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低溫對青海扁莖早熟禾活性氧代謝的影響和相關基因表達分析

發(fā)布時間:2020-03-09 19:12
【摘要】:為研究青海扁莖早熟禾(BJ)在低溫脅迫下活性氧積累、抗氧化酶防御與逆境相關基因表達的機制,以WY-2(草地早熟禾‘午夜2號')為對照,對這兩種材料低溫適應(10/5℃)3 d和冷凍脅迫(-10℃)24 h,測定了O_2~(-·)產生速率、H_2O_2含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、抗壞血酸過氧化物酶(APX)和谷胱甘肽還原酶(GR)活性及其抗氧化酶相關基因、冷脅迫相關轉錄因子的相對表達量。結果表明,低溫脅迫可引起B(yǎng)J和WY-2葉片內的O_2~(-·)產生速率、H2O2含量和MDA含量的增加,BJ活性氧的積累程度和MDA含量均低于WY-2;低溫脅迫可導致BJ的SOD、APX和GR活性的降低,CAT活性呈先升后降的趨勢,但只有APX活性表現(xiàn)為BJ高于WY-2,同時,BJ和WY-2葉片內的Cu/Zn SOD、CAT、APX和GR基因的表達量在低溫脅迫后被明顯的上調,且BJ抗氧化酶相關基因的相對表達量普遍高于WY-2;BJ葉片內的DREB2是下調表達的,ERF、DREB1、CSP和HSP基因在低溫脅迫后均表現(xiàn)出明顯的上調表達,且ERF、CSP和HSP的相對表達量高于WY-2。從而得出結論,扁莖早熟禾在低溫脅迫時有害物質的積累低于午夜二號,抗氧化酶相關基因表達上調幅度,以及一些與冷脅迫相關轉錄因子的表達調控均大于午夜二號。這些物質合成和基因表達的差異可能共同導致扁莖早熟禾的高耐冷性。
【圖文】:

產生速率,低溫脅迫,早熟禾,葉片組織


2結果與分析2.1低溫脅迫對O2-·產生速率和H2O2含量的影響如圖1所示,低溫脅迫可增加早熟禾O2-·產生速率和H2O2含量,除冷凍處理4h(F-4h)外,BJ(青海扁莖早熟禾)的O2-·產生速率在整個低溫處理期間均低于WY-2(草地早熟禾‘午夜2號')。低溫適應3d后(C-3d),BJ和WY-2的O2-·產生速率與處理前(0h)均有所降低,但并無顯著性差異(P>0.05)。BJ的O2-·產生速率在冷凍處理4h后達到最高值,為8.2nmol/(min·g),較處理前增加了19.3%。然而,冷凍處理2和8hWY-2的O2-·產生速率均顯著高于0h(P<0.05),且冷凍處理2h后的O2-·產生速率較0h增加了80.4%。BJ和WY-2的H2O2含量在整個處理期內總體呈先增高后降低的趨勢(圖1)。BJ的H2O2含量在低溫適應和冷凍處理初期(F-2h)有所增加,但與0h并無顯著性差異(P>0.05),在冷凍處理8h后,H2O2含量顯著增加(P<0.05),并達到最大值。WY-2的H2O2含量在整個低溫處理期間均顯著高于0h(P<0.05),在冷凍處理2h后就達到了最大值,為389.6nmol/g,較0h增加了58.2%;在冷凍處理24h后,H2O2含量顯著降低,但仍然高于0h。圖1低溫脅迫對兩種早熟禾葉片組織O2-·產生速率和H2O2含量的影響Fig.1EffectsofcoldstressonO2-·generationrateandH2O2contentoftheleaftissueoftwobluegrassspeciesC:低溫脅迫Coldacclimation;F:冷凍脅迫Frozenstress.豎線表示標準誤,不同的小寫字母表示差異顯著(P<0.05),下同。Verticalbarsindicatemean±standarderror(SE).Differentlowercaselettersrepresentsignificantdifferenceat0.05level.Thesamebelow.2.2低溫脅迫對MDA含量的影響

低溫脅迫,葉片組織,早熟禾,SOD活性


肯災釶檔停嘈鄥勻桓?于0h。圖1低溫脅迫對兩種早熟禾葉片組織O2-·產生速率和H2O2含量的影響Fig.1EffectsofcoldstressonO2-·generationrateandH2O2contentoftheleaftissueoftwobluegrassspeciesC:低溫脅迫Coldacclimation;F:冷凍脅迫Frozenstress.豎線表示標準誤,不同的小寫字母表示差異顯著(P<0.05),下同。Verticalbarsindicatemean±standarderror(SE).Differentlowercaselettersrepresentsignificantdifferenceat0.05level.Thesamebelow.2.2低溫脅迫對MDA含量的影響圖2低溫脅迫對兩種早熟禾葉片組織MDA含量的影響Fig.2EffectsofcoldstressonMDAcontentoftheleaftissueoftwobluegrassspecies如圖2所示,低溫脅迫可導致BJ和WY-2葉片內MDA(丙二醛)含量的持續(xù)增加,BJ的MDA含量在整個處理期間均顯著低于WY-2(P<0.05)。BJ和WY-2的MDA含量在冷凍脅迫24h(F-24h)后均達到了最大值,分別為78.8和161.8nmol/g,較0h分別增加了50.0%和115.3%,即冷凍處理24h后WY-2的MDA增長量是BJ的2.3倍。2.3低溫脅迫對抗氧化酶活性的影響B(tài)J和WY-2葉片內不同種類的抗氧化酶對低溫脅迫的響應存在一定的差異(圖3)。低溫脅迫可導致BJ和WY-2的SOD活性降低,,低溫適應3d可顯著降低BJ的SOD活性(P<0.05),WY-2的SOD活性較0h雖有所降低,但未達到顯著性差異(P<0.05)。BJ的SOD活性在冷凍脅迫4h后降到最小,較0h降低第26卷第12期草業(yè)學報2017年101

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