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龜板提取物調(diào)控Otx2基因促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞向多巴胺神經(jīng)元分化的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-08-27 14:34
【摘要】:目的探討龜板提取物是否能夠通過調(diào)控同源盒基因Otx2(orthodenticle homeobox 2)來促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells,NSCs)向多巴胺神經(jīng)元的分化。方法分離培養(yǎng)孕14 d左右的SD胎鼠NSCs 7 d,隨機(jī)設(shè)空白對(duì)照組和30μg·m L~(-1)的龜板有效成分PTE(2B)組、龜板提取物十八酸乙酯(S6)組、4-甾酮(S9)組,誘導(dǎo)分化5~7 d,用免疫熒光法檢測(cè)多巴胺酪氨酸羥化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)陽(yáng)性神經(jīng)元和Otx2的表達(dá),用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)Otx2的m RNA表達(dá),蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)檢測(cè)Otx2的蛋白表達(dá)。結(jié)果與空白對(duì)照組比較,2B組、S6組和S9組Otx2和TH的熒光表達(dá)均升高(P0.05),S6組Otx2的m RNA表達(dá)升高(P0.05),S6組和S9組Otx2的蛋白表達(dá)升高(P0.05)。結(jié)論龜板提取物可能通過調(diào)控Otx2基因促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞向多巴胺神經(jīng)元分化。
[Abstract]:Aim to investigate whether the extract of tortoise shell can promote the differentiation of neural stem cells (neural stem cells,NSCs) into dopamine neurons by regulating homology box gene Otx2 (orthodenticle homeobox 2. Methods SD fetal mice were isolated and cultured on the 14th day of gestation for 7 days. The mice were randomly divided into control group and 30 渭 g mL ~ (-1) PTE (2B) group, and ethyl octadecanoate (S6) group (S _ 6) group, and 4-sterosterone group (S _ 9) group. The expression of dopamine tyrosine hydroxylase (Tyrosine hydroxylase,TH) -positive neurons and Otx2 was detected by immunofluorescence assay, m RNA expression of Otx2 was detected by real-time fluorescence quantitative PCR method, and the expression of Otx2 protein was detected by Western blot (Western Blot). Results compared with the control group, the fluorescence expression of Otx2 and TH in S6 group and S9 group were increased (P0.05). The m RNA expression of Otx2 in S6 group was higher than that in S6 group (P0.05), and the protein expression of Otx2 in S6 group and S9 group (P0.05). Conclusion the extract of tortoise shell may promote the differentiation of neural stem cells into dopamine neurons by regulating the Otx2 gene.
【作者單位】: 廣州中醫(yī)藥大學(xué)解剖學(xué)教研室;廣州中醫(yī)藥大學(xué)組織與胚胎學(xué)教研室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81303116) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2016A020226017)
【分類號(hào)】:R285

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本文編號(hào):2207573

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