發(fā)布時間：2018-10-29 11:32

【摘要】：利用PCR方法獲得PRRSV M基因,使用原核表達系統(tǒng)p ET-28a(+)-BL21(DE3)誘導表達M蛋白。用表達的M蛋白建立檢測PRRSV抗體的間接ELISA。通過特異性試驗、阻斷試驗和重復性試驗考查基于重組M蛋白建立的ELISA(M-ELISA)的實用性,同時使用M-ELISA和IDEXX Herd Chek ELISA for PRRSV試劑盒檢測收集的400份臨床血清樣品。結(jié)果,用PCR擴增到了PRRSV M基因,獲得了重組M蛋白,建立了用于檢測PRRSV抗體的間接ELISA(M-ELISA);該M-ELISA具有良好的特異性和重復性。400份臨床血清的檢測結(jié)果與IDEXX試劑盒的檢測結(jié)果的符合率為95.3%。上述結(jié)果表明,本研究基于表達的重組M蛋白,成功建立了檢測RRSV抗體的間接ELISA。
[Abstract]:PRRSV M gene was obtained by PCR method, and M protein was induced by prokaryotic expression system p ET-28a ()-BL21 (DE3). Establishment of indirect ELISA. for Detection of PRRSV Antibody with expressed M protein The practicability of ELISA (M-ELISA) based on recombinant M protein was examined by specific test, blocking test and repeatability test. M-ELISA and IDEXX Herd Chek ELISA for PRRSV kits were used to detect 400 clinical serum samples. Results: PRRSV M gene was amplified by PCR, recombinant M protein was obtained and indirect ELISA (M-ELISA) was established to detect PRRSV antibody. The M-ELISA has good specificity and reproducibility. The coincidence rate of 400 clinical serum and IDEXX kit is 95.3%. The results indicated that the indirect ELISA. for detecting RRSV antibody was successfully established based on the expressed recombinant M protein.
【作者單位】： 四川農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院動物檢疫實驗室;
【基金】：“十二五”國家科技支撐計劃項目(2013BAD12B04)
【分類號】：S852.65

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 孫軍;;淺談原核表達的技巧[J];大學時代;2006年07期

2 金元昌;李景鵬;李會東;周建紅;;重組促性腺激素釋放激素基因原核表達的影響因素[J];湘潭師范學院學報(自然科學版);2006年02期

3 韓鈺;王艷林;;小鼠精胺氧化酶的原核表達與鑒定[J];生物技術(shù)通訊;2007年01期

4 朱向前;楊靜;丁曉然;王升啟;;重組人磷脂爬行酶1的原核表達及純化[J];生物技術(shù)通訊;2011年06期

5 哲名家;張淼濤;云濤;王玢tx;劉光清;;兔巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆與原核表達[J];西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版);2012年04期

6 謝海燕,郭霄峰;豬α-干擾素的原核表達[J];華南農(nóng)業(yè)大學學報;2004年04期

7 孫東波;馮力;劉杰;時洪艷;佟有恩;劉勝旺;童光志;;豬傳染性胃腸炎病毒n基因的原核表達及重組蛋白的免疫活性分析[J];病毒學報;2006年02期

8 孫軍;王俊杰;秦波;伏秀青;高倩倩;王興智;朱筱娟;;粘著斑激酶的原核表達、純化及抗體的制備[J];分子科學學報;2007年02期

9 戴華;鄭佳玉;陳俊華;潘志明;焦新安;;雞α干擾素基因的原核表達及其活性測定[J];中國預防獸醫(yī)學報;2009年10期

10 湯承;張兆敏;岳華;;雞熱休克蛋白70基因的克隆及原核表達[J];西南民族大學學報(自然科學版);2011年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 馬文濤;閆若潛;吳志明;劉光輝;盛敏;謝彩華;;豬白細胞介素-6的原核表達及其生物學活性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會2010年學術(shù)年會——第二屆中國獸醫(yī)臨床大會論文集(下冊)[C];2010年

2 丁夢蝶;魯?shù)?王紅寧;田浪;陽泰;張毅;樊汶樵;郭自成;;禽傳染性支氣管炎病毒多基因串聯(lián)表位抗原的原核表達研究[A];四川省動物學會第九次會員代表大會暨第十屆學術(shù)研討會論文集[C];2011年

3 林海波;張桂紅;詹國英;廖明;任濤;羅開健;曹偉勝;徐成剛;辛朝安;;豬白細胞介素-6基因的非融合原核表達研究[A];第一屆中國養(yǎng)豬生產(chǎn)和疾病控制技術(shù)大會——2005中國畜牧獸醫(yī)學會學術(shù)年會論文集[C];2005年

