【摘要】：為明確擬南芥(Arabidopsis thaliana)光敏色素B激活標簽的抑制蛋白1(phy B activation-tagged suppressor1,BAS1)基因對煙草(Nicotiana tabacum)中煙堿、降煙堿和N-亞硝基降煙堿合成的影響,通過構建含有不同啟動子的植物表達載體p SH-p LXM5-BAS1和p SH-35S-BAS1遺傳轉化煙草。在8~10葉期分別取轉基因和野生型煙草植株相同部位的葉片,采用LC-MS方法對樣品中煙堿、降煙堿、亞硝基降煙堿含量進行測定,結果表明轉基因煙草煙堿含量和降煙堿含量與野生型相比均明顯提高。轉p LXM5-BAS1基因和轉35S-BAS1基因植株煙堿含量分別是野生型植株2.9倍和2.95倍;同時測得降煙堿含量分別為野生型的3.35倍和3.76倍;在轉基因和野生型煙草中均未檢測到亞硝基降煙堿。表明超量表達At BAS1對煙草的煙堿和降煙堿合成存在顯著影響。據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫中報道的煙堿合成相關基因PMT和QPT,降煙堿合成相關基因CYP82E4v1、CYP82E5v2、CYP82E10的序列,設計各基因的Real-time PCR引物,并以煙草β-Actin基因作為內(nèi)參,Real-Time PCR結果表明煙堿和降煙堿合成相關基因表達均出現(xiàn)不同程度的上調(diào)。綜上可知,在煙草中超量表達At BAS1基因,促使煙堿和降煙堿合成相關基因表達的上調(diào),直接導致了煙草中煙堿含量和降煙堿含量的大幅提高。本研究為后續(xù)深入挖掘影響煙堿及降煙堿生成及轉化的新基因并最終構建完整的煙堿代謝網(wǎng)絡提供了借鑒,也為研究煙堿向降煙堿轉化過程中信號因子和信號傳遞提供了一個新途徑。
[Abstract]:......
【作者單位】： 貴州大學生命科學學院/農(nóng)業(yè)生物工程研究院山地植物資源保護與種質創(chuàng)新省部共建教育部重點實驗室;貴州大學茶學院;貴州省農(nóng)業(yè)科學院;
【基金】：國家自然科學基金(No.31160149) 國家轉基因生物新品種培育重大專項(No.2016ZX08010-003) 中國煙草總公司貴州省公司科技專項(No.2012-01)共同資助
【分類號】：S572

【參考文獻】

相關期刊論文 前2條

1 鄒冰杰;呂立堂;趙德剛;;超量表達擬南芥油菜素內(nèi)酯基因BAS1對煙草維管組織發(fā)育的影響[J];基因組學與應用生物學;2016年06期

2 趙田;史宏志;樊在斗;徐發(fā)華;王新中;褚睿;孫軍偉;字萍;周海燕;趙曉丹;王涵;;云南賓川白肋煙生物堿含量及煙堿轉化率分析[J];煙草科技;2013年06期

【共引文獻】

相關期刊論文 前3條

1 陳明俊;姚新轉;呂立堂;趙德剛;;超量表達AtBAS1基因對煙草中煙堿和降煙堿合成的影響[J];基因組學與應用生物學;2017年06期

2 姚新轉;呂立堂;趙德剛;;轉PSAG12-BAS1基因抑制煙草葉片的衰老[J];農(nóng)業(yè)生物技術學報;2016年12期

3 趙丹;秦利軍;孫洪榮;趙杰宏;趙德剛;;煙草CYP82E4v1基因調(diào)控降煙堿的生物合成[J];煙草科技;2014年08期

【二級參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 李輝;左欽月;涂升斌;;油菜素內(nèi)酯生物合成和代謝研究進展[J];植物生理學報;2015年11期

2 王宇;董旋;趙德剛;;杜仲膠合成相關基因EuREF 1的克隆及分析[J];基因組學與應用生物學;2015年05期

3 杜玉梁;陳葉;劉彩虹;尹增芳;;植物維管組織形態(tài)建成的分子調(diào)控機制[J];北京林業(yè)大學學報;2014年03期

4 史宏志;李超;謝子發(fā);李蘭周;劉國順;王濤;吳純奎;魯喜梅;;白肋煙達白雜交種親本煙堿轉化率分析及改良效果[J];中國煙草學報;2009年02期

5 史宏志;劉國順;謝子發(fā);李超;魏躍偉;王芳;凌愛芬;;不同產(chǎn)地白肋煙中性香氣成分及生物堿組成和含量分析[J];中國煙草學報;2008年04期

