【摘要】：利用RT-PCR技術(shù)從巨峰葡萄中克隆獲得RS基因的全長c DNA序列,并利用農(nóng)桿菌侵染法轉(zhuǎn)化黃芪。試驗(yàn)結(jié)果表明:經(jīng)Vector NTI 11.0軟件分析克隆獲得的RS基因全長序列長度為1 241 bp,并帶14 bp長度的poly(A)尾巴,包含930 bp的開放讀碼框(ORF),編碼1個(gè)含310個(gè)氨基酸殘基的蛋白質(zhì)。生物信息學(xué)分析結(jié)果表明:RS基因編碼白藜蘆醇合成酶,對RS基因全長序列進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域分析,證明該基因具有查爾酮合成酶N端保守結(jié)構(gòu)域,其長度為225個(gè)氨基酸。對黃芪進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化結(jié)果表明:獲得了3棵黃芪轉(zhuǎn)基因陽性植株,通過DNA、RNA以及蛋白質(zhì)水平證明RS基因已經(jīng)完全整合到黃芪基因組中并表達(dá)。
[Abstract]:The full-length c-DNA sequence of RS gene was cloned from Jufeng grape by RT-PCR and transformed into Astragalus membranaceus by Agrobacterium. The results showed that the full length of RS gene was 1 241 bp, with 14 bp length poly (A) tail, which contained an open reading frame (ORF), of 930 bp. The results showed that the full length of RS gene was 1 241 bp, and 14 bp length poly (A) tail was obtained by Vector NTI 11.0 software. It encodes a protein containing 310 amino acid residues. Bioinformatics analysis showed that RS gene encodes resveratrol synthetase and analyzed the protein domain of the full-length sequence of RS gene. It is proved that the gene has a conserved N-terminal domain of chalcone synthetase and its length is 225amino acids. The results of genetic transformation of Astragalus membranaceus showed that three transgenic plants of Astragalus membranaceus were obtained. DNA,RNA and protein level showed that RS gene had been fully integrated into the genome of Astragalus membranaceus and expressed in the genome of Astragalus membranaceus.
【作者單位】： 吉林大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院;
【基金】：吉林大學(xué)農(nóng)學(xué)部杰青培育計(jì)劃擇優(yōu)資助項(xiàng)目(編號:4305050102TW)
【分類號】：Q943.2

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