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荒漠甲蟲小胸鱉甲低溫響應(yīng)幾丁質(zhì)酶基因Mpcht19的克隆及表達(dá)模式分析

發(fā)布時(shí)間:2019-10-18 12:50
【摘要】:【目的】探索荒漠昆蟲小胸鱉甲Microdera punctipennis低溫響應(yīng)的分子機(jī)理并挖掘其耐寒基因!痉椒ā扛鶕(jù)低溫轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)篩選并克隆小胸鱉甲幾丁質(zhì)酶基因,并進(jìn)行生物信息學(xué)分析;通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR和免疫組織化學(xué)法分析該基因在成蟲不同組織中和4℃低溫脅迫下的表達(dá)模式分析。【結(jié)果】從小胸鱉甲成蟲克隆獲得一個(gè)幾丁質(zhì)酶基因Mpcht19(Gen Bank登錄號(hào):KY126382)。生物信息學(xué)分析表明,該基因編碼的蛋白Mp CHT19屬于Ⅳ型昆蟲幾丁質(zhì)酶,理論分子量約為27.18 k D,無(wú)信號(hào)肽,具親水性。系統(tǒng)進(jìn)化分析表明,Mp CHT19與赤擬谷盜Tribolium castaneumⅣ型幾丁質(zhì)酶Tc CHT19同源性最高,氨基酸序列一致性為34.05%。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示,Mpcht19在成蟲脂肪體和后腸中高表達(dá),具有組織特異性;該基因的表達(dá)還受4℃低溫誘導(dǎo)。免疫組織化學(xué)分析結(jié)果顯示,在4℃低溫下Mp CHT19蛋白在脂肪體和后腸中表達(dá)!窘Y(jié)論】Mpcht19基因的表達(dá)具有組織特異性,并受低溫誘導(dǎo)。研究結(jié)果有助于深入研究幾丁質(zhì)酶與小胸鱉甲耐寒性的關(guān)系。
【作者單位】: 新疆大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院新疆生物資源基因工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31360527)
【分類號(hào)】:Q963

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2551095

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