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重寄生真菌盾殼霉pH信號通路中Pal相關(guān)基因的功能鑒定

發(fā)布時間:2019-01-30 10:01
【摘要】:【目的】研究pH信號通路(Pal)在重寄生真菌盾殼霉與寄主核盤菌互作過程中的作用!痉椒ā繌亩軞っ谷蚪M信息中分析獲得了6個Pal相關(guān)基因CmpalA、CmpalB、CmpalC、CmpalF、CmpalH和CmpalI的全編碼序列和氨基酸序列,通過PEG介導的原生質(zhì)轉(zhuǎn)化技術(shù)獲得了CmpalA、CmpalB、CmpalC、CmpalF和CmpalH等5個基因的敲除突變體,分析這些敲除突變體與野生型在菌落培養(yǎng)性狀、重寄生能力、降解草酸能力、產(chǎn)生抗真菌物質(zhì)能力等方面的差異!窘Y(jié)果】與野生型相比,在pH 6 8的條件下,5個Pal相關(guān)基因敲除突變體的菌絲生長受到顯著抑制,這說明缺失Pal相關(guān)基因使盾殼霉對高pH值環(huán)境更加敏感。菌核重寄生試驗發(fā)現(xiàn)5個Pal相關(guān)基因敲除突變體的重寄生能力均顯著低于野生型。qRT-PCR試驗結(jié)果表明,敲除Pal相關(guān)基因之后導致重寄生相關(guān)酶基因Cmch1、Cmg1和Cmsp1的表達量顯著降低,而且pH信號通路下游的CmpacC基因的表達量也顯著降低。Pal相關(guān)基因敲除突變體在pH 6條件下對草酸鹽的降解能力顯著高于野生型,同時這5個突變體在pH 8條件下產(chǎn)生抗真菌物質(zhì)能力也顯著高于野生型!窘Y(jié)論】pH信號通路相關(guān)基因的缺失影響盾殼霉對環(huán)境pH的響應(yīng)。pH信號通路在盾殼霉與核盤菌互作中發(fā)揮重要作用,不僅影響盾殼霉的重寄生作用,而且還影響盾殼霉的草酸降解作用和抗真菌作用。
[Abstract]:[objective] to study the role of pH signaling pathway (Pal) in the interaction between the highly parasitic fungi of Trichoderma auricularis and host Sclerotinia sclerotiorum. [methods] six Pal related genes, CmpalA,CmpalB,CmpalC,CmpalF, were obtained from the genomic information of C. auriculatus. The full coding sequence and amino acid sequence of CmpalH and CmpalI were used to obtain CmpalA,CmpalB,CmpalC,CmpalF and CmpalH knockout mutants by PEG mediated protoplast transformation technique. The characters of these knockout mutants and wild type in colony culture were analyzed. [results] compared with the wild type, the hyphal growth of 5 Pal related gene knockout mutants was significantly inhibited under the condition of pH 6 + 8, but the ability to degrade oxalic acid and to produce antifungal substances were significantly different, [results] compared with the wild type, the hyphal growth of 5 Pal related gene knockout mutants was significantly inhibited. This suggests that the deletion of Pal related genes makes C. capsidii more sensitive to high pH values. The results of the sclerotia heavy parasitism test showed that the ability of the five Pal related gene knockout mutants was significantly lower than that of the wild type. The results of qRT-PCR test showed that the knockout of Pal related genes led to the hyperparasitic enzyme gene Cmch1,. The expression of Cmg1 and Cmsp1 was significantly decreased, and the expression of CmpacC gene downstream of pH signaling pathway was also significantly decreased. The ability of Pal related gene knockout mutant to degrade oxalate was significantly higher than that of wild type under pH 6 condition. At the same time, the ability of the five mutants to produce antifungal substances under pH 8 was also significantly higher than that of wild type. [conclusion] the absence of genes associated with pH signaling pathway affects the response of C. auriculatus to environmental pH. PH signaling pathway is found in Trichoderma australis. Play an important role in interaction with Sclerotinia sclerotiorum, It not only affects the hyperparasitism, but also the oxalic acid degradation and the antifungal action.
【作者單位】: 華中農(nóng)業(yè)大學植物科學技術(shù)學院湖北省作物病害監(jiān)測與安全控制重點實驗室;
【基金】:國家自然科學基金(31272084,31471813,31672073)~~
【分類號】:S476

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本文編號:2418016

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