【摘要】：研究目的本課題前期研究明確清膽瀉熱法(代表方為鼻淵舒口服液)通過抑制鼻腔優(yōu)勢菌種表皮葡萄球菌生物膜形成而起效。立足于這一基礎,本研究通過RT-PCR技術檢測成膜相關基因agrA、luxS、atlE的表達,探討慢性鼻-鼻竇炎細菌生物膜形成的分子機制。研究方法納入符合標準的膽腑郁熱型慢性鼻-鼻竇炎患者為治療組;納入健康者為對照。對照組不進行任何處理,取中鼻道分泌物進行指標檢測,治療組予以華神集團出產的鼻淵舒口服液服用,連續(xù)服用2個療程(14天),在服藥前后分別取同一側中鼻道鼻腔分泌物。選擇分離優(yōu)勢菌種為表葡菌且治療前鼻腔表皮葡萄球菌生物膜(+),經治療后轉為鼻腔表皮葡萄球菌生物膜(-)的臨床樣本納入試驗組;其中治療前標本8例為試驗組1,治療后標本8例為試驗組2,健康人標本4例為對照組。設計并合成引物,運用RT-PCR技術分別檢測出細菌生物膜調控基因:表皮葡萄球菌:agrA、luxS、atlE服藥前后的表達量,BB170哈氏弧菌發(fā)光法檢測AI-2分子信號強度,最后經統(tǒng)計學分析得出結論。研究結果1.所有樣本統(tǒng)計結果:治療后luxS基因表達較治療前高(P0.05),但治療前、治療后分別與健康對照組相比,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)(P0.05);agrA基因、atlE基因表達量治療前與治療后、及治療前后分別與健康對照組比較均無差異(P0.05)。2.luxS/AI-2通路起效部分病例統(tǒng)計結果:治療后luxS基因表達較治療前高(P0.05),且治療前低于健康對照組(P0.05),而治療后與健康對照組無差異(P0.05)。agrA基因、atlE基因表達量治療前與治療后、及治療前后分別與健康對照組比較均無差異(P0.05)。3.agr通路起效部分病例統(tǒng)計結果:治療后agrA基因表達較治療前減少(P0.05),且治療前與健康對照組無差異(P0.05),而治療后低于對照組(P0.05)。luxS基因、atlE基因治療前與治療后、治療前后與健康對照組比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。4.相關性分析結果:agr通路起效部分病例,不同指標差值相關性檢驗結果顯示,兩兩指標之間均無相關性。對agrA與atlE行差值線性相關趨勢分析可觀察到負相關趨勢。結論1.在鼻淵舒口服液治療CRS主要通過抑制優(yōu)勢菌群表葡菌生物膜起效,其膜抑制能力可能通過復雜的基因調控網絡起效,這一復雜系統(tǒng)可能包括QS系統(tǒng)關鍵基因luxS及相關生物信號AI-2、agr系統(tǒng)關鍵基因agrA及相關粘附調控基因atlE。2.鼻淵舒口服液對關鍵基因luxS的調節(jié)表現(xiàn)為上調,通過上調luxS基因降低了AI-2信號,負調控達到成膜抑制效果;對關鍵基因agrA的調節(jié)表現(xiàn)為下調,正調控達到成膜抑制效果。3.對agr相關粘附基因atlE的調節(jié)表現(xiàn)較復雜,既有上調也有下調,表明鼻淵舒口服液并非通過agr-atlE通路的單一線性調節(jié)影響表葡菌BF形成,而是可能直接調節(jié)atlE的表達,或者存在其他復雜通路同時影響atlE的表達。
【圖文】：

電鏡掃描下形成過程中的葡萄球菌生物膜

引圖 2：細菌生物膜的形成與發(fā)展，引自 tliassa, Barnes and Albesa. Biochemical and biophysicalresearch communications.[20]在細菌的粘附之前，條件膜的形成往往率先出現(xiàn)，在人體而言，即是各種體液及其所含糖蛋白、金屬離子、粘多糖及其他要素構成的，，吸附于細菌定植
【學位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R276.1

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本文編號：2610388