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下調(diào)尾型同源盒基因-2對結(jié)腸癌細(xì)胞的侵襲及遷移能力的影響及其機(jī)制

發(fā)布時間:2018-11-19 18:02
【摘要】:目的觀察下調(diào)尾型同源盒基因-2(CDX2)對結(jié)腸癌細(xì)胞侵襲遷移能力的影響,并初步探討CDX2基因在結(jié)腸癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用及機(jī)制。方法構(gòu)建CDX2RNAi慢病毒載體,并轉(zhuǎn)染人結(jié)腸癌SW480、HT29細(xì)胞,應(yīng)用Western blotting及qRT-PCR技術(shù)檢測CDX2基因的干擾效率;應(yīng)用Transwell及劃痕實驗檢測下調(diào)CDX2表達(dá)對SW480、HT29細(xì)胞侵襲、遷移能力的影響;Western blotting及RT-PCR檢測下調(diào)CDX2表達(dá)對SW480、HT29細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相關(guān)基因(E-cadherin、ZEB-1、Vimentin、Twist、Snail)表達(dá)的影響。結(jié)果構(gòu)建的CDX2RNAi慢病毒載體可有效地抑制SW480、HT29細(xì)胞中CDX2基因的表達(dá);轉(zhuǎn)染LV-CDX2-shRNA組與轉(zhuǎn)染空病毒組(LV-NT-shRNA)及空白對照組相比,侵襲、遷移能力顯著增強(P0.05);且E-cadherin表達(dá)下降,ZEB-1、Vimentin、Twist、Snail表達(dá)均升高。結(jié)論下調(diào)CDX2可誘導(dǎo)EMT發(fā)生,從而增強結(jié)腸癌細(xì)胞的侵襲遷移能力。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of down-regulation of tail homeobox gene-2 (CDX2) on the invasion and migration of colon cancer cells, and to explore the role and mechanism of CDX2 gene in the carcinogenesis and development of colon cancer. Methods CDX2RNAi lentivirus vector was constructed and transfected into human colon cancer SW480,HT29 cells. The interference efficiency of CDX2 gene was detected by Western blotting and qRT-PCR, and the effect of down-regulation of CDX2 expression on the invasion and migration of SW480,HT29 cells was detected by Transwell and scratch test. The effect of down-regulation of CDX2 expression by Western blotting and RT-PCR on the expression of E-cadherin1 epithelial-mesenchymal transition,EMT gene (E-cadherin1) in SW480,HT29 cells was studied. Results the constructed CDX2RNAi lentivirus vector could effectively inhibit the expression of CDX2 gene in SW480,HT29 cells. Compared with LV-NT-shRNA and control group, the invasiveness and migration ability of transfected LV-CDX2-shRNA group was significantly enhanced (P0.05), and the expression of E-cadherin decreased and ZEB-1,Vimentin,Twist,Snail expression increased. Conclusion down-regulation of CDX2 can induce EMT and enhance the ability of invasion and migration of colon cancer cells.
【作者單位】: 西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院普通外科;陜西省人民醫(yī)院心內(nèi)二科;西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院胸外一科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81101874;No.81172362) 陜西省科學(xué)技術(shù)研究發(fā)展計劃項目(No.2016SF-015;No.2015SF037) 陜西省科技統(tǒng)籌創(chuàng)新工程計劃項目(No.2013KTCQ03-08)~~
【分類號】:R735.35

【參考文獻(xiàn)】

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6 王國強;方m錁

本文編號:2343019


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