發(fā)布時(shí)間：2019-01-04 10:07

【摘要】：亞洲玉米螟Ostrrinia furnacalis(Guenee),是我國主要玉米害蟲,屬典型的兼性滯育昆蟲,通常以5齡低溫耐受型幼蟲滯育越冬。為探索亞洲玉米螟滯育幼蟲受到低溫脅迫時(shí),耐寒相關(guān)基因的表達(dá)量變化規(guī)律,本文在評估篩選亞洲玉米螟越冬幼蟲及不同蟲態(tài)內(nèi)參基因表達(dá)穩(wěn)定性的基礎(chǔ)上,選取編碼耐寒相關(guān)蛋白的基因—精氨酸激酶基因(AK),谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶基因(Gst)和磷酸甘油醛異構(gòu)酶基因(Tpi),研究熱馴化(20℃)與冷馴化(5℃)維持滯育狀態(tài)下及在越冬期間的滯育幼蟲的AK、Gst和Tpi基因表達(dá)的時(shí)間動(dòng)態(tài),旨在為解析亞洲玉米螟幼蟲對低溫脅迫的分子適應(yīng)機(jī)制奠定基礎(chǔ)。全文試驗(yàn)結(jié)果如下:(1)篩選出可用于研究亞洲玉米螟滯育時(shí)基因表達(dá)研究的最適內(nèi)參基因。亞洲玉米螟不同蟲態(tài)下,4個(gè)候選內(nèi)參基因的穩(wěn)定性大小排序?yàn)?8S rRNAEF1-αβ-ctinPS3;越冬滯育幼蟲中,穩(wěn)定性大小排序?yàn)棣?aactinEF1-α18S rRNARPS3。在亞洲玉米螟不同蟲態(tài)和越冬滯育幼蟲中,18SrRNA和β-actin可分別作為目的基因表達(dá)水平分析試驗(yàn)中的內(nèi)參基因。(2)探索亞洲玉米螟滯育相關(guān)的脅迫耐受性過程。分析AK、Gst和Tpi基因在確定滯育、熱馴化(20℃)與冷馴化(5℃)滯育維持過程中的表達(dá)動(dòng)態(tài)。與非滯育組相比,滯育起始階段Gst基因相對表達(dá)量顯著下調(diào),AK和Tpi基因表達(dá)量無顯著差異。在熱馴化期間,僅Tpi基因表達(dá)量下調(diào);冷馴化期間,3個(gè)基因表達(dá)量均上調(diào),且呈逐漸上升的趨勢。低溫滯育期間mRNA的半衰期延長,mRNA轉(zhuǎn)錄逐漸積累,滯育過程和溫度均影響亞洲玉米螟脅迫相關(guān)基因的表達(dá)。(3)了解越冬期間滯育幼蟲的AK、Gst和Tpi基因表達(dá)的時(shí)間動(dòng)態(tài)。分析越冬滯育幼蟲AK、Gst和Tpi基因的表達(dá)量,亞洲玉米螟幼蟲越冬期間AK、Gst和Tpi基因表達(dá)量均呈上調(diào),且與越冬環(huán)境溫度呈負(fù)相關(guān)性。表明能量代謝和抗氧化反應(yīng)作用于亞洲玉米螟滯育幼蟲的低溫脅迫過程。
[Abstract]:Asian corn borer (Ostrrinia furnacalis (Guenee), a typical facultative diapause insect, is the main maize pest in China. In order to investigate the changes of the expression of genes related to cold tolerance in diapause larvae of Asian corn borer under low temperature stress, this paper evaluated the stability of gene expression in overwintering larvae of Asian corn borer and different insect states. Selection of (AK), glutathione transferase gene (Gst) and phosphoglyceraldehyde isomerase gene (Tpi), encoding cold-resistance-related protein arginine kinase gene To study the temporal dynamics of AK,Gst and Tpi gene expression in diapause larvae maintained by heat acclimation (20 鈩，

本文編號：2400124