靈芝倍半萜合酶基因的克隆及表達
本文選題:靈芝 + 倍半萜合酶。 參考:《河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報》2017年02期
【摘要】:倍半萜合酶是倍半萜化合物生物合成途徑中的關(guān)鍵酶。本試驗從靈芝基因組數(shù)據(jù)庫中篩選出1個編碼靈芝萜類合酶的基因,并對其進行克隆及表達。序列分析表明,該基因開放閱讀框的長度為1041bp,編碼346個氨基酸;成功構(gòu)建了1個靈芝萜類合酶基因的原核表達載體,并完成了該基因編碼的倍半萜合酶在大腸桿菌中的可溶性表達;頂空固相微萃取—氣相色譜質(zhì)譜法分析結(jié)果表明重組的靈芝萜類合酶具有催化活性。為后續(xù)研究萜類化合物的多樣性奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:Sesquiterpene synthase is a key enzyme in the biosynthesis pathway of sesquiterpene compounds. A gene encoding Ganoderma lucidum terpene synthase was screened from Ganoderma lucidum genomic database and cloned and expressed. Sequence analysis showed that the length of the open reading frame was 1041 BP, encoding 346 amino acids, and a prokaryotic expression vector of Ganoderma lucidum terpenoid synthase gene was successfully constructed. The soluble expression of sesquiterpene synthase encoded by this gene in Escherichia coli was completed, and the results of headspace solid-phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry showed that the recombinant Ganoderma lucidum terpene synthase had catalytic activity. It lays a foundation for further study on the diversity of terpenes.
【作者單位】: 天津中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院;天津中醫(yī)藥大學(xué)實驗教學(xué)部;中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81603221) 天津市自然科學(xué)基金(16JCQNJC09700) 天津市高等學(xué)?萍及l(fā)展基金(20120202/20140209) 大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目(201610063003)
【分類號】:S567.31
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,本文編號:2107560
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