發(fā)布時(shí)間：2018-07-21 15:41

【摘要】：果實(shí)的成熟和衰老是個(gè)復(fù)雜的生物學(xué)過(guò)程,一般認(rèn)為活性氧(ROS)在其中起著重要作用。本研究采用cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)(RACE)和RT-PCR相結(jié)合的方法,從白肉枇杷成熟期果實(shí)中成功克隆到一個(gè)編碼抗壞血酸氧化酶(AO)的基因,命名為EjAO。該基因全長(zhǎng)2 174 bp,包含了長(zhǎng)度為1 605 bp的開(kāi)放閱讀框。該閱讀框編碼的氨基酸數(shù)目為534個(gè),所形成的蛋白質(zhì)預(yù)測(cè)分子量為59.39 kD。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示EjAO在根和果實(shí)中高豐度表達(dá),并且在白肉枇杷成熟期果實(shí)中的表達(dá)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于紅肉枇杷。核苷酸多態(tài)性分析顯示EjAO基因在紅肉枇杷和白肉枇杷共有五處多態(tài)性位點(diǎn),其中T719C和A730C均導(dǎo)致氨基酸發(fā)生改變,推測(cè)可能對(duì)EjAO的酶學(xué)活性產(chǎn)生影響。EjAO的克隆和多態(tài)性位點(diǎn)的鑒定為闡明枇杷果實(shí)成熟與衰老機(jī)制及枇杷遺傳改良育種提供一定的理論依據(jù)。
[Abstract]:Fruit maturation and senescence is a complex biological process in which reactive oxygen species (Ros) play an important role. In this study, a gene encoding ascorbic acid oxidase (AO) was successfully cloned from the mature fruit of loquat by rapid amplification of cDNA terminal (race) and RT-PCR, named EjAO. The gene is 2 174 BP in length and contains an open reading frame of 1 605 BP in length. The number of amino acids encoded by the reading frame is 534, and the predicted molecular weight of the protein is 59.39 KD. The results of real-time fluorescence quantitative PCR showed that EjAO was highly abundant in root and fruit, and the expression level in white flesh loquat fruit was much higher than that in red loquat fruit. Nucleotide polymorphism analysis showed that EjAO gene had five polymorphic loci in red loquat and white loquat, among which T719C and A730C caused amino acid changes. It is speculated that the enzyme activity of EjAO may be affected. The cloning and polymorphic site identification of EjAO may provide a theoretical basis for elucidating the mechanism of mature and senescence of loquat fruit and for genetic improvement and breeding of loquat.
【作者單位】： 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院;四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所農(nóng)業(yè)部西南地區(qū)園藝作物生物學(xué)與種質(zhì)創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：四川省財(cái)政廳創(chuàng)新能力提升工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室專項(xiàng)(2013JCYJ-004);四川省財(cái)政廳現(xiàn)代農(nóng)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新與示范專項(xiàng)資金項(xiàng)目(2014CXSF-015) 農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室補(bǔ)助項(xiàng)目(2015JSCX-036)共同資助
【分類(lèi)號(hào)】：Q943.2;S667.3

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2135990