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新型轉(zhuǎn)基因抗草甘膦玉米的培育及轉(zhuǎn)基因玉米安全控制技術(shù)的研究.pdf 全文免

發(fā)布時(shí)間:2017-01-05 13:17

  本文關(guān)鍵詞:新型轉(zhuǎn)基因抗草甘膦玉米的培育及轉(zhuǎn)基因玉米安全控制技術(shù)的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


網(wǎng)友1322891254近日為您收集整理了關(guān)于新型轉(zhuǎn)基因抗草甘膦玉米的培育及轉(zhuǎn)基因玉米安全控制技術(shù)的研究的文檔,希望對(duì)您的工作和學(xué)習(xí)有所幫助。以下是文檔介紹:帶有兩個(gè)GIO基因的pCAMBll300載體通過電轉(zhuǎn)法導(dǎo)入農(nóng)桿菌LB4404中。采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的玉米轉(zhuǎn)基因方法我們共獲得了208個(gè)轉(zhuǎn)基因抗草甘膦玉米株系。研究中,通過PCR檢測(cè)、Southemblot、Westernblot、Tail.PCR以及草甘膦抗性實(shí)驗(yàn)對(duì)所獲得的轉(zhuǎn)基因株系進(jìn)行了分子生物的鑒定。結(jié)果表明,在所獲得的轉(zhuǎn)基因玉米株系中株系A(chǔ)nti.G.162不但對(duì)草甘膦表現(xiàn)出了高水平的抗性,而且為單拷貝株系,并且其T2代在農(nóng)藝性狀上與非轉(zhuǎn)基因玉米相比并沒有明顯的差異。該株系在浙江的試驗(yàn)表明,其抗性水平至少和Monsanto的相同。因此在抗草甘膦轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物開放以后,我們研發(fā)的產(chǎn)品能夠和Monsanto的產(chǎn)品進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng),從而保護(hù)我國的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物種業(yè)。篩選出的株系可以作為良好的轉(zhuǎn)基因抗草甘膦玉米,為下一步的玉米育種工作提供材料。浙江大學(xué)博士學(xué)位論文摘要(2)轉(zhuǎn)基因玉米因?yàn)楫惢ㄊ诜?花粉飄散的距離很遠(yuǎn),容易造成基因漂移,如何進(jìn)行安全控制一直是轉(zhuǎn)基因安全控制研究的重點(diǎn)。根據(jù)本課題組早期轉(zhuǎn)基因水稻的安全控制技術(shù)思路,我們也研究了一種在轉(zhuǎn)基因玉米上適用的安全控制技術(shù)。本研究中,采用RNA干擾的方法抑制玉米體內(nèi)煙嘧磺隆解毒酶基因CYP81A9的表達(dá),從而使轉(zhuǎn)基因玉米對(duì)煙嘧磺隆敏感;同時(shí)引入一個(gè)抗草甘膦基因GIO,這樣所獲得的轉(zhuǎn)基因玉米能被煙嘧磺隆選擇性殺死但對(duì)草甘膦具有抗性,而常規(guī)玉米由于本身對(duì)煙嘧磺隆不敏感所以不會(huì)受到任何影響。本論文中,最終所獲得的轉(zhuǎn)基因玉米株系R450.58能被正常大田使用濃度的煙嘧磺隆殺死。上述結(jié)果表明,本研究發(fā)展的這種可被選擇性滅殺的轉(zhuǎn)基因玉米技術(shù)是非常簡(jiǎn)單并且方便的。事實(shí)上,我們可以將任意我們所感興趣的基因?qū)氲奖狙芯克玫降腡-DNA載體骨架上,從而培育出可被選擇性控制的轉(zhuǎn)基因玉米,進(jìn)而根據(jù)我們的意愿通過噴施兩種常用的除草劑輕易的選擇出或是滅殺掉轉(zhuǎn)基因玉米植株。這一技術(shù)的出現(xiàn),將為我國發(fā)展更加安全、可靠、可控的轉(zhuǎn)基因生物提供技術(shù)上的保障和支持。關(guān)鍵詞:轉(zhuǎn)基因玉米,抗草甘膦,煙嘧磺隆,icallymodified(GM)cornwasoneoftheinitiallaunchedandmarketedcropsinthehistoryofagriculture,isalsothemostwidelyplantedGMgraincropsintheworld.Inrecentyears,merciallyavailableisglyphosatetolerance.Activelydevelopinganewgenerationofglyphosate.resistantCOrnvarietieswithpatents,petitionandchallenges.Therearethreebasicstrategiesthathavebeenevaluatedinordertointroduceglyphosateresistanceintocropspecies:over-expressionofthesensitivetargetenzyme,detoxificationoftheglyphosatemoleculeandexpressionofaninsensitiveformofthetargetenzyme.Inthisstudy,aninsensitiveEPSPsgenewastransferedintoCOrntoachivethebestevent.However,eptanceofsuchseedlinesandfoodproducts.Inspiteofthestrictpolicyintransgenicregulation,urredfromtimetotimebasedoncontrolmethodsofphysicalseparationandisolation.Soitisveryimportanttofmdnewstrategiestopreventthepotentialhazardsoftransgenespreading.Inthisstudy,wereportabuilt-ornTheresultsareasfollows:(1)usradioduransR1(GI:8469109)inourlaboratorypreviously.icanalysisrevealedthatthisEPSPSbelongsneithertoClassnortoClassIIEPSPSenzymes.TheGIODNAsequenceWassynthesizedtobeoptimizedforexpressionincorn.InordertodirecttheEPSPStothechloroplast,achloroplasttransitpeptidefromtheacetohydroxyacidsynthaseofZeamaysWasaddedinthe5’endoftheGIOgene.TheT-DNAplasmidp1300-pZmUbi-G10-p35S-actintron-G10containingtwoGIOgenesunderthecontrolofacornubiquitinpromoterandacauliflowermosaicvirus35Spromoter,separately.ItWastransformedintocornviaastandardAgrobacteriumtumefaciens-mediatedmethod.InOurtransformation,totalof208V

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本文編號(hào):235139

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