仙人掌多糖對THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞膽固醇蓄積及其相關(guān)基因表達(dá)的影響
發(fā)布時間：2019-11-13 01:24
【摘要】：采用PMA和ox LDL構(gòu)建THP 1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞模型,觀察不同濃度(5、10、15 nmol/L)仙人掌多糖(ODP Ia)對泡沫細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)、膽固醇蓄積以及介導(dǎo)膽固醇流出的ABCA1、ABCG1、SR BI基因表達(dá)的影響。結(jié)果顯示:THP 1巨噬細(xì)胞泡沫化后胞內(nèi)蓄積了大量脂質(zhì),高劑量(15 nmol/L)ODP Ia能夠顯著減少胞內(nèi)脂質(zhì)、膽固醇蓄積,并增強(qiáng)ABCA1、ABCG1、SR BI m RNA及蛋白表達(dá)(與單獨(dú)ox LDL處理組比較,P0.05),但效果均次于陽性對照依折麥布組(P0.05),低、中劑量(5、10 nmol/L)ODP Ia作用效果均不顯著。本研究結(jié)果表明,ODP Ia可通過增強(qiáng)ABCA1、ABCG1、SR BI基因表達(dá)來減少胞內(nèi)膽固醇蓄積。
【圖文】：
膠電泳電壓為80V，分離膠電泳電壓為120V)。待溴酚藍(lán)電泳至膠底部時終止電泳。轉(zhuǎn)膜，用5%脫脂牛奶封閉1h，用TBST洗3次后加入一抗，4℃孵育過夜。用TBST洗3次后加入二抗(稀釋比例1∶3000)，孵育45~60min。孵育結(jié)束，用TBST洗3次，進(jìn)行ECL顯色曝光。將曝光后的底片掃描，并用Quantityone專業(yè)灰度分析軟件進(jìn)行分析，以GAPDH為內(nèi)參，計(jì)算并比較各處理組蛋白表達(dá)量。1.2.8數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用Excel2007進(jìn)行繪圖分析；運(yùn)用SPSS17.0進(jìn)行方差分析及兩兩比較(SNK q檢驗(yàn))。2結(jié)果與分析2.1THP 1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞的建立如圖1 a所示，培養(yǎng)的THP 1懸浮細(xì)胞加入PMA刺激6h后，懸浮細(xì)胞大部分貼壁，搖晃后不懸福形狀由圓形變成雙極性、多角形等不規(guī)則形狀，并有偽足伸出，表明巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)成功。圖1 b所示，加入ox LDL培養(yǎng)巨噬細(xì)胞48h后，巨噬細(xì)胞吞噬大量ox LDL，產(chǎn)生大量脂質(zhì)，細(xì)胞脹大，經(jīng)油紅O染色后，可觀察到胞內(nèi)脂質(zhì)變成紅色，戒環(huán)樣包繞在細(xì)胞核周圍，說明泡沫化成功。a巨噬細(xì)胞；b油紅O染色。圖1巨噬細(xì)胞的電鏡觀察及泡沫細(xì)胞的光鏡觀察結(jié)果Fig.1MacrophagesandfoamcellsoilredOstainingmapsab
138湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)http://xb.hunau.edu.cn2017年4月2.2ODP Ia對THP 1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞中脂質(zhì)蓄積的影響如圖2 a所示，未泡沫化的巨噬細(xì)胞內(nèi)沒有脂質(zhì)蓄積；加入ox LDL泡沫化后產(chǎn)生大量脂質(zhì)(圖2 b)。經(jīng)15nmol/LODP Ia和依折麥布干預(yù)能減少泡沫細(xì)胞中脂質(zhì)的蓄積(圖2 e、圖2 f)，且兩者產(chǎn)生的效果相當(dāng)；5、10nmol/LODP Ia對脂質(zhì)蓄積的改善效果較小(圖2 c、圖2 d)。a空白組；b泡沫細(xì)胞組；cODP Ia低劑量組；dODP Ia中劑量組；eODP Ia高劑量組；f陽性對照組。圖2ODP Ia對THP 1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞中脂質(zhì)蓄積的影響效果Fig.2EffectofODP IaoncholesterolaccumulationinTHP 1macrophage-derivedfoamcells2.3ODP Ia對THP 1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞膽固醇蓄積的影響如圖3所示，高劑量ODP Ia和依折麥布干預(yù)均能顯著降低泡沫細(xì)胞中總膽固醇含量(與只用ox LDL組比較，P<0.05)，，但低、中劑量組的作用不明顯，表明ODP Ia干預(yù)劑量需達(dá)到15nmol/L才具有促進(jìn)細(xì)胞總膽固醇外流的效果。此外，ODP Ia干預(yù)的效果比陽性對照依折麥布的弱(P<0.05)。abbbccd0100200300400500600700123456膽固總醇(/μoml·gm1 )組別1空白組；2泡沫細(xì)胞組；3ODP Ia低劑量組；4ODP Ia中劑量組；5ODP Ia高劑量組；6陽性對照組。圖3各組別THP 1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞膽固醇蓄積量Fig.3ThecholesterolaccumulationinTHP 1macrophage-derivedfoamcellsofalldosegroups2.4ODP Ia對THP 1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞中ABCA1、ABCG1、SR BImRNA表達(dá)的影響表2顯示，加入ox LDL泡沫化后，泡沫細(xì)胞中ABCA1、ABCG1、SR BImRNA的表達(dá)顯著下降(與空白組比較，P<0.05)。但是加入高劑量ODP
