【摘要】：目的研究抑癌基因DBC2在乳腺癌的表達(dá)與甲基化狀態(tài)之間的聯(lián)系,及其對(duì)乳腺癌細(xì)胞系T-47D細(xì)胞增殖和凋亡的影響。方法體外培養(yǎng)3種乳腺癌細(xì)胞株(T-47D、MCF-7、MDA-MB-23)和正常乳腺細(xì)胞株(MCF-10),檢測4種細(xì)胞中DBC2基因的表達(dá)及其啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀況;5-Aza-Cd R處理T-47D細(xì)胞后,檢測5-Aza-Cd R對(duì)T-47D細(xì)胞DBC2啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)和其表達(dá)的影響,并通過MTT和Annexin-V/PI雙染法分別檢測處理前后T-47D細(xì)胞增殖和凋亡的變化。結(jié)果 DBC2在T-47D細(xì)胞表達(dá)缺失,乳腺癌細(xì)胞DBC2啟動(dòng)子發(fā)生甲基化;5-Aza-Cd R成功逆轉(zhuǎn)了T-47D細(xì)胞DBC2的甲基化狀態(tài),并使DBC2 m RNA表達(dá)恢復(fù)(P0.05);不同濃度的5-Aza-Cd R處理T-47D細(xì)胞后,T-47D細(xì)胞增殖下降(P0.05),凋亡率增加(P0.05)。結(jié)論 DBC2啟動(dòng)子甲基化導(dǎo)致T-47D細(xì)胞DBC2表達(dá)沉默,激活DBC2表達(dá)可抑制T-47D細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the relationship between the expression of tumor suppressor gene DBC2 and methylation status in breast cancer and its effect on the proliferation and apoptosis of breast cancer cell line T-47D. Methods three kinds of breast cancer cell lines (T-47D- MCF-7MDA-MB-23) and normal mammary gland cell line (MCF-10) were cultured in vitro. The expression of DBC2 gene and the methylation status of its promoter region were detected after T-47D cells were treated with 5-Aza-CD R. The effects of 5-Aza-Cd R on the methylation status and expression of DBC2 promoter in T-47D cells were detected. The proliferation and apoptosis of T-47D cells were detected by MTT and Annexin-V/PI double staining. Results the expression of DBC2 was absent in T-47D cells, and the methylation of DBC2 promoter in breast cancer cells was successfully reversed by 5-Aza-CD R, which reversed the methylation of DBC2 in T-47D cells. The expression of DBC2 m RNA was restored (P0.05), and the proliferation of T-47D cells decreased (P0.05) and the apoptosis rate increased (P0.05) after treated with different concentrations of 5-Aza-Cd R (P0.05). Conclusion methylation of DBC2 promoter induces silencing of DBC2 expression in T-47D cells, and activation of DBC2 expression can inhibit the proliferation of T-47D cells and promote their apoptosis.
【作者單位】： 河南省中醫(yī)院乳腺科;
【分類號(hào)】：R737.9

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本文編號(hào)：2172196