【摘要】：洋常春藤是兼藥用、觀賞等多功能使用的優(yōu)質(zhì)材料。作為一種傳統(tǒng)的藥用植物,洋常春藤主要的活性成分就是三萜皂苷類化合物(常春藤皂苷C和α-常春藤皂苷),研究發(fā)現(xiàn)三萜類皂苷化合物在抗腫瘤、抑菌、抗氧化等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。試驗(yàn)利用HPLC技術(shù),檢測(cè)不同溫度與土壤水分栽培下洋常春藤葉片中α-常春藤皂苷和常春藤皂苷C含量,分析溫度與土壤水分對(duì)洋常春藤皂苷類化合物產(chǎn)量的影響,以了解環(huán)境因子對(duì)洋常春藤中皂苷類化合物的影響,利用相關(guān)技術(shù),提高產(chǎn)量的同時(shí),保證藥材質(zhì)量：利用克隆和RT-qPCR技術(shù)分析檢測(cè)FPS基因的相關(guān)信息,探索洋常春藤皂苷類化合物代謝途徑中關(guān)鍵酶基因FPS及其與皂苷含量的關(guān)系,初步了解洋常春藤三萜皂苷類化合物合成的相關(guān)基因調(diào)控機(jī)理,不僅有助于揭示道地藥材形成的機(jī)制,也將為全面深入認(rèn)識(shí)植物與環(huán)境的相互關(guān)系提供新的途徑,從而最終達(dá)到人為調(diào)控環(huán)境因素以保證藥材質(zhì)量的預(yù)期目標(biāo)。本研究取得了以下主要結(jié)果：1、采用HPLC法,以一年生洋常春藤植株為材料,分別設(shè)計(jì)4個(gè)不同水分水平和4個(gè)溫度水平來(lái)檢測(cè)土壤水分和溫度對(duì)洋常春藤植株皂苷類成分(常春藤皂苷C和α-常春藤皂苷)積累的作用。結(jié)果表明,在洋常春藤植株葉片中的皂苷類成分總含量遠(yuǎn)高于莖中的,而在莖中的常春藤皂苷C含量又遠(yuǎn)高于α-常春藤皂苷的含量且二者在不同水分和溫度水平下動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)不大；洋常春藤植株中的常春藤皂苷C和α-常春藤皂昔的含量在不同水分和溫度水平下有不同甚至是相反的響應(yīng)趨勢(shì),適度的土壤水分和溫度有助常春藤皂苷C的積累,干旱和高溫有助于α-常春藤皂苷的積累。結(jié)論是不同水分和溫度水平對(duì)洋常春藤皂苷類成分積累有一定的影響,并與洋常春藤內(nèi)在的皂苷類化學(xué)成分有關(guān)。2、采用同源RT-PCR方法,以洋常春藤葉片為材料,克隆獲得了洋常春藤法呢基焦磷酸合成酶基因,cDNA序列1050 bp,開放閱讀框?yàn)?026 bp,推測(cè)編碼342個(gè)氨基酸殘基,該序列的核苷酸、氨基酸與同五加科植物有同源性；用在線數(shù)據(jù)軟件進(jìn)行分析,推測(cè)該蛋白可能存在細(xì)胞質(zhì)之中,定位在細(xì)胞膜外,蛋白質(zhì)FPS的相對(duì)分子質(zhì)量為39735.7；該蛋白含有2個(gè)天冬氨酸保守結(jié)構(gòu)域,二級(jí)結(jié)構(gòu)主要以α螺旋和無(wú)規(guī)則卷曲為主；雙子葉植物系統(tǒng)進(jìn)化樹分析結(jié)果表明,洋常春藤的FPS與刺五加、人參、三七、西洋參、遼東id木的FPS親緣關(guān)系最近,這一結(jié)果符合傳統(tǒng)的分類法規(guī)則。3、試驗(yàn)提取了洋常春藤個(gè)同器官葉,葉柄,莖和根的RNA,并采用RT-qPCR方法檢測(cè)其表達(dá)量。結(jié)果表明：在洋常春藤不同器官中FPS基因的表達(dá)量按從大到小依次為莖尖、根、葉柄、葉片和莖。該結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了FPS基因在不同器官中的表達(dá)量存在差異,也為洋常春藤FPS基因的深入研究奠定了基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S567.19

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2514545