【摘要】：目的:研究Stromal antigen 2(STAG2)基因在膀胱癌中的表達(dá),并探討STAG2基因在膀胱癌細(xì)胞侵襲遷移及凋亡過程中的作用。方法:采用逆轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-q PCR)和蛋白印跡法(Western Blotting)分析STAG2在膀胱癌細(xì)胞表達(dá)特點(diǎn);利用慢病毒技術(shù)過表達(dá)STAG2基因轉(zhuǎn)染膀胱癌細(xì)胞并使用嘌呤霉素篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)觀察STAG2過表達(dá)對(duì)膀胱癌細(xì)胞遷移和侵襲功能的影響;流式細(xì)胞儀檢測(cè)STAG2基因過表達(dá)對(duì)膀胱癌細(xì)胞的凋亡影響,Western Blotting檢測(cè)下游分子E-cadherin、Vimentin表達(dá)水平。結(jié)果:在膀胱癌細(xì)胞系5637中STAG2表達(dá)遠(yuǎn)低于正常膀胱上皮細(xì)胞;慢病毒過表達(dá)效率達(dá)到80%以上;STAG2過表達(dá)后膀胱癌細(xì)胞劃痕愈合速度變慢;穿過Transwell小室的細(xì)胞數(shù)明顯變少;膀胱癌細(xì)胞凋亡數(shù)明顯增加,下游分子E-cadherin表達(dá)升高、Vimentin表達(dá)下降。結(jié)論:STAG2可能是一個(gè)新的腫瘤抑制基因,在膀胱癌細(xì)胞侵襲遷移和細(xì)胞凋亡中起著重要。
【圖文】：

（正文見第3頁）圖1STAG2在5637與SV-HUC-1中的表達(dá)水平圖25637細(xì)胞轉(zhuǎn)染慢病毒明場(chǎng)及熒光豐度圖35637細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率驗(yàn)證圖4劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)STAG2表達(dá)變化對(duì)膀胱癌體外遷移能力的影響圖5Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)STAG2表達(dá)變化對(duì)膀胱癌體外侵襲能力的影響圖6STAG2表達(dá)變化對(duì)膀胱癌細(xì)胞凋亡的影響說明：A.正常對(duì)照細(xì)胞（NC）；B.STAG2過表達(dá)5637細(xì)胞圖7E-cadherin、Vimentin表達(dá)水平0h24hCNTAG2SA56375637-NC5637-STAG2NC5637-STAG2B5637SV-HUC-1STAG2Tubulin14100055000STAG2NC光熒腸明5637NCSTAG21100005500037000E-cadherinVimentinGAPDHBAnnexinV-FITCAAnnexinV-FITCCNC5637-STAG2NC5637-STAG23020100tpopAoslsate(%)rdNC5637-STAG2elativeRTSG2Asxpresion100806040200b1.51.00.50.0elativeRTSG2AsxpresionSV-HUC-15637SV-HUC-15637aABAOD)(NC5637-STAG2NC5637-STAG21.51.00.50.0

（正文見第3頁）圖1STAG2在5637與SV-HUC-1中的表達(dá)水平圖25637細(xì)胞轉(zhuǎn)染慢病毒明場(chǎng)及熒光豐度圖35637細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率驗(yàn)證圖4劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)STAG2表達(dá)變化對(duì)膀胱癌體外遷移能力的影響圖5Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)STAG2表達(dá)變化對(duì)膀胱癌體外侵襲能力的影響圖6STAG2表達(dá)變化對(duì)膀胱癌細(xì)胞凋亡的影響說明：A.正常對(duì)照細(xì)胞（NC）；B.STAG2過表達(dá)5637細(xì)胞圖7E-cadherin、Vimentin表達(dá)水平0h24hCNTAG2SA56375637-NC5637-STAG2NC5637-STAG2B5637SV-HUC-1STAG2Tubulin14100055000STAG2NC光熒腸明5637NCSTAG21100005500037000E-cadherinVimentinGAPDHBAnnexinV-FITCAAnnexinV-FITCCNC5637-STAG2NC5637-STAG23020100tpopAoslsate(%)rdNC5637-STAG2elativeRTSG2Asxpresion100806040200b1.51.00.50.0elativeRTSG2AsxpresionSV-HUC-15637SV-HUC-15637aABAOD)(NC5637-STAG2NC5637-STAG21.51.00.50.0
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)深圳第二臨床學(xué)院;深圳市第二人民醫(yī)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目資助課題(81270740) 深圳市知識(shí)創(chuàng)新計(jì)劃基礎(chǔ)研究項(xiàng)目資助課題(JCYJ20140416180323426)
【分類號(hào)】：R737.14

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本文編號(hào)：2526014