【摘要】：乙型肝炎是一個嚴(yán)重威脅人類健康的全球性公共衛(wèi)生問題。目前,乙肝的防治工作主要分為預(yù)防和治療兩個部分,乙肝預(yù)防性疫苗已被證實是高免疫原性的,具有保護性的,能夠有效的預(yù)防乙肝病毒感染。乙肝治療的最終目的是防止肝纖維化、肝功能衰竭和肝癌的進展,圍繞此目的,產(chǎn)生了一些抗乙肝病毒的藥物,但這些藥物都無法解決所有乙肝患者的肝臟損傷問題,并且耐藥性也是目前乙肝防治工作中面臨的困難之一。所以亟待發(fā)展一種能夠徹底治愈乙肝的方法,而治療性疫苗是目前最具有發(fā)展?jié)摿Φ闹委熓侄沃弧樘岣咭腋沃委熜砸呙绲拿庖咝Я?研究人員進行了大量疫苗構(gòu)建方法和不同免疫策略的嘗試。使用具有免疫增強作用的細(xì)胞因子作為疫苗佐劑便是其中一種策略[1]。已有一些研究結(jié)果證實IL15能夠增強抗原特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)、特異性CTL反應(yīng)以及增加記憶性T淋巴細(xì)胞的存活[2]。本研究選取表達乙肝病毒HBsAg基因的重組質(zhì)粒pVR-S、重組腺病毒rAdv-S和重組痘病毒rMVA-S,組合成不同免疫策略,輔以pVR-IL15基因佐劑免疫,研究其對不同免疫策略誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答水平的影響。實驗結(jié)果顯示,在體液免疫應(yīng)答中,pVR-IL15基因佐劑能夠增強本研究中除了單獨免疫重組病毒策略以外的所有免疫策略誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答。在單獨免疫重組病毒、一次免疫pVR-S和一次免疫重組病毒、兩次免疫pVR-S和一次免疫重組病毒的策略中,均顯現(xiàn)出rAdv-S誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答水平高于rMVA-S,此三種免疫策略誘導(dǎo)的體液免疫效果由強到弱的順序為兩次免疫pVR-S和一次免疫重組病毒策略、一次免疫pVR-S和一次免疫重組病毒策略、單獨免疫重組病毒策略。免疫兩次重組病毒策略中顯示免疫兩次rMVA-S誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答水平低于交叉免疫rAdv-S和rMVA-S誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答水平。細(xì)胞免疫應(yīng)答檢測結(jié)果顯示,pVR-IL15基因佐劑均能增強實驗中所有免疫策略誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答水平。免疫兩次重組病毒策略的結(jié)果顯示,免疫同源載體病毒和異源載體病毒所誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫水平無差異;一次免疫pVR-S和一次免疫重組病毒策略和免疫兩次重組病毒策略所誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答水平無差異;兩次免疫pVR-S和兩次免疫重組病毒策略所誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答水平在各組免疫策略中效果最好。綜上,pVR-IL15基因佐劑能夠增強各小鼠免疫方案中重組病毒誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答,在細(xì)胞免疫應(yīng)答,pVR-IL15基因佐劑也起到了免疫增強的作用,在免疫兩次重組病毒方案中,pVR-IL15基因佐劑最高可將免疫應(yīng)答水平提高3.6倍。在體液免疫中rAdv-S誘導(dǎo)的免疫效果強于rMVA-S;免疫兩次rMVA-S誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答水平低于交叉免疫rAdv-S和rMVA-S。在細(xì)胞免疫中,免疫同源載體病毒和異源載體病毒所誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫水平無差異,一次免疫pVR-S和一次免疫重組病毒免疫策略和免疫兩次重組病毒策略所誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫效果相當(dāng)。無論是體液免疫還是細(xì)胞免疫均顯示兩次重組質(zhì)粒與兩次重組病毒聯(lián)合免疫所誘導(dǎo)的免疫效果最好。
[Abstract]:Hepatitis B is a global public health problem that is a serious threat to human health. At present, the prevention and treatment of hepatitis B is divided into two parts: prevention and treatment, and the preventive vaccine of hepatitis B has been proved to be highly immunogenic and protective, and can effectively prevent the hepatitis B virus infection. The ultimate goal of the treatment of hepatitis B is to prevent liver fibrosis, liver failure, and progression of liver cancer, around which a number of anti-HBV-resistant drugs are produced, but none of these drugs address the liver injury problems of all hepatitis B patients, And drug resistance is also one of the difficulties in the prevention and treatment of hepatitis B. Therefore, it is urgent to develop a method capable of completely curing hepatitis B, and the therapeutic vaccine is one of the most promising therapeutic methods. In order to improve the immune efficacy of the hepatitis B therapeutic vaccine, the researchers conducted a large number of vaccine construction methods and different immunization strategies. The use of cytokines with immunopotentiation as a vaccine adjuvant is one of the strategies[1]. Some studies have shown that IL15 can enhance antigen-specific cellular immune response, specific CTL responses, and increase the survival of memory T-lymphocytes[2]. The recombinant plasmid pVR-S, the recombinant adenovirus rAdv-S and the recombinant poxvirus rMVA-S, which express the HBsAg gene of the hepatitis B virus, are selected to be combined into different immune strategies, and the recombinant adenovirus rAdv-S and the recombinant poxvirus rMVA-S are combined into different immune strategies, and the pVR-IL15 gene adjuvant is used for immunizing to study the effect of the recombinant adenovirus rMVA-S on the immune response level induced by different immune strategies. The results of the experiments show that in the humoral immune response, the pVR-IL15 gene adjuvant can enhance the humoral immune response induced by all the immune strategies other than the individual immune-recombinant viral strategy in this study. The humoral immune response level induced by rAdv-S is higher than that of rMVA-S in the strategy of single-immune recombinant virus, one-time immune pVR-S and one-time immune recombinant virus, two immunopVR-S and one-time immune recombinant virus. The humoral immune effects induced by the three kinds of immune strategies are two immune pVR-S and one-time immune-recombination virus strategy, one-time immune pVR-S and one-time immune-recombination virus strategy, and the strategy of the recombinant virus is separately immunized. The level of humoral immune response induced by rMVA-S was lower than that of cross-immunized rAdv-S and rMVA-S. The results of cellular immune response indicate that the pVR-IL15 gene adjuvant can enhance the level of immune response induced by all the immune strategies in the experiment. The results of the two-time recombinant virus strategy showed no difference in the cellular immune response induced by the immune-homologous vector virus and the heterologous vector virus, and there was no difference in the level of the cellular immune response induced by the one-time immune pVR-S and one-time immune-recombination virus strategy and the two-time recombinant virus strategy. The level of cellular immune response induced by two immune pVR-S and two immune-recombinant virus strategies is the best in each group of immune strategies. on the whole, the pVR-IL15 gene adjuvant can enhance the humoral immune response induced by the recombinant virus in each mouse immune scheme, The highest immune response level of pVR-IL15 gene adjuvant can be increased by 3.6 times. The immune response induced by rAdv-S in humoral immunity was stronger than that of rMVA-S, and the level of humoral immune response induced by rMVA-S was lower than that of rMVA-S and rMVA-S. In cellular immunity, the cellular immune levels induced by the immune-homologous carrier virus and the heterologous vector virus were not different, and the immune response of the primary immune pVR-S and the one-time immune-recombinant virus and the two-time recombinant viral strategy were comparable. Both humoral and cellular immunity show the best immune response induced by the combination of two recombinant plasmids with two recombinant viruses.
【學(xué)位授予單位】：中國疾病預(yù)防控制中心
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R512.62

