【摘要】：目的:探討RNA干擾過氧化還原酶1(Peroxiredoxin 1,PRDX1)表達對人結(jié)直腸癌SW480細胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。方法:篩選RNA干擾PRDX1的慢病毒質(zhì)粒,與陰性對照慢病毒質(zhì)粒分組轉(zhuǎn)染結(jié)直腸癌SW480細胞,轉(zhuǎn)染后的SW480細胞可分為PRDX1基因沉默組(si-PRDX1)和陰性對照組(Vector)。實時熒光定量PCR(qRT-PCR)和免疫印跡法(Western blot)分別檢測兩組細胞中PRDX1 mRNA和蛋白表達;采用Transwell侵襲和遷移實驗檢測基因沉默PRDX1表達對結(jié)直腸癌細胞侵襲及遷移能力的影響;通過Western blot檢測兩組細胞中基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)家族部分蛋白表達水平。結(jié)果:基因沉默PRDX1表達可有效抑制結(jié)直腸癌SW480細胞中PRDX1 mRNA和蛋白水平的表達,與陰性對照組相比(Vector),差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.01),說明基因沉默PRDX1的SW480細胞系構(gòu)建成功;Transwell侵襲和遷移實驗顯示si-PRDX1組細胞的侵襲及遷移能力較對照組均明顯降低(P0.01);Western blot結(jié)果顯示,與Vector組相比,si-PRDX1組細胞中組織基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑2(TIMP-2)的表達明顯增加,而MMP-2及MMP-9的表達顯著下降,且差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:基因沉默人結(jié)直腸癌SW480細胞的PRDX1表達可有效抑制細胞的侵襲、遷移及轉(zhuǎn)移能力,其機制可能會通過調(diào)控TIMP-2、MMP-2及MMP-9的表達介導。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of RNA interfering peroxidase 1 (Peroxiredoxin 1) expression on the invasion and metastasis of human colorectal cancer SW480 cells. Methods: the lentivirus plasmids interfering with PRDX1 by RNA were screened and transfected into SW480 cells of colorectal cancer. The transfected SW480 cells were divided into PRDX1 gene silencing group (si-PRDX1) and negative control group (Vector). The transfected SW480 cells were divided into two groups: PRDX1 gene silencing group (si-PRDX1) and negative control group (Vector). Real-time fluorescent quantitative PCR (qRT-PCR) and Western blot (Western blot) were used to detect the expression of PRDX1 mRNA and protein, and Transwell invasion and migration assay were used to detect the effect of gene silencing PRDX1 expression on the invasion and migration of colorectal cancer cells. The expression level of matrix metalloproteinase (MMP) family was detected by Western blot. Results: gene silencing of PRDX1 could effectively inhibit the expression of PRDX1 mRNA and protein in SW480 cells of colorectal cancer. Compared with the negative control group, the expression of (Vector), was significantly different between the two groups (P0.01). The results showed that the SW480 cell line with gene silencing PRDX1 was successfully constructed. Transwell invasion and migration assay showed that the invasion and migration ability of si-PRDX1 group was significantly lower than that of control group (P0.01). The results of Western blot showed that the expression of tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP-2) in si-PRDX1 group was significantly higher than that in Vector group, while the expression of MMP-2 and MMP-9 was significantly decreased in si-PRDX1 group. The difference was statistically significant (P0.05). Conclusion: gene silencing the expression of PRDX1 in human colorectal cancer SW480 cells can effectively inhibit the invasion, migration and metastasis of human colorectal cancer cells, and its mechanism may be mediated by regulating the expression of TIMP-2,MMP-2 and MMP-9.
【作者單位】： 遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院腫瘤醫(yī)院腹部腫瘤科;遵義醫(yī)學院免疫學教研室 貴州省免疫學研究生教育創(chuàng)新基地;安徽省腫瘤醫(yī)院放療科;
【基金】：國家自然科學基金項目(81560407) 貴州省科技廳社會發(fā)展攻關(guān)項目(黔科合SY字[2015]3046號);貴州省科技廳聯(lián)合基金項目(黔科合LH字[2015]7505號) 貴州省科學技術(shù)基金項目(黔科合J字[2013]2312號)資助
【分類號】：R735.34

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本文編號：2428233