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大豆轉(zhuǎn)錄因子基因GmNF-YCa可提高轉(zhuǎn)基因擬南芥滲透脅迫的耐性

發(fā)布時間:2018-07-02 11:19

  本文選題:大豆 + 核因子Y ; 參考:《作物學(xué)報》2017年08期


【摘要】:植物的核因子Y(NF-Y)是由3個亞基A、B和C組成,在響應(yīng)非生物脅迫過程中起著重要的作用。本研究以大豆鐵豐8號為材料,建立大豆c DNA文庫,以p GBKT7-Gm Di19-5為誘餌,通過酵母雙雜交技術(shù)篩選大豆c DNA文庫,獲得了大豆NF-Y轉(zhuǎn)錄因子家族亞基C的一個成員,命名為GmNF-YCa。該基因全長為864 bp,編碼287個氨基酸,屬于NF-YC亞家族。GmNF-YCa分子量為31.6 k D,等電點為5.07親水性蛋白,具有一個跨膜結(jié)構(gòu)域,無信號肽。序列分析表明,NF-YC亞家族具有很高的保守性。GmNF-YCa基因啟動子含有ARE、Box4、GATA-motif、Box I、ACE、ABRE和CAT-Box等脅迫和光響應(yīng)元件。組織特異性分析表明,GmNF-YCa基因在種子萌發(fā)期表達量最高。實時定量結(jié)果表明,GmNF-YCa受蔗糖和甘露醇的誘導(dǎo)上調(diào)表達。使用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法,將大豆GmNF-YCa基因?qū)霐M南芥,并進行了功能分析。發(fā)芽率試驗分析表明,GmNF-YCa的轉(zhuǎn)基因提高了轉(zhuǎn)基因擬南芥萌發(fā)期對滲透脅迫的耐性;改良了在蔗糖和甘露醇處理下轉(zhuǎn)基因擬南芥的根系生長和側(cè)根發(fā)育。
[Abstract]:Plant nuclear factor Y (NF-Y) is composed of three subunits, Agna B and C, and plays an important role in response to abiotic stress. In this study, a soybean c DNA library was established with soybean Tiefeng 8 as material, and pGBKT7-Gm Di19-5 was used as bait to screen soybean c DNA library by yeast two-hybrid technique. A member of soybean NF-Y transcription factor family subunit C was obtained and named as GmNF-YCa. The full length of the gene is 864 BP, encoding 287 amino acids, belonging to the NF-YC subfamily. The molecular weight of GmNF-YCa is 31.6 KD, the isoelectric point is 5.07 hydrophilic protein, it has a transmembrane domain and no signal peptide. Sequence analysis showed that the NF-YC subfamily was highly conserved. The promoter of GmNF-YCa contained stress and photoresponse elements such as ACERE and CAT-Box. Tissue specific analysis showed that GmNF-YCa gene was the highest in seed germination. The real time quantitative results showed that GmNF-YCa was up-regulated by sucrose and mannitol. The GmNF-YCa gene of soybean was introduced into Arabidopsis thaliana by Agrobacterium tumefaciens and its function was analyzed. The germination rate analysis showed that GmNF-YCa transgenic enhanced the tolerance of transgenic Arabidopsis thaliana to osmotic stress during germination, and improved the root growth and lateral root development of transgenic Arabidopsis thaliana under sucrose and mannitol treatments.
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學(xué)農(nóng)學(xué)院/旱區(qū)作物逆境生物學(xué)國家重點實驗室;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所/國家農(nóng)作物基因資源與基因改良重大科學(xué)工程/農(nóng)業(yè)部麥類生物學(xué)與遺傳育種重點實驗室;寧夏農(nóng)林科學(xué)院農(nóng)作物研究所;
【基金】:國家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(2014ZX0800916B) 國家自然科學(xué)基金項目(31371620)資助~~
【分類號】:S565.1

【參考文獻】

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【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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本文編號:2089947

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