【摘要】：為明確擬南芥(Arabidopsis thaliana)光敏色素B激活標(biāo)簽的抑制蛋白1(phy B activation-tagged suppressor1,BAS1)基因?qū)煵?Nicotiana tabacum)中煙堿、降煙堿和N-亞硝基降煙堿合成的影響,通過(guò)構(gòu)建含有不同啟動(dòng)子的植物表達(dá)載體p SH-p LXM5-BAS1和p SH-35S-BAS1遺傳轉(zhuǎn)化煙草。在8~10葉期分別取轉(zhuǎn)基因和野生型煙草植株相同部位的葉片,采用LC-MS方法對(duì)樣品中煙堿、降煙堿、亞硝基降煙堿含量進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因煙草煙堿含量和降煙堿含量與野生型相比均明顯提高。轉(zhuǎn)p LXM5-BAS1基因和轉(zhuǎn)35S-BAS1基因植株煙堿含量分別是野生型植株2.9倍和2.95倍;同時(shí)測(cè)得降煙堿含量分別為野生型的3.35倍和3.76倍;在轉(zhuǎn)基因和野生型煙草中均未檢測(cè)到亞硝基降煙堿。表明超量表達(dá)At BAS1對(duì)煙草的煙堿和降煙堿合成存在顯著影響。據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中報(bào)道的煙堿合成相關(guān)基因PMT和QPT,降煙堿合成相關(guān)基因CYP82E4v1、CYP82E5v2、CYP82E10的序列,設(shè)計(jì)各基因的Real-time PCR引物,并以煙草β-Actin基因作為內(nèi)參,Real-Time PCR結(jié)果表明煙堿和降煙堿合成相關(guān)基因表達(dá)均出現(xiàn)不同程度的上調(diào)。綜上可知,在煙草中超量表達(dá)At BAS1基因,促使煙堿和降煙堿合成相關(guān)基因表達(dá)的上調(diào),直接導(dǎo)致了煙草中煙堿含量和降煙堿含量的大幅提高。本研究為后續(xù)深入挖掘影響煙堿及降煙堿生成及轉(zhuǎn)化的新基因并最終構(gòu)建完整的煙堿代謝網(wǎng)絡(luò)提供了借鑒,也為研究煙堿向降煙堿轉(zhuǎn)化過(guò)程中信號(hào)因子和信號(hào)傳遞提供了一個(gè)新途徑。
[Abstract]:......
【作者單位】： 貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院/農(nóng)業(yè)生物工程研究院山地植物資源保護(hù)與種質(zhì)創(chuàng)新省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;貴州大學(xué)茶學(xué)院;貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(No.31160149) 國(guó)家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專(zhuān)項(xiàng)(No.2016ZX08010-003) 中國(guó)煙草總公司貴州省公司科技專(zhuān)項(xiàng)(No.2012-01)共同資助
【分類(lèi)號(hào)】：S572

【參考文獻(xiàn)】

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1 鄒冰杰;呂立堂;趙德剛;;超量表達(dá)擬南芥油菜素內(nèi)酯基因BAS1對(duì)煙草維管組織發(fā)育的影響[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2016年06期

2 趙田;史宏志;樊在斗;徐發(fā)華;王新中;褚睿;孫軍偉;字萍;周海燕;趙曉丹;王涵;;云南賓川白肋煙生物堿含量及煙堿轉(zhuǎn)化率分析[J];煙草科技;2013年06期

【共引文獻(xiàn)】

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1 陳明俊;姚新轉(zhuǎn);呂立堂;趙德剛;;超量表達(dá)AtBAS1基因?qū)煵葜袩焿A和降煙堿合成的影響[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2017年06期

2 姚新轉(zhuǎn);呂立堂;趙德剛;;轉(zhuǎn)PSAG12-BAS1基因抑制煙草葉片的衰老[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào);2016年12期

3 趙丹;秦利軍;孫洪榮;趙杰宏;趙德剛;;煙草CYP82E4v1基因調(diào)控降煙堿的生物合成[J];煙草科技;2014年08期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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1 李輝;左欽月;涂升斌;;油菜素內(nèi)酯生物合成和代謝研究進(jìn)展[J];植物生理學(xué)報(bào);2015年11期

2 王宇;董旋;趙德剛;;杜仲膠合成相關(guān)基因EuREF 1的克隆及分析[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2015年05期

3 杜玉梁;陳葉;劉彩虹;尹增芳;;植物維管組織形態(tài)建成的分子調(diào)控機(jī)制[J];北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2014年03期

