中表達(dá)量最高;克隆了黃姑魚IGF-1R基因的全長(zhǎng)序列,IGF-1R cDNA全長(zhǎng)序列為5403bp,包含4260bp的開放閱讀框,共編碼1419個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)相對(duì)分子量為159820.67Daltons,等電點(diǎn)為5.72。Real time PCR分析顯示黃姑魚IGF-1R在黃姑魚九種組織內(nèi)均有表達(dá),在肌肉中表達(dá)量最高,另外心臟、大腦和鰓中也有較高的表達(dá)量;克隆了黃姑魚IGF-2R的cDNA序列,片段長(zhǎng)度為257bp。Real time PCR分析顯示黃姑魚IGF-2R在黃姑魚九種組織內(nèi)均有表達(dá),肌肉中的表達(dá)量最高,鰓其次;克隆了黃姑魚IGF-BP2基因的全長(zhǎng)序列,cDNA全長(zhǎng)序列為1417bp,其中包含了882bp的開放閱讀框。共編碼293個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)相對(duì)分子量為32874.84Daltons,等電點(diǎn)為7.75。Real time PCR分析顯示黃姑魚IGF-BP2在黃姑魚大腦和肝臟中的表達(dá)量最高,在黃姑魚肌肉組織中不表達(dá)。2.飼料中不同賴氨酸水平對(duì)IGF家族相關(guān)基因表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)根據(jù)飼料中賴氨酸添加比例0%(L0組)、0.5%(L0.5組)、1.0%(L1.0組)、1.5%(L1.5組)、2.0%(L2.0組)、2.5%(L2.5組)共配制6組飼料。結(jié)果顯示飼料中不同賴氨酸水平顯著影響了黃姑魚肌肉和肝臟組織中IGF-1表達(dá)。黃姑魚肝臟中L1.5組IGF-1基因表達(dá)量最高(P0.05)。黃姑魚肌肉中L0.5組IGF-1基因表達(dá)最高;飼料中不同賴氨酸水平顯著影響了黃姑魚肌肉和肝臟組織中IGF-1R表達(dá)。黃姑魚肝臟中L2.0組IGF-1R表達(dá)量最高且顯著高于其余各組(P0.05)。黃姑魚肌肉中L1.0組和L2.5組IGF-1R表達(dá)量顯著高于其余各組(P0.05);飼料中不同賴氨酸水平顯著影響了黃姑魚肌肉和肝臟組織中IGF-2R表達(dá)。黃姑魚肝臟中L0.5組IGF-2R表達(dá)量最高。在肌肉組織中,L1.0組和L2.5組IGF-2R表達(dá)量顯著高于其余各組(P0.05);飼料中不同賴氨酸水平顯著影響了黃姑魚肝臟中IGF-BP2表達(dá)。黃姑魚肝臟中L0.5組IGF-BP2表達(dá)量最高。黃姑魚肌肉中IGF-BP2不表達(dá)。
【學(xué)位授予單位】：浙江海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S917.4

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