【摘要】：目的觀察中藥千金子對表達(dá)人G250基因小鼠renca細(xì)胞增殖的影響。方法利用DNA重組技術(shù)將成功擴(kuò)增的人G250基因編碼區(qū)序列定向插入到pRNAT-U6.1/Neo質(zhì)粒真核表達(dá)載體中,得到重組質(zhì)粒pRNAT-U6.1/Neo-G250,將該質(zhì)粒轉(zhuǎn)染renca小鼠細(xì)胞,經(jīng)G418篩選獲得抗性單克隆,擴(kuò)大培養(yǎng)后經(jīng)Western印跡鑒定人G250基因的表達(dá)。將該細(xì)胞在不同濃度含千金子二萜醇(111μg/ml、333μg/ml、1 000μg/ml、3 000μg/ml、9 000μg/ml)的培養(yǎng)基中培養(yǎng),MTT法觀察千金子二萜醇對表達(dá)人G250基因小鼠renca細(xì)胞體外增殖情況的影響。結(jié)果與空白對照組相比,24 h后實驗組細(xì)胞增殖速度減慢,并隨濃度增加增殖速度減慢越明顯,空白組與3 000μg/ml及9 000μg/ml濃度組比較差異有明顯統(tǒng)計學(xué)(P=0.006,P=0.000)。結(jié)論中藥千金子使表達(dá)人G250基因小鼠renca細(xì)胞增殖能力降低,renca細(xì)胞體外生長被顯著抑制。
[Abstract]:Objective to observe the effect of Qianjinzi on the proliferation of renca cells expressing human G250 gene in mice. Methods the successfully amplified coding region of human G250 gene was inserted into the eukaryotic expression vector of pRNAT-U6.1/Neo plasmid by DNA recombination technique. The recombinant plasmid pRNAT-U6.1/Neo-G250, was transfected into renca mouse cells, and the resistant monoclonal was obtained by G418 screening. The expression of human G250 gene was identified by Western blotting after expanded culture. The cells were cultured in different concentrations of 1 000 渭 g / ml 1 000 渭 g/ml to observe the effect of 1 000 渭 g / ml 1 000 渭 g/ml on the proliferation of renca cells expressing human G250 gene in vitro. Results compared with the control group, the proliferation rate of the experimental group decreased after 24 h, and decreased more obviously with the increase of the concentration. There was a significant difference between the blank group and the 3 000 渭 g/ml and 9 000 渭 g/ml groups (P0. 006, P0. 000). Conclusion Qianjinzi can significantly inhibit the proliferation of renca cells expressing human G250 gene in vitro.
【作者單位】： 河南省中醫(yī)院河南中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院泌尿外科;南方醫(yī)科大學(xué)附屬南方醫(yī)院泌尿外科;蘭州軍區(qū)總醫(yī)院泌尿外科;
【基金】：河南省科技攻關(guān)重點項目(142102310287)
【分類號】：R285

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