【摘要】：研究通過c DNA末端快速擴(kuò)增法(RACE)克隆得到團(tuán)頭魴生長抑制素(MSTN)基因的c DNA全長并分析了MSTN基因在團(tuán)頭魴胚胎、成魚組織中表達(dá)以及MSTN基因在胚胎中過表達(dá)情況。結(jié)果表明團(tuán)頭魴MSTN基因的c DNA全長為2187 bp,ORF(開放閱讀框)大小為1128 bp,編碼376個氨基酸。組織逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)結(jié)果顯示,MSTN基因在肌肉、腦和精巢組織中大量表達(dá),肝臟、脾臟和卵巢組織中的少量表達(dá),腸、腮、心、眼和腎組織中的微量表達(dá)。胚胎逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)結(jié)果顯示,在0—44 hpf胚胎發(fā)育階段,MSTN基因表達(dá)量較低;而在48—52 hpf胚胎發(fā)育階段,MSTN基因表達(dá)量逐漸升高。整胚原位雜交(WISH)結(jié)果顯示,胚胎發(fā)育的16 hpf時期MSTN基因主要在脊索中表達(dá),胚胎發(fā)育的28 hpf和55 hpf時期MSTN基因在腦中表達(dá)。MSTN基因過表達(dá)結(jié)果顯示,胚胎在體節(jié)發(fā)生期出現(xiàn)前-后軸拉長,背-腹軸變短;脊索發(fā)生扭曲,強(qiáng)烈抑制體節(jié)發(fā)育而導(dǎo)致不分化等現(xiàn)象。研究為后續(xù)團(tuán)頭魴MSTN基因的功能研究及團(tuán)頭魴分子育種提供相關(guān)參考依據(jù)。
[Abstract]:The full length of c DNA of (MSTN) gene was cloned by rapid amplification of c DNA terminal (RACE). The expression of MSTN gene in embryo and adult fish tissues and overexpression of MSTN gene in embryo were analyzed. The results showed that the full length of c DNA of MSTN gene was 2187 bp,ORF (open reading frame) and the size of c DNA was 1128 bp, encoding 376 amino acids. Tissue reverse transcription PCR (RT-PCR) showed that MSTN gene was highly expressed in muscle, brain and spermary tissues, a small amount in liver, spleen and ovary, and in intestine, cheek, heart, eye and kidney. The results of embryo reverse transcription PCR (RT-PCR) showed that the expression of MSTN gene was lower in 0-44 hpf embryo development stage, but increased gradually in 48-52 hpf embryo development stage. The results of in situ hybridization (WISH) showed that the MSTN gene was mainly expressed in the notochord at 16 hpf of embryonic development, MSTN gene was expressed in the brain at 28 hpf and 55 hpf in embryonic development, and MSTN gene was overexpressed in the brain. In the ganglionogenesis stage, the pre- posterior axis was elongated, and the dorsol-ventral axis became shorter. The notochord is distorted, strongly inhibits the development of somatic ganglia and leads to indifferentiation. The study provides a reference for the functional study of MSTN gene and molecular breeding of bream.
【作者單位】： 上海海洋大學(xué)農(nóng)業(yè)部淡水水產(chǎn)種質(zhì)資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家科技支撐計劃(2012BAD26B00) 國家自然科學(xué)基金(31272633和31201760)資助~~
【分類號】：S917.4

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本文編號：2396136