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利用酶聯(lián)免疫反應鑒定蕪菁SP11基因甲基化率的新方法

發(fā)布時間:2018-07-17 00:00
【摘要】:DNA甲基化是調控基因表達的一個重要方式,是表觀遺傳學研究的重點內容。目前測定某一基因DNA甲基化程度主要是先通過重亞硫酸鹽轉化,PCR擴增,再通過克隆、測序,檢測PCR產物中胞嘧啶(C)轉化為胸腺嘧啶(T)的比例;谶@種原理,建立了酶聯(lián)免疫反應檢測PCR產物中胞嘧啶轉化為胸腺嘧啶的比例,計算出DNA甲基化率的新方法,并成功利用該方法測定了蕪青(Brassica rapa L.ssp.rapiferu Metzg)純合子和雜合子植株中隱性SP11基因啟動子區(qū)域DNA甲基化程度。與原有克隆測序方法相比,該方法更加經濟、省時。
[Abstract]:DNA methylation is an important way to regulate gene expression. At present, the degree of DNA methylation of a certain gene is mainly determined by PCR amplification by heavy sulfite transformation, then by cloning and sequencing, the ratio of cytosine (C) to thymine (T) in PCR products is determined. Based on this principle, a new method for detecting the ratio of cytosine to thymidine in PCR products and calculating DNA methylation rate was established by using enzyme linked immunosorbent assay (Elisa). The methylation degree of recessive SP11 promoter region in homozygous and heterozygous plants of Brassica rapa L.ssp. rapiferu Metzg was determined successfully by this method. Compared with the original clone sequencing method, this method is more economical and time saving.
【作者單位】: 揚州大學園藝與植物保護學院;
【基金】:國家自然科學基金項目(31401856) 江蘇省自然科學基金項目(BK20140482)
【分類號】:Q943.2

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