4 隋桂琴;左玲;王桂云;;人堿性成纖維細胞生長因子的原核表達[A];中國眼底病論壇·全國眼底病專題學術(shù)研討會論文匯編[C];2008年

5 黃斯勇;梁英民;韓驊;李國輝;伍艷蘭;康志杰;何飛;張萍;徐恒;劉利;;人Detla-like4ext-93-217原核表達、純化及蛋白活性檢測[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

6 張紅;劉志國;屈伸;;人源受體相關(guān)蛋白的原核表達優(yōu)化及功能檢測[A];湖北省暨武漢生物化學與分子生物學學會第八屆會員代表大會和第十五次學術(shù)年會論文摘要匯編[C];2004年

7 袁志棟;王志亮;劉雨田;吳曉東;劉海生;;水貂朊蛋白前體基因的克隆與原核表達[A];中國畜牧獸醫(yī)學會畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學分會暨中國免疫學會獸醫(yī)免疫分會第六次研討會論文集[C];2005年

8 王士友;張耀洲;;一個新的家蠶基因的克隆、原核表達及純化[A];華東六省一市生物化學與分子生物學學會2006年學術(shù)交流會論文集[C];2006年

9 伍艷蘭;黃斯勇;牛曉麗;張麗;陳茹菲;何飛;張萍;梁英民;劉利;;人Delta-like4ext-93-217原核表達、純化及蛋白活性檢測[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

10 馬文濤;閆若潛;吳志明;劉光輝;盛敏;謝彩華;;豬白細胞介素-6的原核表達及其生物學活性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物傳染病學分會第四次豬病防控學術(shù)研討會論文集[C];2010年

相關(guān)博士學位論文 前8條

1 張曉鳴;人IL-16的原核表達與其功能的初步研究[D];中國科學院研究生院（上海生命科學研究院）;2000年

2 曹秀利;楊樹PtCDD基因的原核表達及酶活分析[D];南京林業(yè)大學;2008年

3 黃新河;小鼠TAp63γ的原核表達、純化、結(jié)構(gòu)及功能初步研究[D];四川大學;2007年

4 張大鵬;VP60蛋白的原核表達、抗體制備及VP60基因轉(zhuǎn)化的研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2012年

5 張少斌;豌豆肌動蛋白異型體（PEAc1）的原核表達及其藻熒光探針的研制[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2004年

6 尹國華;利用Red重組系統(tǒng)構(gòu)建dsRNA原核表達體系抗煙草花葉病毒的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2009年

7 韓凌霞;豬圓環(huán)病毒2型基因的原核表達與單克隆抗體的制備及感染性分子克隆的動物接種試驗[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2003年

8 于揚;重組人源GPx4及其模擬物的原核表達、結(jié)構(gòu)與功能的研究[D];吉林大學;2013年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 周鵬;結(jié)核分枝桿菌特異性蛋白的原核表達、純化及免疫原性分析[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

2 高小磊;六種結(jié)核分枝桿菌特異性抗原的原核表達及16 KD-38 KD和Ag85A血清學診斷效果的研究[D];蘭州大學;2015年

3 彭傳林;家蠅抗真菌肽MAF-1原核表達體系優(yōu)化與活性分析[D];貴陽醫(yī)學院;2015年

4 鐘樹懷;豬囊尾蚴膜聯(lián)蛋白的原核表達及其免疫反應性分析[D];貴陽醫(yī)學院;2015年

5 孫明潭;豬繁殖與呼吸綜合征病毒河北地方株ORF7基因的原核表達及ELISA方法的建立[D];河北農(nóng)業(yè)大學;2015年

6 張良斌;天祝白牦牛KAP家族基因克隆、原核表達及其在皮膚中的表達分析[D];西北民族大學;2015年

7 達小強;牦牛轉(zhuǎn)鐵蛋白基因克隆與原核表達[D];西北民族大學;2015年

8 高翠娥;飛蝗2個CYP450轉(zhuǎn)基因果蠅品系對殺蟲劑的敏感性及原核表達[D];山西大學;2015年

9 吳雨航;布氏桿菌病間接ELISA方法的建立及吉林省梅花鹿主要養(yǎng)殖地區(qū)鹿布病血清學調(diào)查[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2015年

10 姜旭;百合無癥病毒16kDα基因的克隆、原核表達及亞細胞定位[D];大連理工大學;2015年

，

本文編號：2297575