【摘要】：為篩選出草地早熟禾實時熒光定量中的最適內(nèi)參基因,利用實時熒光定量PCR技術(shù),分析檢測6個傳統(tǒng)內(nèi)參基因ACT、GAPDH、UBQ、EF-1α、18s rRNA和β-tublin在草地早熟禾不同組織器官、葉片不同發(fā)育期、非生物脅迫和不同激素誘導(dǎo)下mRNA的表達(dá)差異情況。利用geNorm、NormFinder和BestKeeper軟件綜合評價6個候選內(nèi)參基因的表達(dá)穩(wěn)定性。結(jié)果表明,在不同組織、葉片不同發(fā)育期、激素誘導(dǎo)和非生物脅迫下,候選內(nèi)參基因的表達(dá)穩(wěn)定性存在差異。GAPDH在草地早熟禾不同組織器官中表達(dá)最為穩(wěn)定;EF-1α在非生物脅迫下表達(dá)最為穩(wěn)定;不同激素下首選β-tublin;在葉片不同發(fā)育期ACT表達(dá)最為穩(wěn)定。綜上所述,通過篩選出不同條件下適宜的內(nèi)參基因不僅有助于提高草地早熟禾基因表達(dá)分析的準(zhǔn)確性,也為早熟禾屬植物其他內(nèi)參基因的開發(fā)提供了理論參考。
[Abstract]:In order to screen the optimal internal reference gene in the real-time fluorescence quantitative analysis of Kentucky bluegrass, six traditional internal reference genes, ACT,GAPDH,UBQ,EF-1 偽 ~ (18 s) rRNA and 尾 -tublin, were detected by real-time fluorescence quantitative PCR technique in different tissues and organs and different developmental stages of leaves of Kentucky bluegrass. The difference of mRNA expression under abiotic stress and different hormone induction. The expression stability of 6 candidate internal reference genes was evaluated by geNorm,NormFinder and BestKeeper software. The results showed that in different tissues, leaves at different developmental stages, hormone induction and abiotic stress, There were differences in the expression stability of candidate endogenous reference genes. The expression of EF-1 偽 was the most stable in different tissues and organs of Kentucky bluegrass. The expression of EF-1 偽 was the most stable under abiotic stress; 尾 -tublinin was the first choice under different hormones; and the ACT expression was the most stable in different development stages of leaves. To sum up, screening suitable internal reference genes under different conditions can not only improve the accuracy of gene expression analysis of Kentucky bluegrass, but also provide a theoretical reference for the development of other internal reference genes in POA plants.
【作者單位】： 北京林業(yè)大學(xué)林學(xué)院草坪研究所;
【基金】：國家自然基金項目(31302016) 深圳市科技計劃項目(JSGG20160229155434792)資助
【分類號】：S688.4

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本文編號：2241752