紅花生育酚環(huán)化酶基因的克隆及表達(dá)分析
本文選題:紅花 + 生育酚環(huán)化酶 ; 參考:《中國中藥雜志》2016年20期
【摘要】:生育酚環(huán)化酶(tocopherol cyclase,TC)是植物Vit E生物合成途徑的關(guān)鍵酶之一。該研究根據(jù)紅花轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),利用RT-PCR(reverse transcription-PCR)方法從藥用植物紅花種子中克隆得到生育酚環(huán)化酶基因序列,命名為Ct TC,對其進(jìn)行生物信息學(xué)分析,結(jié)果表明該基因開放閱讀框(ORF)為1 524 bp,編碼507個(gè)氨基酸,相對分子質(zhì)量為62.9 k Da,等電點(diǎn)(theoretical p I)為5.01?缒そY(jié)構(gòu)分析表明TC存在跨膜結(jié)構(gòu)。蛋白糖基化位點(diǎn)分析表明TC蛋白含有1個(gè)絲氨酸糖基化位點(diǎn)以及1個(gè)蘇氨酸糖基化位點(diǎn)。亞細(xì)胞定位表明其定位于葉綠體中。利用熒光定量PCR檢測紅花不同發(fā)育時(shí)期種子以及干旱脅迫不同時(shí)間的紅花葉片中TC基因的表達(dá)量,結(jié)果表明TC基因在紅花的開花后50 d的種子中表達(dá)量最高,干旱脅迫6 d時(shí)TC基因的表達(dá)量達(dá)到最高值,隨后下降,為TC基因在紅花Vit E合成以及抵抗逆境脅迫中的功能研究奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:Tocopherol cyclase (TC) is one of the key enzymes in plant VitE biosynthesis pathway. Based on the transcriptome data of safflower, the gene sequence of tocopherol cyclase was cloned from the seeds of safflower by reverse transcription-PCR. The results showed that the open reading frame (ORF) was 1 524 BP, encoding 507 amino acids, the relative molecular weight was 62.9 K Daand the isoelectric point (theoretical p I) was 5.01. The analysis of transmembrane structure shows that TC has transmembrane structure. The results of glycosylation site analysis showed that TC protein contained one serine glycosylation site and one threonine glycosylation site. Subcellular localization indicated that it was located in chloroplasts. Fluorescence quantitative PCR was used to detect the expression of TC gene in the seeds of different development stages of safflower and the leaves of safflower under different drought stress. The results showed that the expression of TC gene was the highest in the seeds 50 days after flowering of safflower. The expression of TC gene reached the highest level at the 6th day of drought stress, and then decreased, which laid a foundation for the study of the function of TC gene in the synthesis of vit E and resistance to stress in safflower.
【作者單位】: 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;東北師范大學(xué)附屬實(shí)驗(yàn)中學(xué)凈月實(shí)驗(yàn)學(xué)校;
【基金】:國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863)項(xiàng)目(2011AA100606) 國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31201237) 國家級大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項(xiàng)目(201610193046,201410193045) 吉林省教育廳“十三五”科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目重點(diǎn)項(xiàng)目(吉教科合字[2016]179號(hào)) 吉林省科技廳中青年領(lǐng)軍人才及優(yōu)秀創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(20111815)
【分類號(hào)】:S567.2
【相似文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):2115152
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