【摘要】：克隆轉(zhuǎn)錄因子SP1并構(gòu)建其真核表達(dá)載體;在雙熒光素酶基因檢測報(bào)告系統(tǒng)下觀察3種MAPK信號通路抑制劑調(diào)控SP1對不同長度的MEPE基因表達(dá)的調(diào)控作用,以分析轉(zhuǎn)錄因子SP1作用于MEPE基因的顯著區(qū)段,并利用實(shí)時(shí)定量RT-PCR法分析SP1調(diào)控MEPE基因的表達(dá)。根據(jù)雙熒光素酶基因檢測報(bào)告系統(tǒng)的研究表明在小鼠前成骨細(xì)胞中,SP1可以抑制MEPE基因的轉(zhuǎn)錄活性,在(-1 081~66)1 147 bp片段區(qū)域內(nèi)抑制作用較為顯著,SP1可通過抑制JNK途徑抑制MEPE基因的轉(zhuǎn)錄活性;實(shí)時(shí)定量RT-PCR法分析再次驗(yàn)證SP1抑制MEPE基因的表達(dá)水平。這表明轉(zhuǎn)錄因子SP1對MEPE基因表達(dá)具有顯著的調(diào)節(jié)作用,從而表明轉(zhuǎn)錄因子SP1在骨形成發(fā)育過程中起到重要的生物學(xué)意義。
[Abstract]:The transcription factor SP1 was cloned and its eukaryotic expression vector was constructed, and the regulation of SP1 on the expression of MEPE gene in different lengths was observed under the double luciferase gene detection report system. To analyze the effect of transcription factor SP1 on the significant region of MEPE gene, and to analyze the expression of MEPE gene regulated by SP1 by real-time quantitative RT-PCR. According to the double luciferase gene detection report system, SP1 can inhibit the transcriptional activity of MEPE gene in mouse preosteoblasts. In the region of (-1081 ~ (66) 1 147 bp fragment, the inhibitory effect of SP1 on the transcriptional activity of MEPE gene was significant, and SP1 could inhibit the transcriptional activity of MEPE gene by inhibiting the JNK pathway, and the real-time quantitative RT-PCR analysis demonstrated that SP1 inhibited the expression of MEPE gene again. This suggests that transcription factor SP1 plays a significant role in regulating the expression of MEPE gene, which indicates that transcription factor SP1 plays an important biological role in bone formation and development.
【作者單位】： 濰坊醫(yī)學(xué)院口腔醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81441107) 山東省自然科學(xué)基金(ZR2012HQ036) 山東省教育廳(J12LL51,J15-LK09) 濰坊醫(yī)學(xué)院教師公派教師國內(nèi)訪學(xué)項(xiàng)目共同資助
【分類號】：Q78

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本文編號：2275224