【摘要】：目的:研究Stromal antigen 2(STAG2)基因在膀胱癌中的表達,并探討STAG2基因在膀胱癌細胞侵襲遷移及凋亡過程中的作用。方法:采用逆轉(zhuǎn)錄實時定量聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-q PCR)和蛋白印跡法(Western Blotting)分析STAG2在膀胱癌細胞表達特點;利用慢病毒技術(shù)過表達STAG2基因轉(zhuǎn)染膀胱癌細胞并使用嘌呤霉素篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株;細胞劃痕實驗和Transwell實驗觀察STAG2過表達對膀胱癌細胞遷移和侵襲功能的影響;流式細胞儀檢測STAG2基因過表達對膀胱癌細胞的凋亡影響,Western Blotting檢測下游分子E-cadherin、Vimentin表達水平。結(jié)果:在膀胱癌細胞系5637中STAG2表達遠低于正常膀胱上皮細胞;慢病毒過表達效率達到80%以上;STAG2過表達后膀胱癌細胞劃痕愈合速度變慢;穿過Transwell小室的細胞數(shù)明顯變少;膀胱癌細胞凋亡數(shù)明顯增加,下游分子E-cadherin表達升高、Vimentin表達下降。結(jié)論:STAG2可能是一個新的腫瘤抑制基因,在膀胱癌細胞侵襲遷移和細胞凋亡中起著重要。
【圖文】：

（正文見第3頁）圖1STAG2在5637與SV-HUC-1中的表達水平圖25637細胞轉(zhuǎn)染慢病毒明場及熒光豐度圖35637細胞轉(zhuǎn)染效率驗證圖4劃痕實驗檢測STAG2表達變化對膀胱癌體外遷移能力的影響圖5Transwell實驗檢測STAG2表達變化對膀胱癌體外侵襲能力的影響圖6STAG2表達變化對膀胱癌細胞凋亡的影響說明：A.正常對照細胞（NC）；B.STAG2過表達5637細胞圖7E-cadherin、Vimentin表達水平0h24hCNTAG2SA56375637-NC5637-STAG2NC5637-STAG2B5637SV-HUC-1STAG2Tubulin14100055000STAG2NC光熒腸明5637NCSTAG21100005500037000E-cadherinVimentinGAPDHBAnnexinV-FITCAAnnexinV-FITCCNC5637-STAG2NC5637-STAG23020100tpopAoslsate(%)rdNC5637-STAG2elativeRTSG2Asxpresion100806040200b1.51.00.50.0elativeRTSG2AsxpresionSV-HUC-15637SV-HUC-15637aABAOD)(NC5637-STAG2NC5637-STAG21.51.00.50.0

（正文見第3頁）圖1STAG2在5637與SV-HUC-1中的表達水平圖25637細胞轉(zhuǎn)染慢病毒明場及熒光豐度圖35637細胞轉(zhuǎn)染效率驗證圖4劃痕實驗檢測STAG2表達變化對膀胱癌體外遷移能力的影響圖5Transwell實驗檢測STAG2表達變化對膀胱癌體外侵襲能力的影響圖6STAG2表達變化對膀胱癌細胞凋亡的影響說明：A.正常對照細胞（NC）；B.STAG2過表達5637細胞圖7E-cadherin、Vimentin表達水平0h24hCNTAG2SA56375637-NC5637-STAG2NC5637-STAG2B5637SV-HUC-1STAG2Tubulin14100055000STAG2NC光熒腸明5637NCSTAG21100005500037000E-cadherinVimentinGAPDHBAnnexinV-FITCAAnnexinV-FITCCNC5637-STAG2NC5637-STAG23020100tpopAoslsate(%)rdNC5637-STAG2elativeRTSG2Asxpresion100806040200b1.51.00.50.0elativeRTSG2AsxpresionSV-HUC-15637SV-HUC-15637aABAOD)(NC5637-STAG2NC5637-STAG21.51.00.50.0
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學深圳第二臨床學院;深圳市第二人民醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學基金項目資助課題(81270740) 深圳市知識創(chuàng)新計劃基礎(chǔ)研究項目資助課題(JCYJ20140416180323426)
【分類號】：R737.14

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本文編號：2526014