發(fā)布時(shí)間：2019-07-11 20:16

【摘要】：目的:1、研究硫酸鎂對(duì)6-OHDA誘導(dǎo)的PD模型大鼠的行為學(xué)的影響。2、補(bǔ)充硫酸鎂后6-OHDA誘導(dǎo)的PD模型大鼠眼組織鎂離子轉(zhuǎn)運(yùn)體基因表達(dá)的變化。3、補(bǔ)充硫酸鎂后6-OHDA誘導(dǎo)的PD模型大鼠視網(wǎng)膜多巴胺能神經(jīng)細(xì)胞的變化。方法:1、將8mg 6-羥基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)注入正常清潔級(jí)大鼠右側(cè)前腦內(nèi)側(cè)束(Medial forebrain bundle,MFB)毀損黑質(zhì)紋狀體多巴胺系統(tǒng),建立偏側(cè)帕金森疾病(Parkinson’s disease,PD)模型。2、將大鼠分為四組:對(duì)照組、對(duì)照+MgSO_4組、PD組、PD+MgSO_4組。補(bǔ)鎂組從建模術(shù)后30min開始,每天同一時(shí)間腹腔注射MgSO_4?7H_2O(90mg/kg),分別持續(xù)1W和2W。通過腹腔注射阿樸嗎啡(Apomorphine,APO)誘導(dǎo)的旋轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)、Curling Test評(píng)價(jià)補(bǔ)鎂后PD模型大鼠的行為學(xué)改變;通過酪氨酸羥化酶(tyrosine hydroxylase,TH)免疫組織化學(xué)染色了解眼球視網(wǎng)膜多巴胺能(Dopamine,DA)神經(jīng)細(xì)胞的變化。3、Q-PCR檢測(cè)補(bǔ)鎂1W和2W后,各組大鼠眼組織鎂離子轉(zhuǎn)運(yùn)體SLC41A1、MagT1、CNNM2基因mRNA的表達(dá)變化。結(jié)果:1、APO誘導(dǎo)的大鼠旋轉(zhuǎn)行為:補(bǔ)鎂1W后,PD+MgSO_4組大鼠的旋轉(zhuǎn)圈數(shù)為(261±85)r/30min,與PD組的旋轉(zhuǎn)圈數(shù)(309±109)r/30min相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。補(bǔ)鎂2W后,PD+MgSO_4組大鼠旋轉(zhuǎn)圈數(shù)為(182±49)r/30 min,明顯少于PD組(248±60)r/30min(p0.01)。2、curlingtest結(jié)果:補(bǔ)鎂1w后pd組得分為16±2.6,明顯高于對(duì)照組7.3±2.9(p0.05);pd+mgso4組得分13±1.5,明顯低于pd組(p0.05)。補(bǔ)鎂2w后pd組得分16±3.3,明顯高于對(duì)照組4.3±1.5(p0.01);pd+mgso4組得分11±3.8低于pd組(p0.05)。3、大鼠全血鎂離子檢測(cè):補(bǔ)鎂1w和2w后,對(duì)照+mgso4、pd、pd+mgso4組的全血鎂離子濃度均明顯低于對(duì)照組(p0.05)。4、q-pcr結(jié)果:補(bǔ)鎂1w后,pd組大鼠毀損同側(cè)眼組織cnnm2、slc41a1、magt1基因mrna表達(dá)均明顯低于對(duì)照組(p0.01),pd組毀損對(duì)側(cè)眼組織cnnm2、magt1基因mrna表達(dá)也明顯低于對(duì)照組(p0.01),但slc41a1與對(duì)照組無顯著差異。pd+mgso4與pd組相比,毀損同側(cè)cnnm2、slc41a1、magt1基因mrna表達(dá)均明顯增加(p0.01),對(duì)側(cè)cnnm2、magt1基因mrna表達(dá)也明顯增加(p0.01),而對(duì)側(cè)slc41a1基因mrna表達(dá)無顯著差異。對(duì)照+mgso4和對(duì)照組相比,同側(cè)cnnm2基因mrna表達(dá)明顯降低(p0.05),對(duì)側(cè)表達(dá)明顯增加(p0.05);同側(cè)slc41a1基因mrna表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而對(duì)側(cè)表達(dá)明顯降低(p0.05);雙側(cè)眼組織magt1基因mrna表達(dá)均明顯降低(p0.05)。補(bǔ)鎂2w后,pd組同側(cè)和對(duì)側(cè)眼組織cnnm2、slc41a1、magt1基因mrna表達(dá)均明顯低于對(duì)照組(p0.01);pd+mgso4組雙側(cè)眼組織cnnm2、slc41a1、magt1基因mrna表達(dá)均明顯高于pd組(p0.01)。對(duì)照+mgso4組與對(duì)照組相比,同側(cè)cnnm2基因mrna表達(dá)降低(p0.05),對(duì)側(cè)cnnm2基因表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;雙側(cè)眼組織slc41a1基因mrna表達(dá)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;對(duì)側(cè)magt1基因mrna表達(dá)明顯低于對(duì)照組(p0.05),而同側(cè)magt1基因mrna表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5、免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)視網(wǎng)膜th表達(dá):pd組雙側(cè)眼球視網(wǎng)膜內(nèi)核層和內(nèi)叢狀層th陽性蛋白表達(dá)強(qiáng)度明顯低于對(duì)照組(p0.05)。補(bǔ)鎂1w和2w后,pd+mgso4組雙側(cè)眼球th陽性蛋白表達(dá)強(qiáng)度明顯高于pd組(p0.01)。結(jié)論:1、硫酸鎂能改善6-ohda誘導(dǎo)的pd模型大鼠的運(yùn)動(dòng)癥狀。2、硫酸鎂可上調(diào)PD大鼠眼組織鎂離子轉(zhuǎn)運(yùn)體CNNM2、SLC41A1和MagT1基因的mRNA表達(dá)。3、硫酸鎂對(duì)PD大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)叢狀層和內(nèi)核層的多巴胺神經(jīng)元有一定的保護(hù)作用。4、PD大鼠的全血Mg~(2+)濃度降低。
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R742.5;R-332

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本文編號(hào)：2513452