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 閻輝;;免疫蝕斑法:一種挑選重組病毒的簡便方法[J];國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊);1992年05期

2 于曼,秦鄂德,陳水平,趙月峨,范寶昌,段鴻元,姜濤,楊佩英,胡志君;登革2型PrM基因的重組病毒對不同型別登革病毒復(fù)制的阻斷作用[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2002年05期

3 鄧小昭,何亮,刁振宇,張林元,李光富;重組病毒/家蠶細(xì)胞系統(tǒng)穩(wěn)定高效表達HBeAg基因的研究[J];藥物生物技術(shù);1998年02期

4 方肇寅,O.Kew,任斌,鄭渡平,溫樂英,楊辰夫,蘇錦,陳美光,鄭煥英,孟憲坤,張振國,劉復(fù)林,H.Yoshikura;在我國流行的脊髓灰質(zhì)炎中發(fā)現(xiàn)脊灰病毒Ⅰ型自然重組株[J];病毒學(xué)報;1993年03期

5 Nomoto A;賴眾;;構(gòu)建細(xì)小核糖核酸病毒活疫苗的策略[J];國外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊;1989年03期

6 周生;唐夢君;戴亞斌;劉梅;趙寶華;程旭;呂曉娟;;表達綠色熒光蛋白的重組雞傳染性支氣管炎病毒的構(gòu)建[J];病毒學(xué)報;2011年01期

7 李云慶;GFP基因重組病毒在神經(jīng)解剖研究中的應(yīng)用[J];解剖學(xué)報;2002年03期

相關(guān)會議論文 前9條

1 楊松濤;夏咸柱;喬軍;常爽;謝之景;鞠會艷;鄒嘯環(huán);;表達貓細(xì)小病毒VP2蛋白重組腺病毒的構(gòu)建及其免疫原性研究[A];第六屆全國會員代表大學(xué)暨第11次學(xué)術(shù)研討會論文集（下）[C];2005年