6 史宏志;李超;謝子發(fā);劉國順;王濤;陳志華;馬琳;魯喜梅;;白肋煙達白雜交種及其親本的煙堿轉化率分析[J];河南農(nóng)業(yè)大學學報;2008年03期

7 李進平;李宗平;史宏志;王昌軍;;降低鄂煙1號煙堿向降煙堿轉化的遺傳改良研究[J];中國煙草學報;2007年02期

8 史宏志;李進平;范藝寬;李宗平;王昌軍;;我國不同類型煙葉煙堿轉化株的比例和轉化程度分布[J];中國煙草學報;2007年01期

9 史宏志;李進平;李宗平;L.P.Bush;王昌軍;劉國順;;遺傳改良降低白肋煙雜交種煙堿轉化率研究[J];中國農(nóng)業(yè)科學;2007年01期

10 史宏志,李進平,L.P.Bush,李宗平,王昌軍,張祥林;白肋煙雜交種及親本煙堿轉化株的鑒別[J];中國煙草學報;2005年04期

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 DEWEY R E;SIMINSZK Y B;BOWEN S W;GAVILANO L;WAREK U;HAYES A;吳曉蕓;;煙堿N-脫甲基酶基因的功能描述[J];中國煙草學報;2007年03期

2 周通;謝曉陽;徐波;劉志文;吳曉玉;蔣衛(wèi);桑菁菁;;降解煙堿細菌的分離·篩選及初步鑒定[J];安徽農(nóng)業(yè)科學;2008年36期

3 薛小平;陳懿;王茂勝;潘文杰;李繼新;;煙堿的研究現(xiàn)狀[J];安徽農(nóng)業(yè)科學;2008年10期

4 李文正;宋中邦;高玉龍;趙興能;李永平;;煙堿合成分子調(diào)控研究進展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學;2013年14期

5 ;用紫外分光光度法測定煙堿[J];煙草科技通訊;1976年04期

6 姚玉霞，王淑平，李澤鴻，，張晶，王艷梅;用紫外分光光度計法測定煙堿含量的探討[J];農(nóng)業(yè)與技術;1994年04期

7 黃鶯,周梅,黃河,徐偉;煙草煙堿含量的調(diào)控措施研究[J];種子;2004年04期

8 薛劍波,符云鵬,尹永強;影響煙草中煙堿含量的因素及調(diào)控措施[J];安徽農(nóng)業(yè)科學;2005年06期

9 Balazs Siminszcky;Ralph E.Dewey;時焦;;煙堿轉化為去甲基煙堿的原理研究與遺傳資源開發(fā)[J];中國煙草學報;2006年04期

10 雷麗萍;夏振遠;郭榮君;趙坤芬;;降煙堿節(jié)桿菌發(fā)酵條件研究[J];中國煙草科學;2006年03期

相關會議論文 前10條

1 史宏志;;煙草煙堿向降煙堿轉化研究[A];中國煙草學會第四屆理事會第四次會議暨2003年學術年會會刊[C];2003年

2 沈嘉;程新勝;;作為植物防御性物質的煙堿相關研究進展[A];中國煙草學會2006年學術年會論文集[C];2007年

3 慕萍麗;崔紅;宋志紅;劉國順;;不同理化因子對煙草發(fā)狀根生長及煙堿合成的影響[A];中國煙草學會2004年學術年會論文集[C];2004年

4 易建華;呂芬;楊煥文;;煙草中煙堿形成及影響因素[A];云南省作物學會2000—2003年優(yōu)秀論文選集[C];2004年

5 邱妙文;凌壽軍;王軍;;不同氮肥形態(tài)對烤煙煙堿含量以及產(chǎn)質量的影響[A];中南片2003年煙草學術交流會論文集[C];2004年

6 招啟柏;王廣志;王宏武;湯一卒;;烤煙煙堿含量與其他化學成分的相關關系及其閾值的研究[A];中國煙草學會2006年學術年會論文集[C];2007年

7 張洲穎;周冀衡;趙百東;周子方;;煙堿致病性和藥用研究[A];依靠科技進步和創(chuàng)新加快發(fā)展現(xiàn)代農(nóng)業(yè)學術研討會優(yōu)秀論文集[C];2009年