4 史宏志;李超;謝子發(fā);李蘭周;劉國(guó)順;王濤;吳純奎;魯喜梅;;白肋煙達(dá)白雜交種親本煙堿轉(zhuǎn)化率分析及改良效果[J];中國(guó)煙草學(xué)報(bào);2009年02期

5 史宏志;劉國(guó)順;謝子發(fā);李超;魏躍偉;王芳;凌愛(ài)芬;;不同產(chǎn)地白肋煙中性香氣成分及生物堿組成和含量分析[J];中國(guó)煙草學(xué)報(bào);2008年04期

6 史宏志;李超;謝子發(fā);劉國(guó)順;王濤;陳志華;馬琳;魯喜梅;;白肋煙達(dá)白雜交種及其親本的煙堿轉(zhuǎn)化率分析[J];河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2008年03期

7 李進(jìn)平;李宗平;史宏志;王昌軍;;降低鄂煙1號(hào)煙堿向降煙堿轉(zhuǎn)化的遺傳改良研究[J];中國(guó)煙草學(xué)報(bào);2007年02期

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9 史宏志;李進(jìn)平;李宗平;L.P.Bush;王昌軍;劉國(guó)順;;遺傳改良降低白肋煙雜交種煙堿轉(zhuǎn)化率研究[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué);2007年01期

10 史宏志,李進(jìn)平,L.P.Bush,李宗平,王昌軍,張祥林;白肋煙雜交種及親本煙堿轉(zhuǎn)化株的鑒別[J];中國(guó)煙草學(xué)報(bào);2005年04期

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1 DEWEY R E;SIMINSZK Y B;BOWEN S W;GAVILANO L;WAREK U;HAYES A;吳曉蕓;;煙堿N-脫甲基酶基因的功能描述[J];中國(guó)煙草學(xué)報(bào);2007年03期

2 周通;謝曉陽(yáng);徐波;劉志文;吳曉玉;蔣衛(wèi);桑菁菁;;降解煙堿細(xì)菌的分離·篩選及初步鑒定[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年36期

3 薛小平;陳懿;王茂勝;潘文杰;李繼新;;煙堿的研究現(xiàn)狀[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年10期

4 李文正;宋中邦;高玉龍;趙興能;李永平;;煙堿合成分子調(diào)控研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年14期

5 ;用紫外分光光度法測(cè)定煙堿[J];煙草科技通訊;1976年04期

6 姚玉霞，王淑平，李澤鴻，，張晶，王艷梅;用紫外分光光度計(jì)法測(cè)定煙堿含量的探討[J];農(nóng)業(yè)與技術(shù);1994年04期

7 黃鶯,周梅,黃河,徐偉;煙草煙堿含量的調(diào)控措施研究[J];種子;2004年04期

8 薛劍波,符云鵬,尹永強(qiáng);影響煙草中煙堿含量的因素及調(diào)控措施[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2005年06期

9 Balazs Siminszcky;Ralph E.Dewey;時(shí)焦;;煙堿轉(zhuǎn)化為去甲基煙堿的原理研究與遺傳資源開(kāi)發(fā)[J];中國(guó)煙草學(xué)報(bào);2006年04期

10 雷麗萍;夏振遠(yuǎn);郭榮君;趙坤芬;;降煙堿節(jié)桿菌發(fā)酵條件研究[J];中國(guó)煙草科學(xué);2006年03期

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1 史宏志;;煙草煙堿向降煙堿轉(zhuǎn)化研究[A];中國(guó)煙草學(xué)會(huì)第四屆理事會(huì)第四次會(huì)議暨2003年學(xué)術(shù)年會(huì)會(huì)刊[C];2003年

2 沈嘉;程新勝;;作為植物防御性物質(zhì)的煙堿相關(guān)研究進(jìn)展[A];中國(guó)煙草學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2007年

3 慕萍麗;崔紅;宋志紅;劉國(guó)順;;不同理化因子對(duì)煙草發(fā)狀根生長(zhǎng)及煙堿合成的影響[A];中國(guó)煙草學(xué)會(huì)2004年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2004年

4 易建華;呂芬;楊煥文;;煙草中煙堿形成及影響因素[A];云南省作物學(xué)會(huì)2000—2003年優(yōu)秀論文選集[C];2004年

5 邱妙文;凌壽軍;王軍;;不同氮肥形態(tài)對(duì)烤煙煙堿含量以及產(chǎn)質(zhì)量的影響[A];中南片2003年煙草學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2004年

6 招啟柏;王廣志;王宏武;湯一卒;;烤煙煙堿含量與其他化學(xué)成分的相關(guān)關(guān)系及其閾值的研究[A];中國(guó)煙草學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2007年

