發(fā)布時(shí)間：2018-07-17 05:23

【摘要】：目的觀察內(nèi)源性轉(zhuǎn)錄因子增強(qiáng)子結(jié)合蛋白-4(AP-4)沉默對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞凋亡的影響,并探討其可能的作用機(jī)制。方法將人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞(HEC-1-A和RL95-2)分為NC組、si#1組、si#2組,si#1組轉(zhuǎn)染siTFAP4片段1,si#2組轉(zhuǎn)染si-TFAP4片段2,NC組轉(zhuǎn)染對(duì)照siRNA。采用Hoechest 33258染色觀察凋亡核形態(tài),采用Annexin V-FITC/PI染色流式細(xì)胞術(shù)測(cè)算細(xì)胞凋亡率,采用real-time PCR技術(shù)檢測(cè)存活素(Survivin)mRNA表達(dá),采用生物信息學(xué)分析預(yù)測(cè)Survivin編碼基因BIRC5的啟動(dòng)子區(qū)域內(nèi)是否存在AP-4的結(jié)合位點(diǎn),采用染色體免疫共沉淀技術(shù)驗(yàn)證AP-4是否結(jié)合到BIRC5的啟動(dòng)子區(qū)域,采用雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)BIRC5的啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄激活情況。結(jié)果在HEC-1-A、RL95-2細(xì)胞中,與NC組相比,si#1組、si#2組凋亡核型細(xì)胞數(shù)均增加,細(xì)胞凋亡率均增加,Survivin mRNA相對(duì)表達(dá)量均減少(P均0.05)。BIRC5的啟動(dòng)子區(qū)域內(nèi)存在一個(gè)高置信度的AP-4結(jié)合位點(diǎn),沉默HEC-1-A、RL95-2細(xì)胞內(nèi)源性AP-4后能降低AP-4對(duì)BIRC5啟動(dòng)子區(qū)域的結(jié)合并抑制其轉(zhuǎn)錄激活狀態(tài)。結(jié)論沉默內(nèi)源性AP-4能誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞凋亡,其機(jī)制可能為降低了AP-4對(duì)Survivin的轉(zhuǎn)錄激活,從而誘導(dǎo)了腫瘤細(xì)胞的凋亡。
[Abstract]:Objective To investigate the effect of endogenous transcription factor enhancer binding protein - 4 ( AP - 4 ) silencing on apoptosis of endometrial carcinoma cells .
【作者單位】： 中山市小欖人民醫(yī)院;
【基金】：廣東省中山市科技局基金資助項(xiàng)目(2015B1022)
【分類號(hào)】：R737.33

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本文編號(hào)：2129202