發(fā)布時(shí)間：2018-09-13 08:51

【摘要】：目的克隆茅蒼術(shù)Atractylodes lancea倍半萜類(lèi)成分生物合成關(guān)鍵酶法呢基焦磷酸合酶(FPPS)基因全長(zhǎng)并分析其表達(dá)規(guī)律。方法以茅蒼術(shù)總RNA為模板,運(yùn)用同源克隆法和RACE技術(shù)克隆茅蒼術(shù)FPPS基因(Al FPPS)的c DNA全長(zhǎng),并進(jìn)行生物信息學(xué)分析;用q RT-PCR和GC-MS分析不同生長(zhǎng)階段FPPS在茅蒼術(shù)根莖中的表達(dá)及倍半萜類(lèi)成分量變化,并分析二者的相關(guān)性。結(jié)果獲得Al FPPS基因全長(zhǎng)c DNA為1 320 bp(Gen Bank accession no.KX443242),含一個(gè)長(zhǎng)1 029 bp的開(kāi)放閱讀框,編碼342個(gè)氨基酸,包含5個(gè)保守功能域,其中2個(gè)富含天冬氨酸(DXXDD)。q RT-PCR及GC-MS結(jié)果顯示不同時(shí)期茅蒼術(shù)Al FPPS基因表達(dá)量與倍半萜類(lèi)成分量呈顯著正相關(guān)。結(jié)論首次克隆獲得Al FPPS基因的全長(zhǎng)c DNA,初步證明Al FPPS基因是茅蒼術(shù)倍半萜類(lèi)成分生物合成途徑中的重要調(diào)控位點(diǎn),為茅蒼術(shù)倍半萜類(lèi)成分生物合成途徑闡明與生物工程應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
[Abstract]:Objective to clone the full length of the (FPPS) gene of Atractylodes lancea sesquiterpene biosynthesis and analyze its expression pattern. Methods using total RNA of Atractylodes macrocephala as template, the length of c DNA of FPPS gene (Al FPPS) was cloned by homologous cloning method and RACE technique, and bioinformatics analysis was carried out. Q RT-PCR and GC-MS were used to analyze the expression of FPPS in Rhizome of Atractylodes macrocephala and the changes of sesquiterpene components in the rhizome of Atractylodes macrocephala, and the correlation between them was analyzed. Results the full-length c DNA of Al FPPS gene was 1 320 bp (Gen Bank accession no.KX443242), containing an open reading frame of 1 029 bp, encoding 342 amino acids and containing 5 conserved functional domains. Two of them were rich in aspartic acid (DXXDD). Q RT-PCR and GC-MS. The results showed that there was a significant positive correlation between Al FPPS gene expression and sesquiterpenoid components in different periods. Conclusion the full length c DNA, of Al FPPS gene was cloned for the first time. It is proved that Al FPPS gene is an important regulatory site in the biosynthesis pathway of sesquiterpenoid components of Atractylodes macrocephala. It provides a scientific basis for elucidating the biosynthesis pathway of sesquiterpenoids and the application of bioengineering in Rhizoma Atractylodes.
【作者單位】： 南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81573520) 江蘇省中藥優(yōu)勢(shì)學(xué)科II期建設(shè)(ysxk-2014) “六大人才高峰”高層次人才項(xiàng)目(2012-YY-009) 江蘇省“333高層次人才培養(yǎng)工程” 江蘇省中藥資源產(chǎn)業(yè)化過(guò)程協(xié)同創(chuàng)新中心資助項(xiàng)目
【分類(lèi)號(hào)】：S567.239

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本文編號(hào)：2240657