【摘要】：目的探討低氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1α基因轉(zhuǎn)染人胃腺癌SGC7901對裸鼠移植瘤血管生成及Eph A2表達(dá)的影響及其可能機(jī)制。方法采用HIF-1α基因重組質(zhì)粒p GCsish HIF-1α,轉(zhuǎn)染胃腺癌SGC7901細(xì)胞并接種裸鼠(SGC7901/shRNA,實(shí)驗(yàn)組),建立裸鼠皮下人胃腺癌移植瘤模型,動態(tài)觀測裸鼠腫瘤體積和質(zhì)量;設(shè)SGC7901(未轉(zhuǎn)染組)、轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒的SGC7901(SGC7901/Neo,空載體組)為對照。觀察移植瘤生長情況,8周后,獲取移植瘤模型瘤組織,稱取濕重,免疫組化SP法檢測移植瘤組織的微血管密度,Western blot檢測上皮細(xì)胞激酶A2(Eph A2)表達(dá)。結(jié)果與未轉(zhuǎn)染組比較,空載體組瘤體積、質(zhì)量改變不明顯,HIF-1α轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)組的瘤體積、質(zhì)量明顯降低;HIF-1α轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)組誘導(dǎo)血管增生、形成血管生成擬態(tài)和Eph A2蛋白表達(dá)較未轉(zhuǎn)染組組、空載體組明顯降低(P0.05,P0.01)。結(jié)論 HIF-1α基因轉(zhuǎn)染可明顯抑制裸鼠人胃腺癌移植瘤的生長,該作用可能與其抑制腫瘤血管新生、形成血管擬態(tài)及Eph A2蛋白表達(dá)有關(guān)。
【圖文】：

體組間瘤體大小差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示pGCsi-shHIF-1α抑制了SGC7901細(xì)胞腫瘤的生長。整個(gè)實(shí)驗(yàn)的8周內(nèi)裸鼠均無死亡病例。見圖1、2和表1。圖1shＲNA干擾HIF-1α在7周時(shí)對裸鼠模型裸鼠移植胃腺癌生長的作用A:未轉(zhuǎn)染組;B:空載體組;C:實(shí)驗(yàn)組表1shＲNA干擾HIF-1α基因轉(zhuǎn)染對裸鼠胃腺癌腫瘤生長的影響(n=10，s藊±s)項(xiàng)目未轉(zhuǎn)染組空載體組實(shí)驗(yàn)組裸鼠質(zhì)量(g)27．38±1．8427．19±1．7625．61±1．68*腫瘤體積(mm3)3101．26±216．343012．35±203．822316．27±182．63＊＊與未轉(zhuǎn)染組比較:*P＜0.05，，＊＊P＜0.012．2腫瘤微血管密度的檢測采用免疫組化SP法染色檢測3組胃腺癌細(xì)胞裸鼠移植瘤中微血管密度，結(jié)果表明，接種胃腺癌細(xì)胞8周后，未轉(zhuǎn)染組和空載體組均存在程度不等的血管增生現(xiàn)象。應(yīng)用圖像分析系統(tǒng)顯示，與未轉(zhuǎn)染組和空載體組比較，轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒pGCsi-shHIF-1α干擾SGC7901細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2.635，P＜0.05)，見圖3。圖23組裸鼠移植瘤在8周內(nèi)的生長曲線與實(shí)驗(yàn)組比較:*P＜0.05，＊＊P＜0.012．3Westernblot檢測組織EphA2蛋白表達(dá)情況Westernblot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，3組胃腺癌移植瘤組織中均有EphA2蛋白表達(dá)，相較于胃腺癌SGC7901移植瘤未轉(zhuǎn)染組和轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒的空載體組，干擾胃腺癌HIF-1α基因的表達(dá)減弱，見圖4A。由圖像分析可知，實(shí)驗(yàn)組EphA2蛋白表達(dá)顯著弱于未轉(zhuǎn)染圖3轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒pGCsi-shHIF-1α對胃腺癌移植瘤微血管密度的影響CD34免疫組化染色×400A:未轉(zhuǎn)染組;B:空載體組;C:實(shí)驗(yàn)組;D:3組腫瘤微血管密度平均光密度值;與未轉(zhuǎn)染組比較:*P＜0.05·1130·安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2017Aug;52(8)

體組間瘤體大小差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示pGCsi-shHIF-1α抑制了SGC7901細(xì)胞腫瘤的生長。整個(gè)實(shí)驗(yàn)的8周內(nèi)裸鼠均無死亡病例。見圖1、2和表1。圖1shＲNA干擾HIF-1α在7周時(shí)對裸鼠模型裸鼠移植胃腺癌生長的作用A:未轉(zhuǎn)染組;B:空載體組;C:實(shí)驗(yàn)組表1shＲNA干擾HIF-1α基因轉(zhuǎn)染對裸鼠胃腺癌腫瘤生長的影響(n=10，s藊±s)項(xiàng)目未轉(zhuǎn)染組空載體組實(shí)驗(yàn)組裸鼠質(zhì)量(g)27．38±1．8427．19±1．7625．61±1．68*腫瘤體積(mm3)3101．26±216．343012．35±203．822316．27±182．63＊＊與未轉(zhuǎn)染組比較:*P＜0.05，＊＊P＜0.012．2腫瘤微血管密度的檢測采用免疫組化SP法染色檢測3組胃腺癌細(xì)胞裸鼠移植瘤中微血管密度，結(jié)果表明，接種胃腺癌細(xì)胞8周后，未轉(zhuǎn)染組和空載體組均存在程度不等的血管增生現(xiàn)象。應(yīng)用圖像分析系統(tǒng)顯示，與未轉(zhuǎn)染組和空載體組比較，轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒pGCsi-shHIF-1α干擾SGC7901細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2.635，P＜0.05)，見圖3。圖23組裸鼠移植瘤在8周內(nèi)的生長曲線與實(shí)驗(yàn)組比較:*P＜0.05，＊＊P＜0.012．3Westernblot檢測組織EphA2蛋白表達(dá)情況Westernblot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，3組胃腺癌移植瘤組織中均有EphA2蛋白表達(dá)，相較于胃腺癌SGC7901移植瘤未轉(zhuǎn)染組和轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒的空載體組，干擾胃腺癌HIF-1α基因的表達(dá)減弱，見圖4A。由圖像分析可知，實(shí)驗(yàn)組EphA2蛋白表達(dá)顯著弱于未轉(zhuǎn)染圖3轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒pGCsi-shHIF-1α對胃腺癌移植瘤微血管密度的影響CD34免疫組化染色×400A:未轉(zhuǎn)染組;B:空載體組;C:實(shí)驗(yàn)組;D:3組腫瘤微血管密度平均光密度值;與未轉(zhuǎn)染組比較:*P＜0.05·1130·安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2017Aug;52(8)

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8 李W

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