發(fā)布時間：2018-07-22 19:40

【摘要】：【目的】克隆錦鯉Hepcidin全長c DNA序列(k-hepc),并獲得此基因在魚體內(nèi)的表達模式�！痉椒ā坷肦T-PCR和RACE PCR的方法,從錦鯉肝臟中克隆錦鯉Hepcidin的全長c DNA,進行序列測定和分析;錦鯉經(jīng)肌肉注射維氏氣單胞菌0、4、8、12、24和48 h后,分別取其肝、脾、腎、腸、腦、心、肌肉和鰓組織,采用實時熒光定量PCR的方法,以β-actin為內(nèi)參基因,檢測k-hepc基因的表達量�！窘Y(jié)果】錦鯉抗菌肽(Gen Bank登錄號KC795559)全長755 bp,編碼序列276 bp,編碼91個氨基酸,包括信號肽、原肽和成熟肽,成熟肽C端含有8個半胱氨酸,可形成4個分子內(nèi)二硫鍵。與已報道的普通鯉魚Hepcidin氨基酸序列的一致性為93%,與其他魚類Hepcidin氨基酸序列的一致性為29%-93%。在本研究所檢測的正常錦鯉的組織中,k-hepc均有表達,其中在肝組織中表達量最高,鰓組織中表達量最低。經(jīng)維氏氣單胞菌感染后,k-hepc在肝和心組織中的表達量明顯增加,在其余組織中變化不顯著�！窘Y(jié)論】k-hepc編碼的蛋白是Hepcidin家族的成員之一。錦鯉Hepcidin的表達主要受內(nèi)在調(diào)節(jié)因素影響。
[Abstract]:[objective] to clone the full-length c-DNA sequence (k-hepc) of koi carp (Cyprinus Carpio) and obtain its expression pattern in fish. [methods] the full-length c-DNA of Koi carp Hepcidin was cloned from the liver of koi carp by RT-PCR and race PCR, and the sequence was sequenced and analyzed. The liver, spleen, kidney, intestine, brain, heart, muscle and Gill tissues of koi were injected intramuscularly with Aeromonas Vickers 04 (Amonomonas Vickers) strain 04, 1212, 24 and 48 h later, and 尾 -actin was used as internal reference gene by real-time fluorescence quantitative PCR (PCR), and 尾 -actin (尾 -actin) was used as internal reference gene. [results] the total length of antimicrobial peptide of koi (GenBank accession number KC795559) was 755 BP, encoding 276bp. encoding 91 amino acids, including signal peptide, propeptide and mature peptide, and the C-terminal of mature peptide contained 8 cysteine. Four intramolecular disulfide bonds can be formed. The consistency of the amino acid sequence with the reported common carp was 933 and that with the other fish was 29- 93.The consistency of the amino acid sequence with the reported common carp was 933. In this study, the expression of khepc was found in the normal koi tissues, the highest in the liver and the lowest in the Gill. After infection with Aeromonas Vickers, the expression of k-hepc in liver and heart was significantly increased, but not in other tissues. [conclusion] the protein encoded by k-hepc is one of the members of the hepin family. The expression of koi hepcidin was mainly affected by internal regulatory factors.
【作者單位】： 北京市水產(chǎn)科學(xué)研究所漁業(yè)生物技術(shù)北京市重點實驗室;中國水產(chǎn)科學(xué)研究院生物技術(shù)研究中心;
【基金】：The Ornamental Fish Innovation Consortium of Beijng(No.BAIC03-2017) Natural Science Foundation of Beijng(No.6152006)~~
【分類號】：S917.4

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