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興國(guó)紅鯉ER基因克隆表達(dá)及EE2暴露對(duì)肝中ER表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-12-18 03:45
【摘要】:為評(píng)估環(huán)境內(nèi)分泌干擾物對(duì)魚類的影響,研究克隆了興國(guó)紅鯉雌激素受體(Estrogen receptor,ER)4種亞型ERα、ERβ、ERβ1、ERβ2的全長(zhǎng)c DNA序列,氨基酸序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)興國(guó)紅鯉ERs分別與3種鯉科魚類相應(yīng)亞型具有較高的同源性。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q RT-PCR)檢測(cè)結(jié)果表明,4種ER亞型m RNA在雌雄成體組織中呈現(xiàn)差異表達(dá),雌性個(gè)體中,肝、卵巢和腸中4種ERs的表達(dá)量均較高;在雄性個(gè)體中,ERα和ERβ主要在肝中表達(dá),ERβ1、ERβ2分別在腸和精巢中的表達(dá)量最高。將150日齡的興國(guó)紅鯉幼魚分別暴露在0.01、0.1和1 nmol/L的17α-乙炔基雌二醇(EE2)中4周,檢測(cè)了雌性幼魚肝中4種ER基因的表達(dá)變化情況。在EE2中暴露1—2周后,興國(guó)紅鯉雌性幼魚肝中ERα基因的表達(dá)水平有極顯著的提升;各濃度EE2能持續(xù)顯著促進(jìn)其肝中ERβ的表達(dá);在1—2周內(nèi)各濃度EE2對(duì)ERβ1表達(dá)有所抑制;第1周EE2能夠抑制ERβ2基因m RNA的表達(dá),并在0.01 nmol/L時(shí)抑制作用達(dá)到了顯著的水平。上述研究結(jié)果表明,EE2暴露能誘導(dǎo)或抑制興國(guó)紅鯉雌性幼魚肝中ER亞型的表達(dá),相對(duì)于ERβ、ERβ1和ERβ2、ERα可作為EE2短期(1—2周)敏感性生物學(xué)標(biāo)記。
[Abstract]:In order to evaluate the effects of environmental endocrine disruptors on fish, the full-length c DNA sequences of ER 偽, ER 尾, ER 尾 1ER 尾 2 subtypes of estrogen receptor (Estrogen receptor,ER) in Xingguo red carp were cloned. Amino acid sequence alignment showed that the ERs of Xingguo Red Carp had high homology with the corresponding subtypes of three Cyprinidae fishes. The results of real-time fluorescence quantitative PCR (q RT-PCR showed that the four ER subtypes m RNA were differentially expressed in female and male adult tissues, and the four ERs expression levels were higher in female individuals, liver, ovary and intestine. In male individuals, ER 偽 and ER 尾 were mainly expressed in the liver, and ER 尾 1 and ER 尾 2 were the highest in the intestine and testis, respectively. The expression of four kinds of ER genes in the liver of female juvenile red carp were detected by exposure to 17 偽 -acetylestradiol (EE2) for 0. 01 and 1 nmol/L for 4 weeks, respectively. After being exposed to EE2 for 1-2 weeks, the expression of ER 偽 gene in the liver of female young fish of Xingguo red carp was significantly increased, the expression of ER 尾 in liver was significantly increased by EE2 at different concentrations, and the expression of ER 尾 1 was inhibited by EE2 at different concentrations within 1-2 weeks. At the first week, EE2 could inhibit the expression of m RNA of ER 尾 2 gene, and the inhibitory effect reached a significant level at 0. 01 nmol/L. The results showed that EE2 exposure could induce or inhibit the expression of ER subtypes in the liver of young female red carp Carp. Compared with ER 尾, ER 尾 1 and ER 尾 2ER 偽, they could be used as biological markers of EE2 sensitivity in the short term (1-2 weeks).
【作者單位】: 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部淡水生物多樣性保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院;
【基金】:國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2011AA100401)資助~~
【分類號(hào)】:S917.4

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本文編號(hào):2385279

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