8 李文卿;陳順輝;張仁椒;江榮風;李春英;張福鎖;;不同氮源對烤煙總氮和煙堿分布與積累規(guī)律的影響(摘要)[A];中國地壤學會第十次全國會員代表大會暨第五屆海峽兩岸土壤肥料學術交流研討會文集（面向農(nóng)業(yè)與環(huán)境的土壤科學專題篇）[C];2004年

9 謝志堅;涂書新;李進平;許汝冰;陳振國;曹仕明;王學龍;;基肥時間和氮肥(~(15)N)對烤煙生長發(fā)育、煙堿含量及其氮素來源的影響[A];中國核科學技術進展報告——中國核學會2009年學術年會論文集（第一卷·第8冊）[C];2009年

10 李文卿;陳順輝;江榮風;張福鎖;張仁椒;李春英;李春儉;巨曉棠;林祖斌;;煙田供氮對烤煙總氮和煙堿積累的影響[A];中國煙草學會2005年論文集[C];2005年

相關重要報紙文章 前4條

1 記者　李穎;“如煙”戒煙已成男士新時尚[N];科技日報;2006年

2 姚善榮;要抓好平衡營養(yǎng)施肥[N];經(jīng)理日報;2004年

3 記者 楊秋穗;六項措施加快建設步伐[N];廣東科技報;2006年

4 裔麗莉;曲靖卷煙廠確定導向型原料基地[N];經(jīng)理日報;2005年

相關博士學位論文 前8條

1 趙丹;煙草（Nicotiana tabacum L.）降煙堿代謝調(diào)控的分子機制研究[D];貴州大學;2016年

2 袁勇軍;Ochrobactrum intermedium DN2煙堿降解途徑及其在煙草中的應用研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2007年

3 習向銀;煙堿氮素來源和供氮對烤煙生長、氮素吸收、煙堿含量的影響[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2005年

4 王峰吉;烤煙煙堿化控調(diào)節(jié)機理及降堿技術研究[D];福建農(nóng)林大學;2005年

5 王學龍;礦質營養(yǎng)對烤煙煙堿的調(diào)控及其生理機制研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2012年

6 尉芹;土壤鉀轉化、煙株鉀吸收及煙堿累積的水熱耦合效應與特征參數(shù)研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2004年

7 劉岱松;氨基酸鉀肥對煙草生理指標及品質的調(diào)控研究[D];沈陽農(nóng)業(yè)大學;2009年

8 賈方方;不同光照處理對烤煙品質的影響及氮化物的高光譜監(jiān)測研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學;2013年

相關碩士學位論文 前10條

1 王美蘭;煙堿的提取與純化[D];江南大學;2007年

2 夏露;降解煙堿微生物的篩選、鑒定及降解條件優(yōu)化[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2011年

3 張娟;煙堿降解菌的篩選及其酶的純化與性質研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2012年

4 王俊;鉀對煙堿類物質的積累和它們生物合成相關基因表達的影響[D];蘇州大學;2015年

5 王國琴;煙草煙堿雜種優(yōu)勢表現(xiàn)及其基因差異表達分析[D];貴州大學;2015年

6 金云峰;不同生長溫度對煙草煙堿及質體色素代謝的影響[D];云南師范大學;2015年

7 李增華;煙草廢棄物與煙草薄片化學成分比較研究[D];河南大學;2015年

8 陳政燕;基于BP神經(jīng)網(wǎng)絡的會理縣氣象因子對“紅大”煙葉堿含量的預測分析[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2013年

9 伍良偉;降解煙堿微生物的篩選及在煙稈腐熟發(fā)酵中的應用[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2013年

10 王埡曼;醋纖香煙濾嘴截留煙堿及香煙煙氣室內(nèi)擴散規(guī)律的模擬研究[D];湖南大學;2016年

本文編號：2470111