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白細(xì)胞介素-8基因在鼻息肉組織中的表達(dá)及對鼻黏膜上皮細(xì)胞凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2019-09-16 10:03
【摘要】:目的探討白細(xì)胞介素(IL)-8基因在鼻息肉組織中的表達(dá)及對鼻黏膜上皮細(xì)胞凋亡的影響。方法 Western印跡檢測IL-8在鼻息肉組織及下鼻甲組織中的表達(dá);從鼻息肉組織中分離培養(yǎng)人鼻黏膜上皮細(xì)胞(HNEC),將IL-8小干擾RNA(IL-8-siRNA)和陰性對照(siRNA-NC)轉(zhuǎn)染細(xì)胞,以空脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的細(xì)胞作為對照組,Western印跡檢測轉(zhuǎn)染效果;各組轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)48 h后,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的凋亡情況,Western印跡檢測酶切caspase3蛋白表達(dá)。結(jié)果 IL-8在鼻息肉組織中的表達(dá)顯著高于下鼻甲組織(P0.01);siRNA-NC組與對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),IL-8-siRNA組顯著低于對照組(P0.01);siRNA-NC組細(xì)胞凋亡率及酶切caspase3蛋白表達(dá)與對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),IL-8-siRNA組均顯著高于對照組(P0.01)。結(jié)論 IL-8在鼻息肉組織中高表達(dá),沉默IL-8的表達(dá)能通過上調(diào)酶切caspase3蛋白表達(dá)促進(jìn)HNEC凋亡。
【圖文】:

鼻息肉


.162±0.023,,P<0.01)。見圖1。2.2IL-8在轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中的表達(dá)siRNA-NC組細(xì)胞中IL-8蛋白表達(dá)(0.606±0.035)與對照組(0.611±0.039)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),IL-8-siRNA組(0.224±0.023)顯著低于對照組(P<0.01)。見圖2。2.3IL-8對HNEC凋亡的影響siRNA-NC組細(xì)胞凋亡率〔(2.28±0.92)%〕及酶切caspase3蛋白表達(dá)(0.092±0.009)與對照組〔(2.23±0.77)%,0.108±0.010〕比較差異不顯著(P>0.05),IL-8-siRNA組細(xì)胞凋亡率〔(15.12±1.43)%〕及酶切caspase3蛋白表達(dá)(0.311±0.029)顯著高于對照組(P<0.01),見圖3。圖1IL-8在鼻息肉組織及下鼻甲組織中的表達(dá)圖2轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞中IL-8蛋白表達(dá)水平圖3IL-8對HNEC凋亡的影響3討論鼻息肉的發(fā)病機(jī)制目前尚不清楚,手術(shù)治療效果雖然有所提高,但病人術(shù)后仍有復(fù)發(fā)。目前研究認(rèn)為鼻息肉的形成是由多種因素共同參與的慢性炎癥〔2〕。且有研究顯示,多種細(xì)胞因子影響了鼻息肉的發(fā)生及病理過程〔3〕。IL-8是一種炎性細(xì)胞因子,可誘導(dǎo)嗜酸性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞遷移到炎癥或感染部位,在損傷、感染患者的血清中可發(fā)現(xiàn)IL-8的高表達(dá)〔4〕。研究顯示,在鼻息肉勻漿組織中檢測到IL-8的表達(dá)水平顯著高于對照組,在慢性鼻竇炎患者的竇黏膜也可檢測IL-8的高表達(dá)〔5〕。本研究中也檢測IL-8在鼻息肉組織中的高表達(dá),其結(jié)果與前人的研究一致。RNA干擾是由雙鏈DNA引起的一種序列特異性的基因沉默,作為下調(diào)基因的工具已被廣泛用于基因功能的研究及疾病的治療〔6〕。本研究結(jié)果顯示,沉默IL-8的表達(dá)能促進(jìn)HNEC的凋亡及酶切caspase3蛋白的表達(dá)。細(xì)胞凋亡是細(xì)胞在受到各種刺激因素后所發(fā)生的程序性死亡過程,其過程受到多種基因的調(diào)控。其中以caspase家族及Bcl-2家族為主。ca

序列,轉(zhuǎn)染,鼻息肉,對照組


上裂解反應(yīng)30min后,4℃,12000r/min離心15min,吸取蛋白上清液,BCA試劑盒檢測提取的蛋白濃度。按照1.2.1檢測酶切caspase3蛋白表達(dá)。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS21.0軟件進(jìn)行單因素方差分析、t檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1IL-8在鼻息肉組織中的表達(dá)IL-8在鼻息肉組織中的表達(dá)(0.468±0.035)顯著高于下鼻甲組織(0.162±0.023,P<0.01)。見圖1。2.2IL-8在轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中的表達(dá)siRNA-NC組細(xì)胞中IL-8蛋白表達(dá)(0.606±0.035)與對照組(0.611±0.039)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),IL-8-siRNA組(0.224±0.023)顯著低于對照組(P<0.01)。見圖2。2.3IL-8對HNEC凋亡的影響siRNA-NC組細(xì)胞凋亡率〔(2.28±0.92)%〕及酶切caspase3蛋白表達(dá)(0.092±0.009)與對照組〔(2.23±0.77)%,0.108±0.010〕比較差異不顯著(P>0.05),IL-8-siRNA組細(xì)胞凋亡率〔(15.12±1.43)%〕及酶切caspase3蛋白表達(dá)(0.311±0.029)顯著高于對照組(P<0.01),見圖3。圖1IL-8在鼻息肉組織及下鼻甲組織中的表達(dá)圖2轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞中IL-8蛋白表達(dá)水平圖3IL-8對HNEC凋亡的影響3討論鼻息肉的發(fā)病機(jī)制目前尚不清楚,手術(shù)治療效果雖然有所提高,但病人術(shù)后仍有復(fù)發(fā)。目前研究認(rèn)為鼻息肉的形成是由多種因素共同參與的慢性炎癥〔2〕。且有研究顯示,多種細(xì)胞因子影響了鼻息肉的發(fā)生及病理過程〔3〕。IL-8是一種炎性細(xì)胞因子,可誘導(dǎo)嗜酸性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞遷移到炎癥或感染部位,在損傷、感染患者的血清中可發(fā)現(xiàn)IL-8的高表達(dá)〔4〕。研究顯示,在鼻息肉勻漿組織中檢測到IL-8的表達(dá)水平顯著高于對照組,在慢性鼻竇炎患者的竇黏膜也可檢測IL-8的高表達(dá)〔5〕。本研究中也檢測IL-8在鼻息肉組織中的高表達(dá),其結(jié)果與前人的研究一致。RNA干擾是由雙鏈DNA引起的一種序列
【作者單位】: 青海大學(xué)附屬醫(yī)院耳鼻喉科;
【分類號】:R765.25

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本文編號:2536128

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