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餐飲從業(yè)人員腸道菌群喹諾酮及頭孢類耐藥基因的攜帶與轉(zhuǎn)移研究

發(fā)布時(shí)間:2018-08-19 17:14
【摘要】:目的:分析餐飲行業(yè)從業(yè)人員腸道中頭孢類和喹諾酮類抗生素耐藥菌的攜帶狀況,并分析耐藥基因的質(zhì)粒攜帶的狀況及流行情況。方法:2015年5月至2015年8月間自江西南昌市疾控中心餐飲行業(yè)從業(yè)人員健康體檢門診,選擇從事廚師、洗菜工等餐飲行業(yè)體檢時(shí)無腹瀉人群,收集肛拭樣本(1份/人)。調(diào)查時(shí)詢問近3個(gè)月抗生素使用史,未使用抗生素者納入研究群體。采集的體檢肛拭樣本分別用含頭孢曲松鈉(4μg/ml)和環(huán)丙沙星(4μg/ml)的營養(yǎng)瓊脂篩選能夠在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)條件下生長的耐藥菌。隨機(jī)挑選培養(yǎng)的頭孢曲松鈉耐藥菌和環(huán)丙沙星耐藥菌,分別檢測CTX-M型超廣譜p內(nèi)酰胺酶攜帶情況和喹諾酮質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥(plasmid-mediated quinolone resistance,PMQR)的相關(guān)基因攜帶和染色體突變的情況。結(jié)果:納入符合條件的頭孢曲松鈉耐藥檢測標(biāo)本共有140人份的肛拭子標(biāo)本。所有140份標(biāo)本在頭孢曲松鈉抗性平板上均有菌落生長。這些肛拭樣本中有125份樣本分離到頭孢曲松鈉耐藥的革蘭陰性菌,攜帶率為89.3%(125/140)。分離得到的125株耐藥菌株中CTX-M的檢出率為97.6%;五組CTX中檢出率最高的為CTX-M-9組56.0%,其次為CTX-M-1組38.4%,有4株菌同時(shí)檢測到CTX-M-9組和CTX-M-1組基因。通過測序比對,共檢測到9種CTX基因亞型,檢出率最高的是CTX-M-14和CTX-M-15.隨機(jī)挑選了10株含CTX-M-14型的菌株做接合轉(zhuǎn)移,6株菌發(fā)生了接合,接合效率分別在1.4×10-5到7.7×10-3之間。納入環(huán)丙沙星耐藥檢測的共159份樣品,其中127份樣品分離到革蘭陰性菌,分離率79.9%(127/159),127株革蘭陰性菌17株檢測到qnr基因攜帶陽性,檢出率10.7%,其中qnrSl型檢出有10株,qnAl型有1株,qnrB型有6株(其中qnrB2有2株、qnrB6有4株),20株菌經(jīng)測序確定攜帶aac(6')-Ib-cr基因,檢出率為15.7%(20/127)。112株環(huán)丙沙星耐藥的大腸埃希菌檢測到gyrA基因的Ser83→eu替代、Asp87→Asn和Asp87→Tyr 3種突變類型;對gyrB檢測到兩種突變類型,分別是Ser343→Phe和Ser492→Asn;parC共檢測到7種突變類型,分別為Ala56→Thr、Ser80→Ile、GLU84→Val、 Glu84→Gly、Glu84→Lys、Ala108→Thr、和Vall44→Gly;parE檢測到2種突變類型,為Leu445→His和Ser458→Ala。結(jié)論:餐飲行業(yè)從業(yè)人員腸道內(nèi)細(xì)菌普遍存在對p-內(nèi)酰胺類和喹諾酮類藥物有抗性的腸道細(xì)菌,并且攜帶多種序列型的抗性基因以及質(zhì)粒。這類人群在體檢時(shí)并沒有腹瀉,其多接觸食品,一方面可能從食品原材料中獲得耐藥菌,另一方面也可能將耐藥菌傳播到其他人。另外,檢測到的攜帶耐藥質(zhì)粒的腸桿菌,當(dāng)腸道有致病細(xì)菌入侵時(shí),這些攜帶耐藥質(zhì)粒的正常定居的腸桿菌可能會在腸道內(nèi)將抗性傳遞給致病菌,造成致病菌產(chǎn)生耐藥性。我們對餐飲從業(yè)人群的耐藥腸桿菌監(jiān)測,顯示了人群非腹瀉時(shí)依然攜帶較多的耐藥腸桿菌,鑒于其工作特點(diǎn),獲得并導(dǎo)致耐藥菌糞-口途徑傳播的風(fēng)險(xiǎn)性很高,提示當(dāng)前食品衛(wèi)生管理、以及阻斷細(xì)菌耐藥性傳遞的策略中應(yīng)關(guān)注餐飲服務(wù)人群的耐藥菌攜帶和可能的播散。
[Abstract]:Objective: To analyze the carrying status of cephalosporins and quinolones antibiotics resistant bacteria in the intestine of employees in catering industry, and to analyze the plasmid carrying status and epidemic situation of drug resistant genes. Anal swabbing samples (1/person) were collected from non-diarrhea patients in the catering industry such as vegetable workers. Antibiotic use history in the past three months was questioned and non-antibiotic users were included in the study group. Anal swabbing samples were screened by nutritional agar containing ceftriaxone sodium (4ug/ml) and ciprofloxacin (4ug/ml). Drug-resistant bacteria were randomly selected and cultured to detect CTX-M type extended-spectrum p-lactamases and plasmid-mediated quinolone resistance (PMQR) related gene carrying and chromosome mutation. A total of 140 anal swabs were obtained from eligible ceftriaxone-resistant samples. Colonial growth was