7 張洲穎;周冀衡;趙百東;周子方;;煙堿致病性和藥用研究[A];依靠科技進(jìn)步和創(chuàng)新加快發(fā)展現(xiàn)代農(nóng)業(yè)學(xué)術(shù)研討會(huì)優(yōu)秀論文集[C];2009年

8 李文卿;陳順輝;張仁椒;江榮風(fēng);李春英;張福鎖;;不同氮源對(duì)烤煙總氮和煙堿分布與積累規(guī)律的影響(摘要)[A];中國(guó)地壤學(xué)會(huì)第十次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第五屆海峽兩岸土壤肥料學(xué)術(shù)交流研討會(huì)文集（面向農(nóng)業(yè)與環(huán)境的土壤科學(xué)專(zhuān)題篇）[C];2004年

9 謝志堅(jiān);涂書(shū)新;李進(jìn)平;許汝冰;陳振國(guó);曹仕明;王學(xué)龍;;基肥時(shí)間和氮肥(~(15)N)對(duì)烤煙生長(zhǎng)發(fā)育、煙堿含量及其氮素來(lái)源的影響[A];中國(guó)核科學(xué)技術(shù)進(jìn)展報(bào)告——中國(guó)核學(xué)會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（第一卷·第8冊(cè)）[C];2009年

10 李文卿;陳順輝;江榮風(fēng);張福鎖;張仁椒;李春英;李春儉;巨曉棠;林祖斌;;煙田供氮對(duì)烤煙總氮和煙堿積累的影響[A];中國(guó)煙草學(xué)會(huì)2005年論文集[C];2005年

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1 記者　李穎;“如煙”戒煙已成男士新時(shí)尚[N];科技日?qǐng)?bào);2006年

2 姚善榮;要抓好平衡營(yíng)養(yǎng)施肥[N];經(jīng)理日?qǐng)?bào);2004年

3 記者 楊秋穗;六項(xiàng)措施加快建設(shè)步伐[N];廣東科技報(bào);2006年

4 裔麗莉;曲靖卷煙廠確定導(dǎo)向型原料基地[N];經(jīng)理日?qǐng)?bào);2005年

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1 趙丹;煙草（Nicotiana tabacum L.）降煙堿代謝調(diào)控的分子機(jī)制研究[D];貴州大學(xué);2016年

2 袁勇軍;Ochrobactrum intermedium DN2煙堿降解途徑及其在煙草中的應(yīng)用研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

3 習(xí)向銀;煙堿氮素來(lái)源和供氮對(duì)烤煙生長(zhǎng)、氮素吸收、煙堿含量的影響[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

4 王峰吉;烤煙煙堿化控調(diào)節(jié)機(jī)理及降堿技術(shù)研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2005年

5 王學(xué)龍;礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)對(duì)烤煙煙堿的調(diào)控及其生理機(jī)制研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

6 尉芹;土壤鉀轉(zhuǎn)化、煙株鉀吸收及煙堿累積的水熱耦合效應(yīng)與特征參數(shù)研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2004年

7 劉岱松;氨基酸鉀肥對(duì)煙草生理指標(biāo)及品質(zhì)的調(diào)控研究[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

8 賈方方;不同光照處理對(duì)烤煙品質(zhì)的影響及氮化物的高光譜監(jiān)測(cè)研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

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1 王美蘭;煙堿的提取與純化[D];江南大學(xué);2007年

2 夏露;降解煙堿微生物的篩選、鑒定及降解條件優(yōu)化[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

3 張娟;煙堿降解菌的篩選及其酶的純化與性質(zhì)研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

4 王俊;鉀對(duì)煙堿類(lèi)物質(zhì)的積累和它們生物合成相關(guān)基因表達(dá)的影響[D];蘇州大學(xué);2015年

5 王國(guó)琴;煙草煙堿雜種優(yōu)勢(shì)表現(xiàn)及其基因差異表達(dá)分析[D];貴州大學(xué);2015年

6 金云峰;不同生長(zhǎng)溫度對(duì)煙草煙堿及質(zhì)體色素代謝的影響[D];云南師范大學(xué);2015年

7 李增華;煙草廢棄物與煙草薄片化學(xué)成分比較研究[D];河南大學(xué);2015年

8 陳政燕;基于BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的會(huì)理縣氣象因子對(duì)“紅大”煙葉堿含量的預(yù)測(cè)分析[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

9 伍良偉;降解煙堿微生物的篩選及在煙稈腐熟發(fā)酵中的應(yīng)用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

10 王埡曼;醋纖香煙濾嘴截留煙堿及香煙煙氣室內(nèi)擴(kuò)散規(guī)律的模擬研究[D];湖南大學(xué);2016年

本文編號(hào)：2470111