焦磷酸測(cè)序分析表皮生長(zhǎng)因子受體21號(hào)外顯子基因突變方法的建立
本文選題:焦磷酸測(cè)序 + EGFR; 參考:《現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)》2017年10期
【摘要】:目的建立表皮生長(zhǎng)因子受體(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)21號(hào)外顯子基因突變的焦磷酸測(cè)序方法。方法用純野生和純突變的EGFR21質(zhì)粒DNA按比例配制7份不同突變比例的DNA樣本和1份正常人血液樣本,對(duì)焦磷酸測(cè)序技術(shù)檢測(cè)EGFR21基因突變方法進(jìn)行驗(yàn)證,制備175例非小細(xì)胞肺癌標(biāo)本g DNA,應(yīng)用Qigene Pyro Mark Q24焦磷酸測(cè)序儀進(jìn)行EGFR21基因的焦磷酸測(cè)序。結(jié)果建立了可同時(shí)檢測(cè)EGFR基因21號(hào)外顯子L858R和L861Q突變的焦磷酸測(cè)序方法,175例非小細(xì)胞肺癌標(biāo)本中共檢測(cè)出EGFR21突變型樣本29例,總突變率為16.57%(29/175),其中L858R突變占14.29%(25/175),L861Q突變占2.28%(4/175)。結(jié)論 EGFR21基因突變的焦磷酸測(cè)序新方法具有快速、簡(jiǎn)便、靈敏度和準(zhǔn)確度高的優(yōu)點(diǎn),特別適合于科研和臨床批量檢測(cè)的需要。
[Abstract]:Objective to establish a pyrosequencing method for exon 21 mutation of epidermal growth factor receptor (EGFR). Methods Seven samples of EGFR21 plasmid DNA with different mutation proportions and one normal blood sample were prepared with pure wild and pure mutated EGFR21 plasmid DNA. The detection of EGFR21 gene mutation by pyrosequencing was performed. The EGFR21 gene was sequenced by Qigene Pyro Mark Q24 pyrosequencing apparatus in 175 specimens of non-small cell lung cancer (NSCLC). Results the pyrosequencing method for simultaneous detection of L858R and L861Q mutations in exon 21 of EGFR gene was established. A total of 29 samples of EGFR21 mutation type were detected in 175 non-small cell lung cancer samples. The total mutation rate was 16.57% (29 / 175), of which L858R mutation accounted for 14.29% (25 / 175) and L861Q mutation accounted for 2.28% (4 / 175). Conclusion the new pyrosequencing method for EGFR21 gene mutation has the advantages of fast, simple, high sensitivity and high accuracy. It is especially suitable for scientific research and clinical batch detection.
【作者單位】: 長(zhǎng)沙衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院;中南大學(xué)臨床藥理研究所;中南大學(xué)湘雅醫(yī)院臨床藥理研究所;
【分類號(hào)】:R734.2
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