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浙貝母FPS基因的克隆及其在生物堿代謝中的調(diào)控作用研究

發(fā)布時(shí)間:2020-01-19 20:00
【摘要】:目的克隆出浙貝母法呢基焦磷酸合酶(Farnesyl pyrophosphate synthase,FPS)基因,并對其表達(dá)量與生物堿積累量之間的相關(guān)性進(jìn)行分析,以探究FPS基因在浙貝母生物堿合成代謝過程中的調(diào)控作用。方法本研究采用RACE技術(shù)克隆出浙貝母FPS基因的全長序列;以浙貝母狹葉、寬葉和新梅園3個(gè)品種6個(gè)組織及10個(gè)不同發(fā)育時(shí)期的新鱗莖為材料,采用RT-qPCR和HPLC-ELSD技術(shù)分別測定了FPS基因的表達(dá)量與生物堿(浙貝甲素和浙貝乙素)的量,并對其進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果 FPS基因cDNA序列全長1 629 bp,開放閱讀框?yàn)? 056 bp,編碼351個(gè)氨基酸;3個(gè)不同浙貝母品種中FPS基因組織特異性表達(dá)趨勢相同,花中的表達(dá)量最高,其次為新鱗莖;不同發(fā)育時(shí)期新鱗莖FPS基因表達(dá)量與生物堿量相關(guān)性分析顯示,在寬葉和新梅園品種中,FPS基因表達(dá)量與浙貝甲素、浙貝乙素量均具有明顯的正相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)分別為0.289、0.613,0.427、0.622),但在狹葉品種中,該相關(guān)性相對較低(0.054、0.236);狹葉、寬葉和新梅園3個(gè)品種不同組織中FPS基因表達(dá)量與生物堿量具有正相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)分別為0.057、0.476,0.085、0.495,0.375、0.432)。結(jié)論本研究成功克隆出浙貝母FPS基因的全長序列,FPS基因參與了浙貝母生物堿的合成代謝調(diào)控。

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