本文編號：2560063
【圖文】：
膠電泳電壓為80V，分離膠電泳電壓為120V)。待溴酚藍(lán)電泳至膠底部時終止電泳。轉(zhuǎn)膜，用5%脫脂牛奶封閉1h，用TBST洗3次后加入一抗，4℃孵育過夜。用TBST洗3次后加入二抗(稀釋比例1∶3000)，孵育45~60min。孵育結(jié)束，用TBST洗3次，進(jìn)行ECL顯色曝光。將曝光后的底片掃描，并用Quantityone專業(yè)灰度分析軟件進(jìn)行分析，以GAPDH為內(nèi)參，計(jì)算并比較各處理組蛋白表達(dá)量。1.2.8數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用Excel2007進(jìn)行繪圖分析；運(yùn)用SPSS17.0進(jìn)行方差分析及兩兩比較(SNK q檢驗(yàn))。2結(jié)果與分析2.1THP 1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞的建立如圖1 a所示，培養(yǎng)的THP 1懸浮細(xì)胞加入PMA刺激6h后，懸浮細(xì)胞大部分貼壁，搖晃后不懸福形狀由圓形變成雙極性、多角形等不規(guī)則形狀，并有偽足伸出，表明巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)成功。圖1 b所示，加入ox LDL培養(yǎng)巨噬細(xì)胞48h后，巨噬細(xì)胞吞噬大量ox LDL，產(chǎn)生大量脂質(zhì)，細(xì)胞脹大，經(jīng)油紅O染色后，可觀察到胞內(nèi)脂質(zhì)變成紅色，戒環(huán)樣包繞在細(xì)胞核周圍，說明泡沫化成功。a巨噬細(xì)胞；b油紅O染色。圖1巨噬細(xì)胞的電鏡觀察及泡沫細(xì)胞的光鏡觀察結(jié)果Fig.1MacrophagesandfoamcellsoilredOstainingmapsab
138湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)http://xb.hunau.edu.cn2017年4月2.2ODP Ia對THP 1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞中脂質(zhì)蓄積的影響如圖2 a所示，未泡沫化的巨噬細(xì)胞內(nèi)沒有脂質(zhì)蓄積；加入ox LDL泡沫化后產(chǎn)生大量脂質(zhì)(圖2 b)。經(jīng)15nmol/LODP Ia和依折麥布干預(yù)能減少泡沫細(xì)胞中脂質(zhì)的蓄積(圖2 e、圖2 f)，且兩者產(chǎn)生的效果相當(dāng)；5、10nmol/LODP Ia對脂質(zhì)蓄積的改善效果較小(圖2 c、圖2 d)。a空白組；b泡沫細(xì)胞組；cODP Ia低劑量組；dODP Ia中劑量組；eODP Ia高劑量組；f陽性對照組。圖2ODP Ia對THP 1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞中脂質(zhì)蓄積的影響效果Fig.2EffectofODP IaoncholesterolaccumulationinTHP 1macrophage-derivedfoamcells2.3ODP Ia對THP 1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞膽固醇蓄積的影響如圖3所示，高劑量ODP Ia和依折麥布干預(yù)均能顯著降低泡沫細(xì)胞中總膽固醇含量(與只用ox LDL組比較，P<0.05)，，但低、中劑量組的作用不明顯，表明ODP Ia干預(yù)劑量需達(dá)到15nmol/L才具有促進(jìn)細(xì)胞總膽固醇外流的效果。此外，ODP Ia干預(yù)的效果比陽性對照依折麥布的弱(P<0.05)。abbbccd0100200300400500600700123456膽固總醇(/μoml·gm1 )組別1空白組；2泡沫細(xì)胞組；3ODP Ia低劑量組；4ODP Ia中劑量組；5ODP Ia高劑量組；6陽性對照組。圖3各組別THP 1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞膽固醇蓄積量Fig.3ThecholesterolaccumulationinTHP 1macrophage-derivedfoamcellsofalldosegroups2.4ODP Ia對THP 1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞中ABCA1、ABCG1、SR BImRNA表達(dá)的影響表2顯示，加入ox LDL泡沫化后，泡沫細(xì)胞中ABCA1、ABCG1、SR BImRNA的表達(dá)顯著下降(與空白組比較，P<0.05)。但是加入高劑量ODP
【相似文獻(xiàn)】
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1 劉曉燕;嚴(yán)士敏;龔慧;趙秀麗;陳鳳玲;;小檗堿對THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞膽固醇流出的影響[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年12期
本文編號：2560063
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