【摘要】：構(gòu)建重組表達(dá)載體是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)制備研究中非常關(guān)鍵的一步,包括構(gòu)建完整的外源基因表達(dá)盒,包含目的基因、調(diào)控序列(啟動(dòng)子、終止子)和篩選報(bào)告基因等。本文概述了轉(zhuǎn)基因大動(dòng)物制備技術(shù),歸納統(tǒng)計(jì)了近10年轉(zhuǎn)基因豬、牛、羊制備過程中常用的載體和頻數(shù),統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因豬中啟動(dòng)子頻數(shù)從多到少依次為酪蛋白、CAG、CMV啟動(dòng)子,終止子頻數(shù)依次為兔β-globin poly A、酪蛋白poly A、SV40poly A和BGH poly A;轉(zhuǎn)基因羊中啟動(dòng)子頻數(shù)從多到少依次為酪蛋白、BLG和CMV啟動(dòng)子,終止子依次為酪蛋白poly A、BLG poly A、BGH poly A、SV40poly A和兔β-globin poly A;轉(zhuǎn)基因牛中啟動(dòng)子頻數(shù)從多到少依次為酪蛋白、CMV、人乳清白蛋白啟動(dòng)子等,終止子依次為SV40poly A、BGH poly A和酪蛋白poly A。根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果提出針對啟動(dòng)子和終止子的多重檢測和篩查策略;分析了未來轉(zhuǎn)基因動(dòng)物檢測可能存在的問題,以期對轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的監(jiān)管和篩查檢測方法的建立提供參考。
[Abstract]:The construction of recombinant expression vector is a key step in the production and preparation of transgenic animals, including the construction of a complete foreign gene expression cassette, including the target gene, regulatory sequence (promoter, Terminator) and screening reporter gene. In this paper, the preparation techniques of transgenic large animals were summarized, and the vectors and frequencies commonly used in the preparation of transgenic pigs, cattle and sheep in recent 10 years were summarized. The statistical results showed that the promoter frequency of transgenic pigs from more to less was casein, CAG,. The frequency of CMV promoter and Terminator was rabbit 尾-globin poly A, casein poly A, SV40 Poly A and BGH poly A; in turn. The promoter frequency of transgenic sheep was casein, BLG and CMV promoter, and the Terminator was casein poly A, BLG poly A, BGH poly A, SV40 Poly A and rabbit 尾-globin poly A;. The promoter frequency of transgenic cattle was casein, CMV, human milk albumin promoter and so on, and the Terminator was SV40poly A, BGH poly A and casein poly A. According to the statistical results, the multiple detection and screening strategies for promoter and Terminator were put forward, and the possible problems in the detection of transgenic animals in the future were analyzed in order to provide reference for the supervision of transgenic animals and the establishment of screening and detection methods.
【作者單位】： 中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院動(dòng)物檢疫研究所;
【基金】：國家科技重大專項(xiàng)(2014ZX0801203B)
【分類號(hào)】：S814.8

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本文編號(hào)：2494213