【摘要】：目的探討Noxa基因與人肝癌的臨床病理關(guān)系及對(duì)人肝癌Hep G2細(xì)胞的增殖抑制和促凋亡作用。方法采用免疫組化法檢測(cè)100例肝癌組織及癌旁組織中Noxa蛋白的表達(dá),結(jié)合其臨床病理參數(shù)和隨訪資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。同時(shí)利用脂質(zhì)體將真核表達(dá)載體p IRES2-EGFP-Noxa瞬時(shí)轉(zhuǎn)染至人肝癌Hep G2細(xì)胞,RT-PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染后Noxa基因m RNA的表達(dá),Western blot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后Noxa蛋白表達(dá),MTT比色法測(cè)定細(xì)胞增殖情況,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示肝癌組織中Noxa陽(yáng)性率為50%,明顯低于癌旁正常肝組織(78%),兩組相比差異有顯著性(P0.05)。Noxa蛋白表達(dá)與肝癌分化程度及TNM分期有關(guān)(P0.05)。Hep G2細(xì)胞中成功表達(dá)Noxa基因,轉(zhuǎn)染后m RNA及蛋白表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)持續(xù)上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與其它各組相比,轉(zhuǎn)染24、48、72 h后,其吸光度值逐漸升高(P0.05),流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,其24 h、48 h、72 h凋亡率分別為(15.5±0.9)%、(24.6±0.8)%和(35.4±0.7)%,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 Noxa表達(dá)與肝癌分化程度及TNM分期密切相關(guān),其高表達(dá)可抑制人肝癌細(xì)胞Hep G2的增殖并促進(jìn)其凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the clinicopathological relationship between Noxa gene and human hepatocellular carcinoma (HCC), and to investigate the inhibitory effect of Noxa gene on the proliferation and apoptosis of Hep G2 cells. Methods Immunohistochemical method was used to detect the expression of Noxa protein in 100 cases of HCC and its adjacent tissues. The clinicopathological parameters and follow-up data were analyzed statistically. At the same time, the eukaryotic expression vector p IRES2-EGFP-Noxa was transiently transfected into human hepatoma Hep G2 cells by liposome. The expression of m RNA of Noxa gene was detected by RT-PCR. The expression of Noxa protein after transfection was detected by Western blot. Apoptosis was detected by flow cytometry. Results the positive rate of Noxa in HCC tissues was 50%, which was significantly lower than that in adjacent normal liver tissues (78%). There was a significant difference between the two groups (P0.05). Noxa protein expression was related to the differentiation of HCC and TNM staging (P0.05). Hep G2 cells successfully expressed Noxa gene. After transfection, the expression of m RNA and protein continued to increase with the extension of time, the difference was statistically significant (P 0.05). Compared with other groups, the absorbance increased gradually (P0.05) after transfection for 24 h (P0.05), and the apoptotic rate was (15.5 鹵0.9), (24.6 鹵0.8)% and (35.4 鹵0.7) at 24 h, (24.6 鹵0.8)% and (35.4 鹵0.7), respectively. There was a significant difference between the two groups (P0.05), and the results of flow cytometry showed that the apoptosis rate was (15.5 鹵0.9), (24.6 鹵0.8)% and (35.4 鹵0.7), respectively. Conclusion the expression of Noxa is closely related to the differentiation degree and TNM stage of HCC, and its high expression can inhibit the proliferation and promote the apoptosis of human hepatoma cell line Hep G2.
【作者單位】： 蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科;
【分類號(hào)】：R735.7

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本文編號(hào)：2145056