2 楊松濤;夏咸柱;喬軍;常爽;謝之景;鞠會艷;鄒嘯環(huán);;表達貓細(xì)小病毒VP2蛋白重組腺病毒的構(gòu)建及其免疫原性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第六屆全國會員代表大會暨第11次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2005年

3 鄭海紅;孫志;王金勇;朱興全;袁世山;;PRRSV-PCV重組病毒遺傳不穩(wěn)定性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物傳染病學(xué)分會第十二次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2007年

4 肖化忠;劉德立;齊義鵬;;雙拷貝V-CATH基因重組病毒的殺蟲活性及昆蟲的液化死亡機制[A];全國生物防治暨第八屆殺蟲微生物學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2000年

5 陳晶;劉曉慧;艾軍;孫招金;孫京臣;郭霄峰;;糖蛋白基因重排至第二位對狂犬病病毒生物學(xué)特性的影響[A];2010全國狂犬病防控高層論壇論文集[C];2010年

6 陳晶;劉曉慧;艾軍;孫招金;孫京臣;郭霄峰;;糖蛋白基因重排至第二位對狂犬病病毒生物學(xué)特性的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會生物制品學(xué)分會中國微生物學(xué)會獸醫(yī)微生物學(xué)專業(yè)委員會2010年學(xué)術(shù)年會（第三屆中國獸藥大會學(xué)術(shù)論壇）論文集[C];2010年

7 紀(jì)素坤;鄧明亮;費文濤;胡長敏;陳穎鈺;郭愛珍;陳煥春;;BHV-1gG~-/tk~-/GM-CSF~+重組病毒的構(gòu)建及其免疫效果評價[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第八屆全國會員代表大會暨第十五次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2013年

8 姚敏;戴夢紅;陳冬梅;黃玲俐;袁宗輝;;豬細(xì)胞色素CYP3A29異源表達及其功能活性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)藥理毒理學(xué)分會第十次研討會論文摘要集[C];2009年

9 吳樂;李輝;李云慶;;大鼠延髓背角Ⅲ層深部內(nèi)GFP基因重組病毒標(biāo)記神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)特點[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會2002年年會文摘匯編[C];2002年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前8條

1 虞凌雪;表達豬GM-CSF重組PRRSV弱毒疫苗株的構(gòu)建及其免疫特性分析[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2014年

2 焦洋;HIV-1耐藥相關(guān)特征性突變位點及復(fù)制適應(yīng)性研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2015年

3 宋玲玲;牛副流感病毒3型HN基因—牛傳染性鼻氣管炎重組病毒的構(gòu)建與鑒定[D];石河子大學(xué);2016年

4 孫學(xué)強;馬皰疹病毒1型感染性克隆及表達豬鏈球菌2型亞單位重組病毒的構(gòu)建[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

5 李治軍;表達豬源GM-CSF或IL-4的重組豬繁殖與呼吸綜合征病毒的構(gòu)建及其免疫效率評價[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

6 申梁;基于人冠狀病毒OC43重組病毒抗病毒高通量篩選平臺的建立及初步應(yīng)用[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2017年

7 周井祥;豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5、M蛋白基因核酸疫苗和重組犬2型腺病毒疫苗構(gòu)建及免疫原性的研究[D];吉林大學(xué);2007年

8 邱薇;犬2型腺病毒基因重組活疫苗的基礎(chǔ)研究[D];中國人民解放軍軍需大學(xué);2001年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王玉龍;表達IBV主要結(jié)構(gòu)蛋白重組DEV的構(gòu)建及其免疫保護性評價[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

2 許建;HearNPV三種重組病毒對宿主幼蟲生理指標(biāo)的影響及Ha83中CBD突變體的構(gòu)建[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2016年

3 紀(jì)素坤;BHV-1gG~-/tk~-/GM-CSF~+重組病毒的構(gòu)建及其免疫效果的評價[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

4 鈔安軍;表達PCV2 CAP蛋白的重組豬偽狂犬病病毒的構(gòu)建及小鼠免疫效力觀察[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

5 白偉杰;PRRSV/GSWW/2015株病毒特征分析與重組病毒拯救技術(shù)體系建立[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2016年

6 江愷駿;含有pdmH1N1/09內(nèi)部基因的H9N2重組病毒在豚鼠間傳播特性和小鼠致病性的研究[D];揚州大學(xué);2016年

7 孫鵬;馬立克氏病毒SC9-2株生物學(xué)活性的比較研究及表達NDV-F基因重組病毒的構(gòu)建[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

8 楊明曦;新城疫重組病毒rmNA-1弱毒疫苗候選株免疫效果評價研究[D];吉林大學(xué);2017年

9 周明哲;棉鈴蟲核多角體病毒的傳播動態(tài)及含SOD重組病毒的構(gòu)建[D];中國科學(xué)院研究生院（武漢病毒研究所）;2004年

10 李海超;PCV2的分子流行病學(xué)分析及PCV2嵌合重組病毒的制備[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

，

本文編號：2486167