observed in all 140 samples on ceftriaxone-resistant plates. Among these swabs, 125 were found to be Gram-negative bacteria resistant to ceftriaxone, with a carrier rate of 89.3% (125/140). The detection rate of CTX-M was 97.6%. The highest detection rate of CTX was 56.0% in CTX-M-9 group, followed by 38.4% in CTX-M-1 group. CTX-M-9 group and CTX-M-1 group genes were simultaneously detected in 4 strains. Nine CTX genotypes were detected by sequencing comparison. The highest detection rate was CTX-M-14 and CTX-M-15. Ten strains containing CTX-M-14 were randomly selected. A total of 159 samples were tested for ciprofloxacin resistance, of which 127 samples were isolated from gram-negative bacteria, the isolation rate was 79.9% (127/159), and 17 strains of 127 Gram-negative bacteria were positive for qnr gene, the detection rate was 10.7%. Among 10 strains, 1 strain of qnAl type, 6 strains of qnrB type (including 2 strains of qnrB2 and 4 strains of qnrB6), 20 strains were identified to carry the AAC (6') - Ib-cr gene by sequencing, the detection rate was 15.7% (20/127). 112 ciprofloxacin-resistant Escherichia coli strains detected gyrA gene Ser83 substitution, Asp87 Asn and A87 Tyr mutations; and two types of gyrB were detected. Seven mutation types were detected in parC, namely Ala56 Thr, Ser80 Ile, GLU84 Val, Glu84 Lys, Ala108 Thr, and Vall44 Gly. Conclusion: Bacteria in the intestinal tract of catering workers are prevalent. Intestinal bacteria that are resistant to p-lactams and quinolones and carry a variety of sequence-specific resistance genes and plasmids. These people do not have diarrhea at the time of physical examination. They are exposed to foods that may acquire drug-resistant bacteria from food raw materials on the one hand, and may spread the drug-resistant bacteria to other people on the other. In addition, detection has been made. When Enterobacteriaceae carrying drug-resistant plasmids invade the intestine, these normally colonized Enterobacteriaceae carrying drug-resistant plasmids may transmit resistance to pathogens in the intestine, resulting in resistance to pathogens. Our surveillance of drug-resistant Enterobacteriaceae in catering professionals shows that the population is still carrying more when non-diarrhea occurs. Drug-resistant Enterobacter spp. is highly risky to acquire and lead to fecal-oral transmission of drug-resistant bacteria in view of its characteristics, suggesting that current food hygiene management, as well as strategies to block the transmission of drug resistance, should pay attention to drug-resistant bacteria carrying and possible dissemination in catering services.
【學(xué)位授予單位】:中國疾病預(yù)防控制中心
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R155.7

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本文編號:2192302

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